宋繼華 吳靜蔓

【摘要】：目的：探討三顆針?biāo)崛∥锏目寡缀玩?zhèn)痛效果。方法：采用小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性法和二甲苯致小鼠耳腫脹法探討其抗炎效果；采用醋酸扭體法和熱板法探討其鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果：抗炎實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，三顆針?biāo)嵛锏闹?、高劑量組對(duì)于二甲苯致小鼠腫脹有明顯的抑制作用，與空白組對(duì)比差異具有極顯著性（P<0.01）；三顆針?biāo)嵛锏拇蟆⒅?、小劑量組對(duì)于小鼠毛細(xì)血管通透性的增加有抑制作用（P<0.01）。鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，三顆針?biāo)嵛镄?、中、大劑量組對(duì)于醋酸致小鼠的扭體有抑制作用（P<0.05）；在給藥后，三顆針?biāo)嵛镄?、中、大劑量組能提高小鼠的痛閾值（P<0.05）。結(jié)論：三顆針?biāo)嵛镉墟?zhèn)痛抗炎作用。

【關(guān)鍵詞】：鎮(zhèn)痛 抗炎 三顆針?biāo)嵛?/p>

三顆針是一種很常見的中藥材，而且藥理作用顯著，尤其是在抗菌消炎，清熱解毒 ，降壓，利膽等方面，因三棵針有毒，應(yīng)病愈即止，且不宜長期服用。主治：肝炎。配方：三顆針（三錢）、地星宿（一兩）、木通（一兩），煎水內(nèi)服 ，每天三次、每次100ml。主治：肝炎復(fù)水 。配方：三顆針（三錢），鐵筷子（五錢）、狗地菜草根（五錢）、甘草（二錢）、木通（一兩），煎水內(nèi)服，每天三次、每次100ml。本人導(dǎo)師名吳必發(fā)，以上配方是他為病人治療時(shí)所用的配方，以期為探索其抗炎鎮(zhèn)痛作用提供依據(jù)。

實(shí)驗(yàn)部分

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明小鼠，體質(zhì)量（20±1）g，清潔級(jí)，由貴陽醫(yī)學(xué)院研究中心提供。實(shí)驗(yàn)前將動(dòng)物在室內(nèi)適應(yīng)性飼養(yǎng)3d，室溫（20～28℃），相對(duì)濕度60%～80%。

1.2藥品與試劑

硫酸羅通定注射液（浙江誠意藥業(yè)股份有限公司、規(guī)格：60mg/2ml、批號(hào)：134018）；醋酸地塞米松片（天津藥業(yè)新鄭制藥有限公司、規(guī)格：每片75mg、批號(hào)140643）；二甲苯（青島正華化工有限公司 、批號(hào) ：130418）；甲醇（東光鑫源化工有限公司、批號(hào)：21300737）；冰醋酸（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司、批號(hào)：T20090625）；氯化鈉注射液（貴州天地藥業(yè)有限責(zé)任公司、批號(hào)：A12092120）。

1.3儀器與設(shè)備

TGL-16B離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；YLS-6B型智能熱板儀（淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司）；752型紫外分光光度計(jì)（南京麒麟分析儀器有限公司）；電子分析天平（奧斯國際貿(mào)易（上海）有限公司）；L-204電子天平（梅特勒-托利多中國分公司）。

1.4實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)的影響[12-14] 取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，空白對(duì)照組，羅通定組（60mg/kg），三顆針?biāo)嵛锎螅?1.3mg/kg）、中（10.2mg/kg）、?。?.1mg/kg）劑量組。均灌胃給藥20ml/kg .qd，連續(xù)4d ?？瞻讓?duì)照組給予同體積純凈水。末次藥后1h、小鼠腹腔注射0.7%醋酸溶液10ml/kg，記錄注射醋酸后15min內(nèi)小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)。

1.4.2 對(duì)熱板儀致小鼠疼痛的影響 [14-15] 取雌性小鼠，放入（55±4） ℃熱板測(cè)痛儀，各小鼠自放入到出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間即為痛閾值，5min后重復(fù)1次。痛閾<5s或>30s者，以及喜跳者，棄去不用。小鼠分組及給藥同“1.4.1”項(xiàng)，分別在末次給藥后30、60、90、120min測(cè)定小鼠的痛閾。小鼠在熱板測(cè)痛閾儀內(nèi)60s仍無痛覺反應(yīng)則取出，按60s計(jì)。

1.4.3對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響[15-16] 取雄性小鼠50只，隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組，地塞米松組（5.0mg/kg），三顆針?biāo)嵛镄。?.1mg/kg）、中（10.2mg/kg）、大（21.3mg/kg）劑量組。均灌胃給藥，20ml/kg.qd，連續(xù)7d，空白對(duì)照組給予同體積純凈水。于末次1h，各組小鼠于右耳廓滴二甲苯20微升致炎（正、反面各滴10微升），15min后脫勁椎處死，直徑6mm打孔器打下左右耳朵，稱定質(zhì)量，以兩耳質(zhì)量差值作為腫脹度，并計(jì)算抑制率（%）=（空白對(duì)照組平均兩耳質(zhì)量差—給藥組平均兩耳質(zhì)量差）/空白對(duì)照組平均兩耳質(zhì)量差×100%。

1.4.4對(duì)小鼠腹腔通透性的影響 [17-18] 分組及給藥方法同“1.4.3”項(xiàng)，于末次給藥后1h，經(jīng)小鼠尾靜脈注射0.25%伊文思藍(lán)，10ml/kg，小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液10ml/kg，15min后將小鼠處死，腹腔注射0.9%氯化鈉溶液6ml沖洗，腹腔洗出液2000r/min 離心10min（r=8cm），取上清液體用紫外-分光光度計(jì)于590nm波長處測(cè)定吸光度（A）值。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0版軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±s）表示，采用t檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1對(duì)醋酸小鼠扭體反應(yīng)的影響 見表1。 三顆針?biāo)嵛锎蟆⒅袆┝拷M扭體反應(yīng)次數(shù)明顯少于空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05）。提示三顆針?biāo)嵛飳?duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)有抑制作用。

2.2對(duì)熱板儀致小鼠疼痛的影響 見表2。 三顆針?biāo)嵛锎髣┝拷M小鼠30、60、90、120min痛閾值均明顯低于空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05）；中劑量組小鼠60min 痛閾值明顯低于空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；小劑量組小鼠120min痛閾值明顯低于空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。提示三顆針?biāo)嵛锟商岣邿岚逯滦∈筇弁吹耐撮摗?/p>

2.3對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響 見表3。 三顆針?biāo)嵛锎?、中劑量組耳腫脹明顯低于空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05）。提示三顆針?biāo)嵛飳?duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹有抑制作用。

2.4 對(duì)小鼠腹腔通透性的影響 見表4。 三顆針?biāo)嵛镄?、中劑量組腹腔通透性A值明顯低于空白對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。提示三顆針?biāo)嵛飳?duì)0.6%醋酸致小鼠腹腔通透性增加有抑制作用。

3討論

主治：肝炎。配方：三顆針（三錢），地星宿（一兩），木通（一兩），煎水內(nèi)服 ，每天三次、每次100ml，本土苗醫(yī)用此配方治好無數(shù)個(gè)肝炎患者。由此可做猜想其中應(yīng)有一味或一味以上的藥材有抗炎鎮(zhèn)痛作用。在本次實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)得到論證，所以在探尋某未知物是否有抗炎鎮(zhèn)痛作用時(shí)可以運(yùn)用此實(shí)驗(yàn)方法。小鼠熱板法屬于反射性疼痛模型，對(duì)僅有外周鎮(zhèn)痛作用的非甾體抗炎藥不敏感，是區(qū)分麻醉性鎮(zhèn)痛藥和非甾體抗炎藥有效模型【19】。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，三顆針?biāo)嵛锎?、中劑量?duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)有抑制作用；大劑量三顆針?biāo)嵛镌?0、60、90、120min 可高提熱板致小鼠疼痛的痛閾；三顆針?biāo)嵛镏袆┝拷M在60min可提高熱板致小鼠疼痛的痛閾；三顆針?biāo)嵛镄┝拷M小鼠在120min痛閾值高于空白對(duì)照組。

炎癥是機(jī)體對(duì)組織損傷或致炎因子侵入所產(chǎn)生的防御為主的反應(yīng)。炎癥的主要表現(xiàn)為紅、腫、熱、痛。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，三顆針?biāo)嵛锎蟆⒅袆┝靠梢种贫妆街滦∈蠖[脹度產(chǎn)生；三顆針?biāo)嵛锎蟆⑿┝靠梢种?.6%醋酸所致小鼠腹腔通透性增加。

4 結(jié)論

三顆針?biāo)嵛锞哂酗@著的鎮(zhèn)痛效果，三顆針?biāo)嵛锎髣┝拷M的鎮(zhèn)痛效果最好，其鎮(zhèn)痛機(jī)制目前仍不清楚，需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)論證。

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