楚屹然　郭靜　盧美娟

摘 要：本文以GB 5009.6-2016《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》第一法索氏抽提法為依據(jù)，以美國大豆為研究對象，在測定大豆粗脂肪時，對標準中變量條件所造成的檢測結(jié)果差異進行對比分析。結(jié)果表明，在其他條件相同時，大豆粉碎細度越小，其粗脂肪含量測得值越高;抽提時間越長，其粗脂肪含量測得值越高;用無水乙醚作抽提劑比用石油醚作抽提劑，測得的粗脂肪含量值高。用此國家標準方法锝出的大豆粗脂肪檢測結(jié)果應(yīng)備注標準中未具體說明的試樣粉碎細度、抽提試劑、抽提時間等具體檢測條件。

關(guān)鍵詞：美國大豆;粗脂肪;索氏抽提

Abstract：Based on the first method traditional soxhlet extraction of GB 5009.6-2016 National food safety standards The determination of fat in food， Soybeans in the United States as the research object， In the determination of soybean crude fat， can be caused by the variable condition of standard test results differences were analyzed. The results show that， other conditions being the same： soybean crushing fineness is smaller， the higher crude fat content measured values; The longer the extraction time， the crude fat content measured value is higher; With anhydrous diethyl ether as extraction agent than using petroleum ether as extraction agent， the crude fat content of measured value is high. With the national standard method quoted soybean crude fat test results should note in the standard does not specify the sample grinding fineness， extraction reagent， extraction time and other specific testing conditions.

Key words：U.S. soybean; Crude fat; Soxhlet extraction

中圖分類號：TS207.3

粗脂肪含量是油料作物的重要質(zhì)量指標，而我國進口美國的大豆幾乎全部用來生產(chǎn)大豆油、豆粕及其他副產(chǎn)品，因此準確測定大豆粗脂肪含量，對計算大豆出油率、以質(zhì)論價和評定車間生產(chǎn)工藝效果都有非常重要的意義。

大豆粗脂肪含量的測定方法有多種，但通常采用國家標準GB 5009.6-2016《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》[1]第一法索氏抽提法，也是仲裁方法，該方法具有實驗成本低、操作簡單、重現(xiàn)性好、結(jié)果準確等優(yōu)點。但該方法也存在明顯的缺點：①檢驗時間長，僅抽提這一步就需要6 h以上。②測定結(jié)果影響因素多，如抽提試劑、抽提時間、粉碎細度、抽提樣含水量、抽提液回流速度等[2-6]，因此在檢測時應(yīng)對上述影響因素進行詳細規(guī)定。國家標準GB 5009.6-2016對抽提試劑的規(guī)定是在無水乙醚和石油醚中自選，抽提時間6～10 h，對試樣粒度未做說明，這就存在由于實驗人員操作條件的不同，給檢驗結(jié)果造成一定影響。本文以國家標準索氏抽提方法為基礎(chǔ)，用不同的抽提試劑和抽提時間，對不同粉碎細度的美國大豆樣品進行測定，分析其粉碎細度、抽提試劑、抽提時間對抽提效果的影響，探討大豆樣品在測定粗脂肪時更加準確可靠的樣品制備和抽提方法，填補國家標準方法在具體針對大豆粗脂肪檢測中的不足之處有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

（1）材料。美灣大豆、美西大豆;無水乙醚（分析純）;石油醚（分析純，沸程30～60 ℃）。

（2）儀器。JFSD-100植物粉碎磨，上海嘉定糧油儀器有限公司生產(chǎn);FW100高速萬能粉碎機，天津市泰斯特儀器有限公司生產(chǎn);ZM200萊弛磨，德國Retsch公司生產(chǎn);玻璃索氏抽提裝置;DHG-9145A電熱鼓風干燥箱，上海一恒科學儀器有限公司生產(chǎn);AL204分析天平（感量0.1 mg），梅特勒托利多生產(chǎn);DZKW-4恒溫水浴鍋，北京中興偉業(yè)儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗方法

1.2.1 國家標準法

大豆粗脂肪的測定方法按照GB 5009.6-2016執(zhí)行，扦樣、分樣按照GB 5491-1985執(zhí)行。

1.2.2 樣品制備

①抽提瓶在105 ℃烘箱中烘至恒重，取出，置于干燥器中冷卻后稱量，精確至0.000 1 g。②取去除雜質(zhì)的美灣大豆和美西大豆樣品各100 g，使用萊馳磨制樣，樣品95%以上通過60目篩網(wǎng)，裝入樣品袋中備用。取去除雜質(zhì)的美灣大豆和美西大豆樣品各100 g，使用植物磨+萬能磨粉碎的方式制樣（植物磨加裝20目篩網(wǎng)粉碎后，再用萬能磨粉碎3次，每次粉碎5 s），樣品75.6%以上通過40目篩網(wǎng)，裝入樣品袋中備用。2種粉碎方式分別粉碎的是混合均勻的同一樣品，在同一條件下進行試驗。③取備用樣品，用濾紙桶（濾紙筒底部塞一層脫脂棉）稱取試樣2～5 g，精確至0.000 1 g（濾紙筒上部塞一層脫脂棉），做好編號。

1.2.3 樣品抽提與烘干

①將濾紙筒放入索氏抽提器的抽提筒內(nèi)，連接已干燥至恒重的接收瓶，由抽提器冷凝管上端加入無水乙醚或石油醚至瓶內(nèi)容積的2/3處，于水浴上加熱，使無水乙醚或石油醚不斷回流抽提。提取結(jié)束時，抽提至抽提管內(nèi)的提取液用磨砂玻璃棒檢查無油斑表明提取完畢。②取下接收瓶，回收無水乙醚或石油醚，待接收瓶內(nèi)溶劑剩余1～2 mL時在水浴上蒸干，用脫脂棉蘸無水乙醚擦凈抽提瓶外部，再于（100±5）℃干燥1 h，放干燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱量。重復(fù)以上操作直至恒重（2次稱量的差不超過2 mg），抽提瓶增加的質(zhì)量即為粗脂肪的質(zhì)量。③抽提過程用不同的抽提試劑和抽提時間，對不同粉碎細度的美國大豆樣品進行測定。抽提試劑分別用無水乙醚和石油醚，抽提時間分別做抽提5、8 h和10 h，粉碎方式分別用萊池磨制樣和植物磨+萬能磨粉碎的方式制樣（見樣品制備）。3個變量進行組合，完成抽提試驗。

1.3 粗脂肪濕基含量

粗脂肪濕基含量計算公式：

式（1）中，X-濕基粗脂肪含量，單位%;m2-干燥后抽提物與抽提瓶的質(zhì)量，單位g;m1-抽提瓶的質(zhì)量，單位g;m-試樣的質(zhì)量，單位g。

1.4 實驗數(shù)據(jù)處理方法

所有實驗重復(fù)2次，如2次實驗結(jié)果之差不超過0.4%，則取2次測定的算術(shù)平均值為測定結(jié)果。如果2次實驗結(jié)果之差超過0.4%，則另取2份試樣進行測定。如測定結(jié)果仍超過0.4%，而前兩次測定平均值與后兩次測定值之差不超過0.4%，則取4次測定的平均值作為測定結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 同一方法同一樣品不同檢測機構(gòu)的粗脂肪檢測結(jié)果分析

將一份美西大豆實驗樣品，混合均勻后，用標準分樣器均勻分成6份同時寄往6家不同的第三方檢測機構(gòu)，這6家檢測機構(gòu)的檢測依據(jù)都是GB 5009.6-2016《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》第一法索氏抽提法，給出的檢測結(jié)果見表1。為了考察檢測結(jié)果的一致性，本文將A機構(gòu)檢測結(jié)果與其他機構(gòu)檢測結(jié)果之間的相對相差進行了計算，計算結(jié)果見表1。

2.2 不同條件下大豆粗脂肪含量檢測結(jié)果對比

選取兩個不同輪船的美西大豆和美灣大豆作為試驗樣品，用不同的粉碎細度、抽提試劑和抽提時間，對不同粉碎細度的美西大豆樣品進行測定，結(jié)果見表2和表3。在GB 5009.6-2016《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》第一法索氏抽提法7精密度中明確說明，在重復(fù)性條件下獲得的2次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%，也就是方法的相對相差不超過10%，但通過表1可知，A第三方檢測機構(gòu)的粗脂肪檢測結(jié)果與D、E、F第三方檢測機構(gòu)的檢測結(jié)果的相對相差已經(jīng)超過方法的正常允許范圍，尤其是A機構(gòu)與F機構(gòu)，其結(jié)果相對相差超出了允許值的50%，說明國標方法在大豆粗脂肪檢測的實際應(yīng)用中存在很大的操作條件選取誤差，在用此國標方法報出的大豆粗脂肪檢測結(jié)果中應(yīng)備注標準中未定量規(guī)定但影響檢測結(jié)果的條件。

由表2、表3可知，其他條件相同時，大豆粉碎細度越小，其粗脂肪含量測得值越高;其他條件相同時，用無水乙醚進行抽提比用石油醚進行抽提，測得的粗脂肪含量更高;其他條件相同時，抽提時間越長，其粗脂肪含量測得值越高。因此，在使用GB 5009.6-2016《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》第一法索氏抽提法進行大豆粗脂肪測定時，測定結(jié)果受試樣粉碎細度、抽提時間、抽提試劑的影響，在給出結(jié)果時，應(yīng)標注上述條件。

3 結(jié)論

采用GB 5009.6-2016《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》第一法索氏抽提法進行大豆粗脂肪測定時，易受試樣粉碎細度、抽提時間和抽提試劑的影響，造成不同實驗室之間測定結(jié)果差異明顯。試驗表明，大豆粉碎細度越小，抽提時間越長，其粗脂肪含量測得越高;用無水乙醚進行抽提比用石油醚進行抽提，測得粗脂肪含量更高。在使用上述國家標準方法給出結(jié)果時，應(yīng)標注試樣的粉碎細度、抽提時間、抽提試劑等條件。

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