陳雪鳳，郎 寧，韋仕巖，吳圣進(jìn)，王燦琴，吳小建，蘇啟臣，藍(lán)桃菊

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所，廣西 南寧 530007)

【研究意義】秀珍菇(Pleurotusgeesteranus)在分類(lèi)學(xué)上屬于真菌門(mén)、擔(dān)子菌綱、傘菌目、側(cè)耳科、側(cè)耳屬、肺形側(cè)耳種，商品名或俗稱(chēng)鳳尾菇。秀珍菇菌株類(lèi)型繁多，根據(jù)出菇溫度分為高溫型品種和低溫型品種；根據(jù)出菇是否需要溫差刺激可分為自然出菇型秀珍菇和需要溫差刺激出菇的反季節(jié)秀珍菇。反季節(jié)秀珍菇即是通過(guò)制冷設(shè)施低溫溫差刺激，能在夏季出菇的秀珍菇品種。由于反季節(jié)秀珍菇有出菇整齊，潮次明顯，產(chǎn)量高，能根據(jù)市場(chǎng)需求量控制出菇，進(jìn)行集約化栽培等諸多優(yōu)點(diǎn)，因此栽培規(guī)模逐年擴(kuò)大。據(jù)2017年統(tǒng)計(jì)，廣西有30萬(wàn)袋生產(chǎn)規(guī)模的企業(yè)約20多家，年產(chǎn)菌棒約2800萬(wàn)袋，菌種需求量高達(dá)71萬(wàn)袋。然而，目前廣西栽培的反季節(jié)秀珍菇種源比較混亂，交叉引種現(xiàn)象較多，異種同名或同種異名現(xiàn)象頻發(fā)，加上引種后擴(kuò)繁不規(guī)范，造成質(zhì)量、產(chǎn)量和抗病性不穩(wěn)定，嚴(yán)重影響了產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。為了更好的鑒別秀珍菇種源之間的親緣關(guān)系并篩選出高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的反季節(jié)秀珍菇菌株，從分子生物學(xué)和傳統(tǒng)農(nóng)藝性狀角度對(duì)不同來(lái)源的秀珍菇菌株進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)尤為重要?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】有關(guān)秀珍菇品種篩選評(píng)價(jià)方面的研究報(bào)道較多。閆靜等[1]通過(guò)比較11個(gè)菌株的菌包污染率、菌絲長(zhǎng)速、產(chǎn)量、子實(shí)體品質(zhì)等栽培特性，篩選出羅源秀珍、秀珍188、秀珍195等適合夏季設(shè)施化栽培的菌株。陸娜等[2]通過(guò)比較36個(gè)菌株的產(chǎn)量、子實(shí)體商品性狀、出菇密度、成品率等，篩選出產(chǎn)量高、菇體灰色、出菇密和成菇率表現(xiàn)好的秀57菌株。林原[3]通過(guò)比較10個(gè)菌株的生物學(xué)效率、農(nóng)藝性狀，篩選出菌蓋小厚，菌柄粗短、商品性好的秀63菌株。王燦琴等[4]通過(guò)比較13個(gè)菌株的菌絲的生長(zhǎng)情況、栽培農(nóng)藝性狀、生物學(xué)效率、抗青霉等情況，篩選出表現(xiàn)較好的5個(gè)優(yōu)良菌株(HX13、HX14、HX10、HX8、HX9)。吳登等[5]通過(guò)比較7個(gè)秀珍菇菌株的菌絲體的生長(zhǎng)情況、出菇溫度范圍、子實(shí)體經(jīng)濟(jì)性狀、產(chǎn)量等，篩選出適宜利用桑枝屑栽培的優(yōu)良菌株秀珍3號(hào)。由此可見(jiàn)，在秀珍菇品種篩選栽培評(píng)價(jià)中，多數(shù)科研者注重從產(chǎn)量、子實(shí)體商品性狀、菌絲生長(zhǎng)方面進(jìn)行秀珍菇菌株比較評(píng)價(jià)，但從菌絲生長(zhǎng)后期是否吐黃水及黃斑病抗病性方面評(píng)價(jià)的較少。關(guān)于利用ISSR技術(shù)進(jìn)行秀珍菇遺傳差異方面的研究，馮偉林等[6]利用ISSR技術(shù)開(kāi)展15個(gè)秀珍菇多樣性分析，結(jié)果當(dāng)遺傳系數(shù)為0.87時(shí)菌株聚為3個(gè)群，同時(shí)初步發(fā)現(xiàn)秀珍菇不同出菇溫型與ISSR分子標(biāo)記分類(lèi)有相關(guān)性。陸娜等[2]對(duì)36個(gè)秀珍菇菌株進(jìn)行遺傳差異分析，結(jié)果36個(gè)秀珍菇菌株聚為7個(gè)群，遺傳差異較大。林原等[7]對(duì)7個(gè)秀珍菇菌株進(jìn)行了ISSR遺傳分析，發(fā)現(xiàn)7個(gè)菌株存在一定的差異。由此可見(jiàn)ISSR技術(shù)可用作秀珍菇種內(nèi)菌株間的親緣性鑒定，但前人比較分析的秀珍菇菌株為廣泛收集的菌株，沒(méi)有針對(duì)性地對(duì)某一特性的秀珍菇菌株進(jìn)行遺傳多樣性分析，且農(nóng)藝性狀與ISSR分子標(biāo)記相關(guān)性的發(fā)現(xiàn)較少?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】國(guó)內(nèi)有關(guān)秀珍菇品種選育、評(píng)價(jià)、遺傳多樣性分析的研究報(bào)道較多，但是專(zhuān)門(mén)針對(duì)需要溫差刺激出菇的反季節(jié)秀珍菇的種質(zhì)資源評(píng)價(jià)及遺傳多樣分析鮮有報(bào)道。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】結(jié)合菌絲生長(zhǎng)、出菇情況、子實(shí)體性狀和抗病性進(jìn)行菌株評(píng)價(jià)；通過(guò)菌株DNA的ISSR-PCR產(chǎn)物擴(kuò)增檢測(cè)及聚類(lèi)分析以判定菌株之間的親緣關(guān)系，綜合多個(gè)栽培性狀，篩選出表現(xiàn)較優(yōu)良的菌株，為栽培生產(chǎn)及育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株與來(lái)源

供試菌株與來(lái)源見(jiàn)表1。

1.2 栽培培養(yǎng)料配方

栽培袋配方：棉籽殼20 %、桑枝30 %、木屑30 %、麥麩18 %、輕鈣1 %和石灰1 %。

PDA加富培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨3 g、瓊脂20 g和水1000 mL。

1.3 試劑及引物

所用基因組DNA提取試劑盒、引物、PCR反應(yīng)體系和Marker DL 2000均購(gòu)自康為世紀(jì)公司，所用引物的名稱(chēng)及核苷酸序列見(jiàn)表2。8 % PAGE實(shí)驗(yàn)試劑：29∶130 %雙甲叉丙烯酰胺、5XTBE、ddH2O、TEMED和10 %過(guò)硫酸銨。

1.4 出菇試驗(yàn)

按栽培秀珍菇的常規(guī)方法生產(chǎn)菌包，使用17.00 cm×33.00 cm×0.05 cm的聚乙烯塑料袋裝袋，每個(gè)菌株接種100袋，設(shè)3個(gè)重復(fù)，菌袋接種后置于25～27 ℃培養(yǎng)室培養(yǎng)60 d，菌絲成熟后按常規(guī)方法進(jìn)行出菇管理，出菇冷刺激溫度為10 ℃。

1.5 評(píng)價(jià)觀測(cè)方法

1.5.1 菌絲情況觀測(cè) 在秀珍菇菌絲菌齡為60和80 d時(shí)分別觀察菌包袋口附近菌絲是否吐黃水和出現(xiàn)自然出菇現(xiàn)蕾情況。

1.5.2 出菇情況觀測(cè) 觀察冷刺激后現(xiàn)蕾時(shí)間，出菇整齊度：冷刺激后2～3 d觀察，85 %以上的菌包現(xiàn)蕾出菇，而且菇蕾比較整齊且多，為整齊(+++)；50 %～85 %菌包現(xiàn)蕾，但菇蕾不整齊，菇蕾少，為一般整齊(++)；30 %～50 %菌包現(xiàn)蕾，但菇蕾不整齊，菇蕾少，為不整齊(+)；30 %以下的菌包現(xiàn)蕾或不現(xiàn)蕾且菇蕾少，為難出菇(0)。采收前4～5潮菇，計(jì)算生物學(xué)轉(zhuǎn)化率(%)=(鮮菇重/干料重)×100，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

表1 供試秀珍菇菌株

表2 ISSR引物序列

1.5.3 子實(shí)體性狀觀測(cè) 第1潮菇采收時(shí)，每個(gè)品種隨機(jī)抽取30～50朵鮮菇，進(jìn)行子實(shí)體性狀測(cè)定。子實(shí)體厚度：用游標(biāo)卡尺測(cè)量菌蓋中心厚度。子實(shí)體菌蓋大?。河糜螛?biāo)卡尺“十”字形測(cè)量菌蓋直徑；菌柄直徑：測(cè)量菌柄中部直徑。菌柄長(zhǎng)度：測(cè)量菌褶與菌柄交界處至菌柄基部的距離；子實(shí)體顏色深淺度：灰褐色、灰黑色和灰白色。

1.5.4 黃斑病發(fā)病情況調(diào)查和分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 第1潮菇采收前，統(tǒng)計(jì)全部菌包的黃斑病發(fā)病率—即統(tǒng)計(jì)全部出菇袋數(shù)，并統(tǒng)計(jì)有黃斑病發(fā)生的袋數(shù)。每個(gè)品種隨機(jī)調(diào)查15袋3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5袋子實(shí)體，調(diào)查直徑1.5 cm以上的全部子實(shí)體病情情況，病害調(diào)查分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表3。根據(jù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算病情指數(shù)[8-9]。

1.6 遺傳差異分析

1.6.1 菌絲培養(yǎng)與DNA提取 將不同菌株的菌絲塊接種到PDA加富培養(yǎng)基的平皿上，于27 ℃培養(yǎng)6～8 d，用解剖刀刮取菌絲。使用DNA提取試劑盒對(duì)收集的菌絲進(jìn)行DNA提取，并用1 %瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)量，質(zhì)量合格的DNA儲(chǔ)藏于-20 ℃冰箱備用。

1.6.2 ISSR-PCR擴(kuò)增及電泳 試驗(yàn)用ISSR引物見(jiàn)表2所示，PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系(25 μl)：2×EsTaqMasterMix(Dye) 12 μl，ddH2O 11 μl，引物 (10 μmol/L) 1 μl，DNA模板1 μl。按上述比例將反應(yīng)液加入PCR管并混合均勻，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性5 min，94 ℃變性30 s，45～55 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，共35個(gè)循環(huán)，最后72 ℃終延伸10 min，16 ℃保存30 min。 PCR產(chǎn)物在8 % PAGE膠上120 V，5.0 h電泳檢測(cè)。

1.6.3 銀染 電泳結(jié)束后，自來(lái)水沖洗玻璃板兩面，預(yù)冷，剝下凝膠，雙蒸水洗滌2次。將PAGE膠浸沒(méi)于0.1 % 的AgNO3溶液中，搖床銀染10 min，然后用雙蒸水沖洗2次，每次不超過(guò)10 s。再將PAGE膠浸沒(méi)于1.2 % NaOH+ 0.4 %甲醛溶液中顯影，看到模糊的條帶后立即用大量雙蒸水沖洗，中止顯影。

1.6.4 數(shù)據(jù)分析 將ISSR圖譜用掃描儀掃描并進(jìn)行ISSR擴(kuò)增片段統(tǒng)計(jì)，有ISSR帶譜記為1，無(wú)ISSR帶譜記為0，用聚類(lèi)分析軟件NTSYS-PC 2.1計(jì)算遺傳相關(guān)系數(shù)，進(jìn)行聚類(lèi)分析，得出聚類(lèi)圖譜。

表3 秀珍菇黃斑病的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

注：病情指數(shù)(K)公式為：K={∑[k1×n1]/(n×k2)}×100，式中：k1為病害級(jí)數(shù)值；n1為對(duì)應(yīng)各級(jí)發(fā)病子實(shí)體數(shù)；n為調(diào)查總子實(shí)體數(shù)；k2為病害最高級(jí)數(shù)值。

Note: Disease index(K)={∑[k1×n1]/(n×k2)}×100.k1is the representative value of disease;n1is the quantity of the fruit body corresponding to each grade of disease;k2is the highest value of the grade disease.

表4 8個(gè)供試秀珍菇菌株栽培出菇情況對(duì)比

注：同列數(shù)據(jù)中大寫(xiě)字母表示不同菌株在0.01水平上差異顯著，下同。

Note: Capital letters in the same row indicate significant difference at 1 % level among different strains. The same as below.

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藝性狀評(píng)價(jià)

2.1.1 菌絲及出菇情況 從菌絲生長(zhǎng)后期是否吐黃水來(lái)看，只有臺(tái)秀2號(hào)容易吐黃水，其余7個(gè)菌株后期沒(méi)有吐黃水；從是否需要大溫差刺激出菇方面來(lái)看，秀珍12菌包長(zhǎng)滿(mǎn)后氣溫低于25 ℃以下就可以自然出菇，而其他菌株則需要有較低的溫度刺激方能出菇；在正常出菇管理下觀察8個(gè)菌株黃斑病的自然發(fā)生情況發(fā)現(xiàn)：秀珍P-4發(fā)病最為嚴(yán)重，發(fā)病率為58.53 %，說(shuō)明其抗黃斑病能力較差，其他7個(gè)菌株發(fā)病率較低；從冷刺激后現(xiàn)蕾快慢來(lái)看，臺(tái)秀57(農(nóng))、臺(tái)秀2號(hào)、秀珍P-4、臺(tái)秀(天達(dá))、廣溫秀珍現(xiàn)蕾較快，需2.5 d；秀珍P-6、秀珍12、秀珍13現(xiàn)蕾稍慢，需要2.5～3 d。出菇最整齊是臺(tái)秀57(農(nóng))、臺(tái)秀2號(hào)、臺(tái)秀(天達(dá))和廣溫秀珍，其次是秀珍P-4、秀珍P-6、秀珍13，整齊度最差的是秀珍12；從生物學(xué)轉(zhuǎn)化率方面分析，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率最高的是臺(tái)秀(天達(dá))，為73.67 %，其次是臺(tái)秀57(農(nóng))，轉(zhuǎn)化率為68.93 %，最差的是秀珍P-4，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率只有25.90 %。綜合以上情況的分析比較，可以淘汰吐黃水的臺(tái)秀2號(hào)、容易自然出菇、出菇不整齊的秀珍12和產(chǎn)量低抗病差的秀珍P-4(表4)。

2.1.2 子實(shí)體主要性狀 8個(gè)秀珍菇菌株子實(shí)體顏色大致分為灰黑色、灰褐色和灰白色3類(lèi)，其中灰黑色菌株4個(gè)，灰褐色菌株1個(gè)，灰白色菌株3個(gè)；子實(shí)體厚度、菌柄直徑可分為3類(lèi)：菌蓋厚、菌柄粗的臺(tái)秀57(農(nóng))等4個(gè)菌株為一類(lèi)，菌蓋薄、菌柄細(xì)的秀珍12為一類(lèi)，其余的3個(gè)菌株為一類(lèi)；子實(shí)體單個(gè)重量基本上與菌蓋厚度、菌柄粗細(xì)及菌蓋直徑正相關(guān)。結(jié)合市場(chǎng)需求，顏色深的灰黑色品種，以及菌蓋厚的品種較受歡迎，因此可淘汰秀珍12、秀珍13、秀珍P-4。而臺(tái)秀(天達(dá))除了顏色稍微偏白外，其他各項(xiàng)性狀均優(yōu)良，因此可以作為今后的育種材料(表5)。

表5 供試8個(gè)秀珍菇菌株子實(shí)體性狀對(duì)比

M、1、2、3、4、5、6、7、8分別代表Marker DL 2000、秀珍 12、臺(tái)秀 57(農(nóng))、秀珍 P-6、廣溫秀珍、秀珍 P-4、秀 珍13、臺(tái)秀(天達(dá))、臺(tái)秀 2 號(hào)M,1,2,3,4,5,6,7,8 respectively represent Marker DL 2000, Xiuzhen12, Taixiu57nong, Xiuzhen P-6, Guangwenxiuzhen, Xiuzhen P-4, Xiuzhen13, Taixiutianda and Taixiu2圖1 引物7、8、9、11、12、27、34、36、42對(duì)秀珍菇8個(gè)供試菌株擴(kuò)增的ISSR電泳圖譜Fig.1 ISSR electrophoretogram of tested strains of P. pulmonarius based on primers 7, 8, 9, 11, 12, 27, 34, 36 and 42

2.2 秀珍菇ISSR標(biāo)記分析

2.2.1 電泳圖譜統(tǒng)計(jì)分析 使用18個(gè)ISSR通用引物對(duì)8個(gè)秀珍菇菌株進(jìn)行分析，共計(jì)擴(kuò)增出361條清晰易辯的條帶，擴(kuò)增的DNA片段條帶的大小為150～2000 bp，多態(tài)性片段為304條，多態(tài)性比例為84.21 %。其中引物7、8、9、11、12、27、34、36和42擴(kuò)增片段如圖1所示。

2.2.2 DNA擴(kuò)增圖譜聚類(lèi)分析 秀珍菇菌株的遺傳關(guān)系圖譜見(jiàn)圖2。由ISSR聚類(lèi)圖上可以看出8個(gè)菌株遺傳相似性水平為0.59～0.77，在0.59水平上8個(gè)菌株聚為2個(gè)群，秀珍12單獨(dú)為一類(lèi)，其他7個(gè)菌株為一類(lèi)，說(shuō)明秀珍12其他7個(gè)菌株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。系數(shù)為0.68時(shí)為4個(gè)群，秀珍12為GroupⅠ；臺(tái)秀57(農(nóng))、臺(tái)秀2號(hào)和廣溫秀珍為Group Ⅱ；秀珍P-6為Group Ⅲ；秀珍P-4、臺(tái)秀(天達(dá))和秀珍13為Group Ⅳ。但系數(shù)為0.77時(shí)臺(tái)秀57(農(nóng))與臺(tái)秀2號(hào)為一組，說(shuō)明8個(gè)菌株中臺(tái)秀57(農(nóng))與臺(tái)秀2號(hào)遺傳關(guān)系最近。

3 討 論

3.1 秀珍菇菌株遺傳多樣性

種質(zhì)資源遺傳多樣性是農(nóng)藝性狀、細(xì)胞學(xué)、生物化學(xué)及分子遺傳標(biāo)記等方面多樣性的綜合體現(xiàn)[10]。秀珍菇在栽培過(guò)程中，常常會(huì)受到溫度、光照等因素的影響，外觀形態(tài)出現(xiàn)差異，傳統(tǒng)的子實(shí)體形態(tài)容易受環(huán)境因素影響，品種菌株間難以區(qū)分。而ISSR檢測(cè)手段簡(jiǎn)單、高效，常用于揭示食用菌遺傳多態(tài)性和區(qū)分種內(nèi)菌株間親緣關(guān)系，是一種快速、可靠的工具[11]。馮偉林等[6]、 陸娜等[2]和林原等[7]利用ISSR技術(shù)對(duì)其所收集的菌株開(kāi)展秀珍菇多樣性分析，均得出菌株之間存在一定的差異。但3位研究者所研究的秀珍菇菌株是廣泛收集的秀珍菇菌株，并沒(méi)有針對(duì)性地對(duì)某一類(lèi)秀珍菇菌株進(jìn)行多樣性分析。在農(nóng)藝性狀與ISSR分子標(biāo)記相關(guān)性上，只有馮偉林等發(fā)現(xiàn)農(nóng)藝性狀中出菇溫度與ISSR分子標(biāo)記有相關(guān)性。本研究利用ISSR技術(shù)對(duì)8個(gè)秀珍菇菌株開(kāi)展多樣性研究分析，根據(jù)菌株DNA的擴(kuò)增片段進(jìn)行聚類(lèi)分析，8個(gè)菌株遺傳相似性水平為0.59～0.77，得出菌株之間遺傳有差異，在遺傳相似系數(shù)0.59時(shí)8個(gè)菌株聚為2個(gè)群，即不需要大溫差刺激出菇的秀珍12單獨(dú)為一類(lèi)，其他7個(gè)需要大溫差刺激出菇的菌株為另一類(lèi)，說(shuō)明這兩類(lèi)菌株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。可見(jiàn)ISSR分子技術(shù)能明顯將需要大溫差刺激出菇的品種與不需要溫差刺激的品種區(qū)分出來(lái)，說(shuō)明出菇溫差型與ISSR分子標(biāo)記分類(lèi)相關(guān)性較高，這與馮偉林發(fā)現(xiàn)的“秀珍農(nóng)藝性狀中出菇溫度與ISSR分子標(biāo)記有相關(guān)性” 的研究結(jié)果相近。本研究還發(fā)現(xiàn)，遺傳系數(shù)為0.68時(shí)，秀珍P-4、秀珍13、臺(tái)秀(天達(dá))3個(gè)灰白色菌株聚為一類(lèi)，這說(shuō)明秀珍菇的顏色農(nóng)藝性狀與分子標(biāo)記也有一定的相關(guān)性，但具體情況還有待研究。

圖2 以18個(gè)ISSR引物擴(kuò)增的8個(gè)秀珍菇菌株聚類(lèi)分析圖Fig.2 Cluster analysis diagram of the tested 8 P. pulmonarius strains based on 18 ISSR primers

3.2 秀珍菇菌株農(nóng)藝性狀比較

創(chuàng)造優(yōu)良性狀，特別是聚合多個(gè)優(yōu)異農(nóng)藝性狀是育種的主要目標(biāo)。食用菌農(nóng)藝性狀的好壞能直接反映出菌株是否優(yōu)良。在實(shí)際工作中，科研生產(chǎn)者最為關(guān)注的農(nóng)藝性狀是豐產(chǎn)性、抗逆性、菌絲長(zhǎng)勢(shì)、適應(yīng)性及子實(shí)體的商品性狀(顏色、外形和質(zhì)地)等相關(guān)性狀[11]。閆靜等[1]、陸娜等[2]、林原等[3]及王燦琴等[4]從菌絲長(zhǎng)勢(shì)、產(chǎn)量、子實(shí)體商品性等方面進(jìn)行秀珍菇菌株農(nóng)藝性狀的比較，篩選較好的菌株[1-4]。陳麗新等[12]、曹本雄等[13]、吳登等[5]從基質(zhì)適應(yīng)性方面進(jìn)行菌株的比較，篩選出適合桉樹(shù)皮、桑枝屑、木薯?xiàng)U屑栽培的秀珍菇菌株。而本研究則根據(jù)市場(chǎng)及栽培者的需求，除了從產(chǎn)量、出菇快慢、整齊度和子實(shí)體商品性狀進(jìn)行農(nóng)藝性狀比較外，還從菌絲后期是否容易吐黃水、黃斑病抗病性等抗逆性方面進(jìn)行比較評(píng)價(jià)，篩選出優(yōu)良菌株。

抗逆性是食用菌優(yōu)良品種必備的重要性狀，它直接關(guān)系到栽培的成敗和經(jīng)濟(jì)效益[11]。抗逆性包括抗病性、抗蟲(chóng)性、抗高溫性、耐堿性等。反季節(jié)秀珍菇在栽培中很容易發(fā)生黃斑病。秀珍菇感染黃斑病后，子實(shí)體變黃、腐爛，出現(xiàn)黏稠狀分泌物，伴有惡臭味，并蔓延至整叢子實(shí)體，使得產(chǎn)品失去商品價(jià)值。據(jù)調(diào)查，頭潮菇黃菇病發(fā)生率一般為9.4 %～20.8 %，高的達(dá)62.6 %，嚴(yán)重的甚至整個(gè)菇房100 %菌包發(fā)病[14]。因此黃斑病抗性應(yīng)作為秀珍菇的農(nóng)藝性狀評(píng)價(jià)的一個(gè)重要性狀指標(biāo)。但在秀珍菇種源評(píng)價(jià)中，對(duì)抗病性的比較評(píng)價(jià)鮮有報(bào)道。本研究采取發(fā)病率及病情指數(shù)雙重評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)供試菌株黃斑病的發(fā)病程度進(jìn)行評(píng)判，更加科學(xué)可靠。對(duì)于秀珍菇黃斑病，目前國(guó)內(nèi)沒(méi)有該病害調(diào)查的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，本研究通過(guò)參考農(nóng)作物病害的分級(jí)方法結(jié)合秀珍菇黃斑病發(fā)生特點(diǎn)，制定了黃斑病調(diào)查方法。該方法將有助于今后進(jìn)行秀珍菇黃斑病的抗病性鑒定評(píng)價(jià)。

4 結(jié) 論

通過(guò)品比試驗(yàn)及遺傳多樣分析，綜合產(chǎn)量、菇體顏色、感黃斑病、菌絲吐黃水等情況，初步選出各項(xiàng)栽培性狀均表現(xiàn)較好的臺(tái)秀57(農(nóng))菌株，可以進(jìn)行栽培推廣；秀珍P-6、廣溫秀珍、臺(tái)秀(天達(dá))菌株可做育種材料。