丁彥 周建榮 帥萍 廖長(zhǎng)風(fēng) 王穎 袁小亮

[摘要] 目的 探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、表皮生長(zhǎng)因子（EGFR）及CD40檢測(cè)在鑒別良惡性胸腔積液中的價(jià)值。 方法 選取2015年6月～2017年6月于贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院住院并確診為肺癌合并胸腔積液的患者60例為觀察組，選取同期住院的結(jié)核性胸膜炎合并胸腔積液的患者60例為對(duì)照組，檢測(cè)所有患者的胸腔積液標(biāo)本，并比較兩組VEGF、EGFR及CD40的表達(dá)水平，采用受試者工作特征曲線（ROC）分析各項(xiàng)指標(biāo)對(duì)惡性胸腔積液的診斷價(jià)值。 結(jié)果 觀察組胸腔積液中VEGF、EGFR及CD40的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。ROC曲線分析顯示，VEGF診斷惡性胸腔積液的曲線下面積為0.840，以893.50 pg/mL為截點(diǎn)值，敏感性為70.00%，特異性為91.70%。EGFR診斷惡性胸腔積液的曲線下面積為0.839，以29.50 mg/L為截點(diǎn)值，敏感性為80.00%，特異性為88.30%。CD40診斷惡性胸腔積液的曲線下面積為0.911，以41.50 pg/mL為截點(diǎn)值，敏感性為85.00%，特異性為93.30%。CD40對(duì)良惡性胸腔積液的診斷效能優(yōu)于VEGF、EGFR。 結(jié)論 惡性胸腔積液中VEGF、EGFR及CD40的表達(dá)水平顯著增高，三者對(duì)良惡性胸腔積液的鑒別均有一定的診斷價(jià)值，但CD40診斷惡性胸腔積液的敏感性及特異性均高于VEGF、EGFR。

[關(guān)鍵詞] 良惡性胸腔積液;鑒別診斷;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子;表皮生長(zhǎng)因子;CD40

[中圖分類號(hào)] R561.3? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2019）07（b）-0141-04

Value of detection of VEGF，EGFR and CD40 in differential diagnosis of benign and malignant pleural effusion

DING Yan1? ?ZHOU Jianrong1? ?SHUAI Ping2? ?LIAO Changfeng3? ?WANG Ying1? ?YUAN Xiaoliang1

1.Department of Respiration， the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University， Jiangxi Province， Ganzhou? 341000， China; 2.Department of Pathology， the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University， Jiangxi Province， Ganzhou? ?341000， China; 3.Blood Laboratory， the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University， Jiangxi Province， Ganzhou? ?341000， China

[Abstract] Objective To explore the value of detecting vascular endothelial growth factor （VEGF）， epidermal growth factor （EGFR） and CD40 in differential diagnosis of benign and malignant pleural effusion. Methods Sixty patients with lung cancer and pleural effusion hospitalized and diagnosed in the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University from June 2015 to June 2017 were selected as observation group. 60 tuberculous pleurisy patients with pleural effusion in the same period were selected as control group. The expression levels of VEGF， EGFR and CD40 in pleural effusion samples of all patients were detected and compared between two groups. The diagnostic value of each index for malignant pleural effusion was analyzed by receiver operating characteristic curve （ROC）. Results The expression level of VEGF， EGFR and CD40 in pleural effusion of observation group was significantly higher than those of control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. ROC curve analysis showed that the area under the curve of VEGF in the diagnosis of malignant pleural effusion was 0.840， with 893.50 pg/mL as the cut-off point， the sensitivity was 70.00%， and the specificity was 91.70%. The area under the curve of EGFR in the diagnosis of malignant pleural effusion was 0.839， and the cut-off point was 29.50 mg/L. The sensitivity was 80.00% and specificity was 88.30%. The area under the curve of CD40 in the diagnosis of malignant pleural effusion was 0.911， and the cut-off point was 41.50 pg/mL. The sensitivity was 85.00% and the specificity was 93.30%. The diagnostic efficiency of CD40 in benign and malignant pleural effusion was better than that of VEGF and EGFR. Conclusion The expression of VEGF， EGFR and CD40 in malignant pleural effusion is significantly increased， the three methods have certain diagnostic value in differentiating benign and malignant pleural effusion. However， the sensitivity and specificity of CD40 in the diagnosis of malignant pleural effusion is higher than that of VEGF and EGFR.

[Key words] Benign and malignant pleural effusion; Differential diagnosis; Vascular endothelial growth factor; Epidermal growth factor; CD40

胸腔積液是常見(jiàn)的呼吸科疾病，可由原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性腫瘤、炎癥等多種病因引起，臨床多表現(xiàn)為胸痛、咳嗽、呼吸困難等癥狀，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，隨著近年來(lái)環(huán)境污染加重、吸煙、職業(yè)暴露等因素，使肺癌的發(fā)病率及病死率均有升高趨勢(shì)[1]。惡性胸腔積液是肺癌常見(jiàn)的并發(fā)癥，部分患者以胸腔積液為首發(fā)的臨床癥狀，因此，尋找直接或間接反映良惡性胸腔積液的指標(biāo)以及探討聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值仍然是近年研究的熱點(diǎn)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是重要的腫瘤血管生長(zhǎng)因子之一，在惡性腫瘤胸腔積液患者血清及胸腔積液中的表達(dá)均高于結(jié)核性胸腔積液者[2-3]。表皮生長(zhǎng)因子（EGFR）是存在于細(xì)胞膜表面的糖蛋白受體，研究表明EGFR在肺腺癌胸腔積液細(xì)胞蠟塊中的表達(dá)高于正常肺組織細(xì)胞[4]。CD40表達(dá)于B淋巴細(xì)胞、胸腺上皮細(xì)胞等多種細(xì)胞，參與機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程，且在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用[5]。胸腔積液腫瘤標(biāo)志物對(duì)于疾病性質(zhì)的早期診斷具有一定的意義，本研究通過(guò)對(duì)胸水中VEGF、EGFR及CD40的檢測(cè)，探討其鑒別良惡性胸腔積液的準(zhǔn)確性，以期進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)胸腔積液惡性程度判定的能力。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年6月～2017年6月于贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）住院治療確診為肺癌合并胸腔積液的患者60例為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中國(guó)《原發(fā)性肺癌診療規(guī)范（2015年版）：外科部分》[6]的診斷標(biāo)準(zhǔn);②留取胸腔積液標(biāo)本前未經(jīng)放療、化療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并低蛋白血癥、淋巴管引流手足引起的漏出性胸腔積液;②合并其他系統(tǒng)惡性腫瘤引起的轉(zhuǎn)移性胸腔積液;③合并嚴(yán)重的自身免疫性疾病;④近期使用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑藥物。選取同期在我院住院的結(jié)核性胸膜炎合并胸腔積液的患者60例作為對(duì)照組，所有患者均簽署知情同意書(shū)，經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后開(kāi)展。兩組患者性別、年齡、病程、吸煙史、飲酒史比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。

1.2 方法

所有患者入院后均進(jìn)行胸腔穿刺或胸腔閉式引流，收集胸水標(biāo)本15 mL，以8.5 cm的離心半徑2500 r/min離心15 min，留取上清液置于-70℃冰箱保存?zhèn)錅y(cè)。采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)標(biāo)本中VEGF、EGFR及CD40的表達(dá)水平，相關(guān)試劑盒購(gòu)于上海康朗生物科技有限公司（生產(chǎn)批號(hào)：20150207），嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法，診斷價(jià)值分析采用受試者工作特征曲線（ROC），以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組胸腔積液中VEGF、EGFR及CD40表達(dá)比較

觀察組胸腔積液中VEGF、EGFR及CD40表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見(jiàn)表2。

2.2 VEGF、EGFR及CD40對(duì)良惡性胸腔積液診斷的價(jià)值分析

ROC曲線分析顯示，CD40診斷惡性胸腔積液的曲線下面積為0.911，以41.50 pg/mL為截點(diǎn)值，敏感性為85.00%，特異性為93.30%;VEGF診斷惡性胸胸腔積液的曲線下面積為0.840，以893.50 pg/mL為截點(diǎn)值，敏感性為70.00%，特異性為91.70%;EGFR診斷惡性胸腔積液的曲線下面積為0.839，以29.50 pg/mL為截點(diǎn)值，敏感性為80.00%，特異性為88.30%，CD40診斷良惡性胸腔積液的診斷效能要優(yōu)于VEGF和EGFR。見(jiàn)圖1。

3 討論

胸腔積液是由于全身或局部病變使胸膜毛細(xì)血管、淋巴系統(tǒng)的濾過(guò)與吸收動(dòng)態(tài)平衡受到破壞而產(chǎn)生。胸腔積液是許多肺部疾病常見(jiàn)的并發(fā)癥，也是查找疾病病因、判斷其良惡性的重要媒介[7]。惡性胸腔積液可發(fā)生于多種類型的惡性腫瘤，能導(dǎo)致呼吸困難，疼痛，體力活動(dòng)下降甚至惡病質(zhì)狀態(tài)，而肺癌是引起惡性胸腔積液的主要原因之一[8]，肺癌在中國(guó)的發(fā)病率及死亡率均居首位，好發(fā)于60歲以上的老年人[9]，且起病隱匿，50%以上的肺癌患者伴有胸腔積液[10]。肺癌并發(fā)胸腔積液往往預(yù)示著生存時(shí)間較短[11-12]。目前胸腔積液的診斷主要依靠細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)和胸膜活檢后病理學(xué)證實(shí)，但陽(yáng)性率低，假陰性率高，且活檢為有創(chuàng)檢查。因此，近年來(lái)采用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)來(lái)鑒別良惡性胸腔積液成為研究熱點(diǎn)。本研究通過(guò)對(duì)胸腔積液中VEGF、EGFR、CD40進(jìn)行檢測(cè)，探討其鑒別良惡性胸腔積液的準(zhǔn)確性，以期進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)胸腔積液惡性程度判定的能力。

VEGF被稱為血管通透因子，是一種功能性糖蛋白，能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，促進(jìn)體內(nèi)新生血管的形成，同時(shí)能夠促進(jìn)纖維蛋白酶的表達(dá)，進(jìn)而溶解血管基底膜及間質(zhì)纖維，利于新生血管的生長(zhǎng)，已被公認(rèn)為腫瘤血管生成中最重要的調(diào)節(jié)因子之一，能夠參與腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移等多種生理病理過(guò)程[13]。研究表明，惡性腫瘤患者血清及腫瘤所致惡性胸腔積液中VEGF的水平均明顯增高[14]。本研究中肺癌組胸腔積液中VEGF的水平高于結(jié)核性胸腔積液組，與以往文獻(xiàn)報(bào)道一致[15]。VEGF促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，破壞細(xì)胞間的連接，增加細(xì)胞間隙而使血管通透性增加，血漿蛋白外滲使胸腔積液的生成超過(guò)吸收，進(jìn)而促進(jìn)胸腔積液的形成[16]。葉颯等[17]研究發(fā)現(xiàn)惡性胸腔積液中VEGF的水平與非小細(xì)胞肺癌患者的臨床預(yù)后密切相關(guān)。值得注意的是，Popper[18]發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞可以產(chǎn)生和分泌VEGF，促進(jìn)胸腔積液形成、血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移進(jìn)展，可見(jiàn)VEGF可能是肺癌患者胸腔積液發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵病理因素。本研究經(jīng)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)VEGF診斷惡性胸腔積液的曲線下面積為0.840，診斷效率較好，可見(jiàn)VEGF可作為良惡性胸腔積液鑒別診斷的指標(biāo)之一。