黃壽輝

摘 要：以4個(gè)國(guó)外引進(jìn)的菠蘿蜜品種MD、MB、MX、MS為材料，觀測(cè)其自然越冬過(guò)程中（2017年11月至2018年3月）田間寒害情況，同時(shí)測(cè)定葉片電導(dǎo)率、可溶性糖含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性，比較各生理指標(biāo)和田間寒害情況。結(jié)果表明，各指標(biāo)均呈先升后降的變化趨勢(shì)，且峰值多出現(xiàn)在1月，4個(gè)菠蘿蜜品種的抗寒能力由強(qiáng)到弱排列順序：MS>MX>MB>MD，該結(jié)果為菠蘿蜜品種在南寧地區(qū)引種和適應(yīng)性栽培提供科學(xué)參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：菠蘿蜜 自然越冬 生理指標(biāo) 抗寒性

Abstract：Taking four foreign jackfruit varieties MD， MB， MX and MS as materials，we conducted an experiment to observe and analyze their cold damage in field during natural overwintering period （from Nov. 2017 to Mar. 2018）， and simultaneously determine and compare their various physiological indexes including leaf electric conductivity， soluble sugar，malondialdehyde （MDA） and the activities of superoxide dismutase （SOD）. The results show that all indexes increased first and then decreased， and the peak value mostly appeared in January. The cold resistance of the tested cultivars ranked from high to low was： MS>MX>MB>MD. The results provide a scientific reference for the introduction and adaptive cultivation of jackfruit varieties in Nanning.

Key words：Jackfruit;natural overwintering;physiological index;cold resistance

菠蘿蜜（Artocarpus heteroyllus Lam.），是世界上單果重量較大的水果，一般重達(dá)5～20 kg，最重超過(guò)50 kg[1]，加之果實(shí)肥厚柔軟，清甜可口，香味濃郁，營(yíng)養(yǎng)豐富，故被譽(yù)為“熱帶水果皇后”[2]，在市場(chǎng)上頗受歡迎。菠蘿蜜屬于地域性水果，對(duì)于原產(chǎn)地的光、溫、水等需求具有專一性，周年生長(zhǎng)最適宜溫度范圍是20～30℃，若引種地溫度低于10℃，就會(huì)發(fā)生冷害。研究不同品種的耐寒性，對(duì)菠蘿蜜的引種工作和適應(yīng)性栽培具有重要的意義。植物的耐寒機(jī)制及耐寒性方而已有大量研究，尤其是與耐寒性有關(guān)的葉片電導(dǎo)率、可溶性糖、丙二醛、超氧化物歧化酶脯氨酸等生理生化指標(biāo)與耐寒性之間的關(guān)系一直是研究熱點(diǎn)。李麗淑等[3]通過(guò)測(cè)定馬鈴薯葉綠素、相對(duì)含水量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶活性評(píng)價(jià)費(fèi)烏瑞它、興佳2號(hào)、麗薯6號(hào)3個(gè)馬鈴薯品種的抗寒性。程軍勇等[4]以鄂油系和長(zhǎng)林系油茶品種為研究對(duì)象，設(shè)置不同低溫脅迫處理，測(cè)定各品種的相對(duì)電導(dǎo)率和丙二醛、脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量以及超氧化物歧化酶活性等指標(biāo)，比較各生理指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性。孫程序等[5]通過(guò)測(cè)定檳榔葉片的相對(duì)電導(dǎo)率并結(jié)合Logistic方程求得檳榔半致死溫度，從而比較出不同檳榔品種的抗寒性。目前關(guān)于菠蘿蜜耐寒性的研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定與菠蘿蜜抗寒相關(guān)生理生化指標(biāo)的測(cè)定，結(jié)合田間抗寒情況觀測(cè)結(jié)果，研究其抗寒性，為進(jìn)一步開(kāi)展菠蘿蜜耐寒性的研究和南寧地區(qū)菠蘿蜜品種引種和適應(yīng)性栽培提供科學(xué)參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試的4個(gè)菠蘿蜜品種均為2年樹(shù)齡嫁接苗，分別命名為MD、MB、MX、MS，種植于廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所熱區(qū)加工兼鮮食型水果種質(zhì)資源圃，株行距為5 m×5m。4個(gè)品種均為灌木型，其中MD為大葉種，MS為中葉種，MX和MB為小葉種，入冬前各品種植株生長(zhǎng)良好。

1.2 方法

1.2.1 月氣溫確定

根據(jù)廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所氣象站收集的天氣信息，記錄實(shí)驗(yàn)區(qū)域2017年11月至2018年3月每天的最高氣溫與最低氣溫，并計(jì)算各月份的月最高氣溫、最低氣溫和平均氣溫（表1）。

1.2.2 菠蘿蜜優(yōu)株田間寒害調(diào)查統(tǒng)計(jì)

于2018年1月（越冬期月均氣溫最低月份）中旬，對(duì)田間菠蘿蜜植株進(jìn)行寒害調(diào)查與分析。每個(gè)品種選取10株長(zhǎng)勢(shì)良好的單株，每株在東、西、南、北4個(gè)方位各選1個(gè)枝組，統(tǒng)計(jì)10株共40個(gè)枝組的落葉率、芽受害率、葉寒害斑作為每個(gè)品種田間寒害情況，根據(jù)葉片脫落后留下的葉痕，統(tǒng)計(jì)落葉數(shù)和正常葉片數(shù)。落葉率（%）=落葉數(shù)量/調(diào)查總?cè)~數(shù)×100。對(duì)選取的枝組上的頂芽和腋芽受寒害情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，芽變黑或變黃為受害芽，保持綠色為正常芽，芽受害率（%）=受害芽/（受害芽+正常芽）×100。

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定方法

于2017年11月至2018年3月的每個(gè)月的月中采樣，選取10株樣株，采集無(wú)病蟲(chóng)害、長(zhǎng)勢(shì)一致的當(dāng)年生枝條從芽尖往下第2至第3片葉，每個(gè)品種共取30 葉，用清水沖洗干凈并吸干水分后用打孔器打孔，混勻后取樣，電子天平稱取3 g，重復(fù)3次。電導(dǎo)率的測(cè)定參照張樹(shù)寶等[6]方法，采用蕙酮比色法[7]測(cè)定可溶性糖含量;采用氮藍(lán)四哩（NBT）顯色法[8]測(cè)定超氧化物歧化酶活性，丙二醛含量采用硫代巴比妥酸法測(cè)定。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)處理采用SPSS13.0軟件數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，EXCEL制作圖表。數(shù)據(jù)均采用單因素方差分析和LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 葉片受傷害程度

低溫脅迫后不同菠蘿蜜品種嫩芽和葉片受寒害情況（圖1）統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2，從表2可知，不同品種的菠蘿蜜所受傷害程度不同，其受傷害程度由大到小順序：MD>MB>MX>MS，菠蘿蜜耐寒性越弱，其受寒害越重。

2.2 自然越冬不同菠蘿蜜品種成熟葉片相對(duì)電導(dǎo)率變化規(guī)律

由不同品種菠蘿蜜葉片相對(duì)電導(dǎo)率（圖2）可以看出，在越冬期間（11月至第2年3月）隨著氣溫的變化，菠蘿蜜葉片的相對(duì)電導(dǎo)率呈先升后降的變化趨勢(shì)，到1月份達(dá)到最高點(diǎn)。不同品種葉片相對(duì)電導(dǎo)率的變化趨勢(shì)幅度明顯不同，其中MD品種上升最快，在最冷的12月、1月、2月其電導(dǎo)率極顯著高于其他3個(gè)品種，其次是MB品種，在12月、1月、2月其電導(dǎo)率也極顯著高于MX品種和MS品種，MX相對(duì)電導(dǎo)率略高于MS。

2.3 自然越冬菠蘿蜜成熟葉片丙二醛變化規(guī)律

如圖3所示，從入冬開(kāi)始，菠蘿蜜葉片丙二醛含量逐漸上升，到1月份達(dá)到最高，最后隨著天氣回暖，又逐漸下降。4個(gè)菠蘿蜜品種中MD品種丙二醛含量上升幅度最大，在12月、1月、2月、均極顯著高于另外3個(gè)品種，3月份時(shí)與MB品種相近，但依然極顯著高于MX、MS ?2個(gè)品種。MB品種丙二醛含量低于MD但也極顯著高于MX和MS。MX和MS丙二醛在整個(gè)越冬過(guò)程中含量相當(dāng)，變化幅度較小。

2.4 自然越冬菠蘿蜜成熟葉片可溶性糖的變化規(guī)律

低溫條件下，植物體內(nèi)可溶性糖含量會(huì)逐漸升高以調(diào)節(jié)細(xì)胞膜滲透壓，維持細(xì)胞膜正常功能，使植物免受傷害。如圖4所示，各品種菠蘿蜜葉片可溶性糖在越冬過(guò)程中首先穩(wěn)步上升，到溫度最低的1月份升到最高，隨后隨著氣溫逐漸回升，可溶性糖也逐步下降。在氣溫較低的12月、1月、2月，MS和MX品種可溶性糖含量一直處于較高水平，在1月份分別達(dá)到32.51 mg/g和30.66 mg/g，顯示出較強(qiáng)耐寒性，而MD和MB可溶性糖含量相對(duì)較低，表明其耐寒性較弱。

2.5 自然越冬菠蘿蜜成熟葉片超氧化物歧化酶的變化規(guī)律

如圖5所示，入冬后，11月至12月隨著南寧市氣溫劇烈下降，菠蘿蜜葉片的超氧化物歧化酶活性急劇增強(qiáng)，12月至1月隨著氣溫進(jìn)一步下降到最低，菠蘿蜜葉片的超氧化物歧化酶活性也持續(xù)增強(qiáng)到最大值，隨后隨著氣溫回暖，菠蘿蜜葉片的超氧化物歧化酶活性便逐漸減弱，到3月份基本恢復(fù)到入冬前的水平。在整個(gè)越冬過(guò)程中，MS菠蘿蜜品種超氧化物歧化酶活性表現(xiàn)最強(qiáng)，尤其在1月份，達(dá)到171.62 U/g，極顯著高于MX品種的128.43 U/g、MB品種的117.63 U/g和MD品種的102.75 U/g，可以推測(cè)MS品種有相對(duì)較強(qiáng)的耐寒性。

3 討論

菠蘿蜜是熱帶果樹(shù)，喜溫怕冷，如果受到低溫影響，就會(huì)出現(xiàn)不同程度的寒害，如葉片會(huì)變黃褐色有氣味，芽頭變黑脫落，芽下節(jié)枝條變黑干枯等現(xiàn)象。不同菠蘿蜜品種遺傳特性不同，抵御低溫能力也不同，所受到傷害程度也不同，根據(jù)菠蘿蜜田間寒害情況可以得出本次研究參試4個(gè)菠蘿蜜品種抗寒強(qiáng)弱順序是MS>MX>MB>MD。

當(dāng)植物遭受低溫脅迫時(shí)會(huì)啟動(dòng)自身的防御體系，這個(gè)體系是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程。首先細(xì)胞膜系統(tǒng)受到低溫刺激會(huì)不均勻收縮，膜脂發(fā)生相變和過(guò)氧化，甚至發(fā)生冰凍造成機(jī)械性傷害，從而使細(xì)胞膜半透性功能喪失，電解質(zhì)外滲，且細(xì)胞膜損傷越嚴(yán)重，離子滲出率越高，膜的電導(dǎo)率也越高，因此可通過(guò)測(cè)定電導(dǎo)率確定植物的受寒害程度[9]相對(duì)電導(dǎo)率是衡量植物抗寒能力的一個(gè)指標(biāo)，電導(dǎo)率越大說(shuō)明葉片質(zhì)膜所受的寒害越嚴(yán)重。根據(jù)Sukumaran[10] 提出的植物組織受凍溫度（LT50）為相對(duì)電導(dǎo)率為50 %的標(biāo)準(zhǔn)，4個(gè)菠蘿蜜品種自然越冬過(guò)程中電導(dǎo)率均未達(dá)到50 %，雖然受到一定凍害，但溫度回升后電導(dǎo)率均逐漸下降，植株也開(kāi)始萌發(fā)新芽。其次是可溶性糖增多，可溶性糖是植物體內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)， 并且是合成有機(jī)物的基礎(chǔ)和能量來(lái)源，植物受到低溫脅迫時(shí)會(huì)通過(guò)升高可溶性糖含量來(lái)提高細(xì)胞滲透壓，增強(qiáng)細(xì)胞保水能力，維持細(xì)胞膜正常功能，使植物免受傷害[11]。接著是丙二醛含量變化，丙二醛是脂質(zhì)過(guò)氧化作用的終產(chǎn)物，其含量是衡量膜脂過(guò)氧化強(qiáng)弱的主要指標(biāo)之一， 當(dāng)植物遭受低溫脅迫時(shí)， 低溫會(huì)導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化反應(yīng)加劇，丙二醛含量升高，引起膜系統(tǒng)損傷，進(jìn)而影響細(xì)胞膜透性[12]。植物抗寒能力越弱，丙二醛累積速度越快，累積量也越多，反之植物抗寒能力越強(qiáng)，丙二醛累積速度越慢，累積量也越少。最后細(xì)胞為了應(yīng)對(duì)當(dāng)植物遇到低溫脅迫細(xì)胞的自主防御能力會(huì)下降，自由基代謝平衡失調(diào)，時(shí)活性氧自由基等物質(zhì)的大量積累，使植物受到傷害，在植物耐寒力承受范圍之內(nèi)， 超氧化物歧化酶活性增強(qiáng)，從而降低膜脂過(guò)氧化強(qiáng)度，保持細(xì)胞內(nèi)自由基平衡[13]?？梢?jiàn)，植物遭受低溫脅迫時(shí)，植物體內(nèi)應(yīng)激反應(yīng)非常復(fù)雜，單一指標(biāo)很難準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)植物耐寒性強(qiáng)弱， 探索多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)植物抗寒性已成為當(dāng)今研究低溫脅迫的發(fā)展趨勢(shì)[14，15]。本研究通過(guò)測(cè)定自然越冬過(guò)程中菠蘿蜜葉片電導(dǎo)率、可溶性糖含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性4個(gè)生理生化指標(biāo)，分析其變化規(guī)律，結(jié)合田間寒害情況，系統(tǒng)分析4個(gè)菠蘿蜜品種的抗寒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果相對(duì)客觀可靠，具有一定的參考意義。

引進(jìn)的4個(gè)菠蘿蜜品種原產(chǎn)地為東南亞地區(qū)，東南亞處熱帶季風(fēng)氣候和熱帶雨林氣候，終年高溫，而南寧處于亞熱帶季風(fēng)氣候，兩地氣溫最大差異在于冬天，能否順利越冬是東南亞植物在南寧地區(qū)引種成功與否的關(guān)鍵，試驗(yàn)期間的溫度與南寧往年同期氣溫相差不大，可代表南寧越冬期的溫度，試驗(yàn)結(jié)果對(duì)于4個(gè)引進(jìn)菠蘿蜜品種在南寧的引進(jìn)栽培具有一定指導(dǎo)意義。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)抗寒能力強(qiáng)的MS和MX品種，在越冬期受到寒害較輕，且能很快萌發(fā)新芽，恢復(fù)正常生長(zhǎng)，有在南寧地區(qū)推廣種植的潛力，MB品種抗寒能力居中，普通年份氣溫對(duì)它沒(méi)多大影響，但是冷冬年份影響較大，其種植地區(qū)要適當(dāng)往南推移;MD品種抗寒能力較弱，所受寒害嚴(yán)重，不具有在南寧地區(qū)推廣價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1] ? ? 李瑞梅，胡新文，郭建春，等.菠蘿蜜研究概述[J]. 亞熱帶植物科學(xué)，2007，36（2）：77-80.

[2] ? ? ?方桂紅，詹達(dá)謀.我國(guó)菠蘿蜜研究現(xiàn)狀[J].糧食與油脂，2018，31（4）：1-3.

[3] ? ? ?李麗淑，楊鑫，唐洲萍，等.廣西冬種馬鈴薯不同品種耐寒性比較[J]. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017， 32（6）：587-592.

[4] ? ? ?程軍勇，姜德志，鄧先珍，等.低溫脅迫下的油茶品種耐寒性評(píng)價(jià)[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017， 56（18）：3484-3488.

[5] ? ? ?孫程旭，陳良秋，馮美利，等.檳榔不同品種幼苗耐寒性比較初步研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，22（6）：1686-1689.

[6] ? ? ?張樹(shù)寶，蘇志剛，李淑霞，等.電導(dǎo)法等測(cè)定歐美彩葉樹(shù)抗寒性試驗(yàn)研究[J]. 北方園藝，2009（2）：178-189.

[7] ? ? 王學(xué)奎.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)山[M].2版.北京：高等教育出版社，2006.

[8] ? ? XU S C， LI Y P， HU J， et al. Responses of antioxidant enzymes to chilling stress in tobacco seedlings [J]. Aricultural Sciences in China， 2010， 9： 1594-1601.

[9] ? ? ?周真珍，史端甫，李力，等.馬鈴薯東農(nóng)303、大西洋在低溫脅迫下生理生化及光合特性的比較[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2016，28（5）：24-27.

[10] ? ?張鵬翀，王挺，劉錦，等.電導(dǎo)法配合logistic方程測(cè)定5種高架綠化植物的抗寒性[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013（19）：49-54.

[11] ? ?陳玨. 低溫弱光脅迫對(duì)馬鈴薯光合生理特性的影響[D].長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

[12] ? ?申曉慧，姜成，馮鵬，等.6種紫花苜蓿越冬前后幾個(gè)抗寒生理指標(biāo)變化研究[J]. 農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào)，2015，5（12）：94-98.

[13] ? ?黃海濤，余繼忠，王賢波，等.不同抗寒性茶樹(shù)品種秋季新梢的生理特性研究[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2014，26（4）：925-928.

[14] ? ?張捷，楊淑梅，王玲.低溫脅迫下兩個(gè)“竹柳”品系的抗寒性[J]. 林業(yè)科學(xué)，2013，49（9）：158-164.

[15] ? ?梁艷榮，胡曉紅，張穎力，等.植物過(guò)氧化物酶生理功能研究進(jìn)展[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，24（2）：110-113.