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【摘要】 目的：研究廣東省惠州市地區(qū)中間型β地中海貧血（地貧）人群基因突變分布及其與血紅蛋白組分（HbA2）的關(guān)系。方法：選取2014年5月-2016年5月本院經(jīng)門(mén)診收治住院的8 298例患者，進(jìn)行血液學(xué)常規(guī)指標(biāo)和HbA2含量測(cè)定，將篩查陽(yáng)性的疑似地貧患者的血液進(jìn)行突變基因類(lèi)型檢測(cè)，將確診為中間型β地貧患者作為觀察組，隨機(jī)選取篩查陰性者為對(duì)照組。統(tǒng)計(jì)確診的中間型β地貧患者數(shù)量及發(fā)病率、突變基因類(lèi)型構(gòu)成情況;比較兩組一般資料、血常規(guī)（MCV、MCH）和HbA2;比較常見(jiàn)突變類(lèi)型的HbA2。結(jié)果：確診為中間型β地貧138例，發(fā)病率1.66%;按照突變基因類(lèi)型構(gòu)成比由高到低分別為CD41-42型51例、CD17型42例、IVS-1-5型37例、-28型3例、IVS-1-1型2例、IVS-Int 654型2例、CAP型1例;選取篩查陰性者147例為對(duì)照組，觀察組MCV、MCH均低于對(duì)照組，HbA2高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;常見(jiàn)基因類(lèi)型CD41-42型、CD17型、IVS-1-5型HbA2含量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：廣東惠州地區(qū)中間型β地貧人群突變常見(jiàn)基因類(lèi)型為CD41-42型、CD17型、IVS-1-5型，但HbA2差異不大;中間型β地貧人群的血常規(guī)、HbA2與正常人群相比有明顯差異。

【關(guān)鍵詞】 中間型β地中海貧血; 廣東惠州; 突變; HbA2

Mutation Distribution of Intermediate β Thalassemia Population in Huizhou of Guangdong Province and Its Relation with Hemoglobin Components/HE Jihong，YANG Hai，WANG Jian，et al.//Medical Innovation of China，2019，16（24）：0-064

【Abstract】 Objective：To study the mutation distribution of intermediate β thalassemia population in Huizhou of Guangdong province and its relation with hemoglobin components.Method：A total of 8 298 patients admitted to our hospital from May 2014 to May 2016 were enrolled.Routine hematological parameters and HbA2 content were measured，the blood samples of suspected thalassemia patients with positive screening were tested for mutation gene types，the patients diagnosed as intermediateβthalassemia were taken as observation group，and those with negative screening were randomly selected as control group.The number of patients with intermediateβthalassemia，the incidence and the composition of mutant gene types were counted，the general data，blood routine（MCV，MCH） and HbA2 were compared between two groups，the common mutant types of HbA2 were compared.Result：A total of 138 patients of intermediate β thalassemia were diagnosed，with an incidence of 1.66%.According to the composition ratio of mutant gene types，51 cases were CD41-42，42 cases were CD17，37 cases were IVS-1-5，3 cases were -28，2 cases were IVS-1-1，2 cases were IVS-Int 654 and 1 case was CAP.147 cases of negative screening were selected as control group，MCV and MCH in observation group were lower than those of control group，and HbA2 was higher than that of control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.There was no significant difference in HbA2 content among CD41-42，CD17 and IVS-1-5 genotypes（P>0.05）.Conclusion：CD41-42，CD17 and IVS-1-5 are the common mutation genotypes in the intermediate β thalassemia population in Huizhou of Guangdong Province，but HbA2 is not significantly different，the blood routine and HbA2 of the intermediate β thalassemia population are significantly different from those of normal population.

【Key words】 Intermediate β thalassemia; Huizhou of Guangdong; Mutation; HbA2

First-authors address：The Third Peoples Hospital of Huizhou City，Huizhou 516002，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.24.017

地中海貧血（Thalassemia，簡(jiǎn)稱(chēng)地貧）是人類(lèi)常見(jiàn)的幾種單基因遺傳疾病之一，在我國(guó)西南地區(qū)較為常見(jiàn)[1]。本疾病患者由于珠蛋白基因發(fā)生突變或者缺失，導(dǎo)致紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常，造成紅細(xì)胞攜氧能力降低和溶血性貧血[2-3]。根據(jù)變異基因的類(lèi)型，可分為α、β、δβ和δ四種主要類(lèi)型，其中β地貧按照臨床表現(xiàn)可分為三種主要類(lèi)型：重型、輕型和中間型，中間型β地貧的臨床表現(xiàn)差異較大，單純依靠臨床癥狀確診較為困難[4-5]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分析惠州地區(qū)中間型β地貧患者的血液指標(biāo)和基因檢測(cè)結(jié)果，探討其基因多樣性及與血紅蛋白組分（HbA2）的關(guān)系，為疾病的臨床診斷和治療提供相關(guān)的依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年5月-2016年5月本院經(jīng)門(mén)診收治住院的8 298例患者。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡12～60歲的惠州本地居民;一般資料完整。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期婦女;合并其他類(lèi)型血液系統(tǒng)疾病;近期有輸血史、應(yīng)用血液毒性或促血細(xì)胞生成生成藥物;合并惡性腫瘤和慢性缺氧性疾病等其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾患。研究對(duì)象在參與治療前均簽署知情同意書(shū)，并經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)審核。

1.2 儀器與試劑 （1）血常規(guī)：法國(guó)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（廠家：Horiba ABX，型號(hào)：ABX-DF120），其中平均紅細(xì)胞體積（MCV）<82 fL并且平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）<27 pg為地貧篩查陽(yáng)性。（2）血紅蛋白：全自動(dòng)Hb毛細(xì)管電泳分析儀（廠家：Sebia，型號(hào)：CAPILLARYS2）檢測(cè)HbA2的含量，其中HbA2≥3.5%、血紅蛋白F（HbF）>2%中一項(xiàng)陽(yáng)性者為β地貧表型篩查陽(yáng)性。（3）基因測(cè)定儀器：熒光定量PCR儀（廠家：Bio-Rad公司，型號(hào)：CFX96型）進(jìn)行基因檢測(cè)。

1.3 方法 對(duì)8 298例患者進(jìn)行血液學(xué)常規(guī)指標(biāo)和HbA2含量測(cè)定，將篩查陽(yáng)性的疑似地貧患者的血液應(yīng)用反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)（reverse dot blot，RDB），檢測(cè)17種我國(guó)常見(jiàn)的β地貧點(diǎn)突變基因，確定患者的突變基因類(lèi)型[6]，將確診為中間型β地貧患者作為觀察組，隨機(jī)選取篩查陰性者為對(duì)照組。

1.4 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)確診的中間型β地貧患者數(shù)量及發(fā)病率、突變基因類(lèi)型構(gòu)成情況;比較兩組一般資料、血常規(guī)（MCV、MCH）和HbA2;比較常見(jiàn)突變類(lèi)型的HbA2。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析;計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 中間型β地貧發(fā)病情況 8 298例患者中，經(jīng)血常規(guī)、HbA2和RDB共篩查出中間型β地貧陽(yáng)性138例，發(fā)病率1.66%。

2.2 中間型β地貧突變基因類(lèi)型構(gòu)成比 檢測(cè)出突變基因型中CD41-42型、CD17型、IVS-1-5型占比較高，具體構(gòu)成見(jiàn)表1。

2.3 兩組一般資料、血常規(guī)和HbA2比較 隨機(jī)選取篩查陰性者147例為對(duì)照組;兩組年齡、性別比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;觀察組MCV、MCH均低于對(duì)照組，HbA2高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.4 中間型β地貧不同突變基因型者HbA2比較 因-28型、IVS-1-1型、IVS-Int 654型、CAP型患者例數(shù)較少，故此處不進(jìn)行HbA2分析;CD41-42型、CD17型、IVS-1-5型HbA2含量分別為（5.37±1.37）、（5.21±1.02）、（4.86±0.81）%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2.245，P=0.110）。

3 討論

地貧是人類(lèi)常見(jiàn)的單基因遺傳疾病之一，目前最為常見(jiàn)的是α型和β型。地貧患者紅細(xì)胞內(nèi)無(wú)法產(chǎn)生足夠正常結(jié)構(gòu)的血紅蛋白，造成紅細(xì)胞攜氧能力降低和溶血性貧血。中間型β地貧的臨床表現(xiàn)差異較大，臨床診斷較為困難[7]，需結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。研究發(fā)現(xiàn)，地貧在我國(guó)南方地區(qū)發(fā)病率較高，尤其是廣東地區(qū)，作為我國(guó)三大地貧高發(fā)地，疾病發(fā)生情況較為普遍[8]。由于目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于地貧的有效治療手段較為匱乏，故臨床上將產(chǎn)檢作為預(yù)防地貧發(fā)生的重要手段，而基因檢查是準(zhǔn)確率較高的檢查手段之一[9]。人群基因突變譜是由大多數(shù)常見(jiàn)突變類(lèi)型和一些少見(jiàn)突變類(lèi)型組成，而由于地域、環(huán)境及生活習(xí)慣間的差異導(dǎo)致各地區(qū)地貧患者基因突變的類(lèi)型及比例存在較大差異[10-11]，由此可見(jiàn)針對(duì)不同地區(qū)地貧患者開(kāi)展基因普查，可以為產(chǎn)前檢查提供參考依據(jù)，旨在更有效的指導(dǎo)地貧的預(yù)防工作，為提高新生兒健康打下良好基礎(chǔ)。本文選取本院門(mén)診收治的β地貧患者為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查，探究該地區(qū)β地貧人群基因突變的分布及其HbA2特點(diǎn)。

本研究結(jié)果顯示，8 298例患者篩查出中間型β地貧陽(yáng)性138例，發(fā)病率1.66%?；葜菸挥趶V東省中南部，處在亞熱帶地區(qū)，是地貧的高發(fā)地帶，其發(fā)病率較廣東地區(qū)無(wú)明顯差異[12]。本研究檢測(cè)到7種突變基因類(lèi)型，構(gòu)成比最高的3種依次為CD41-42型、CD17型和IVS-1-5型，占總病例數(shù)的94.2%，CD41-42型構(gòu)成比最高，其次是CD17型，該基因型分布情況和廣東、廣西地區(qū)相同[13]，而IVS-1-5型的構(gòu)成比則明顯高于其他地區(qū)，一方面由于廣東地區(qū)近30年人口流動(dòng)性不斷增高，導(dǎo)致惠州地區(qū)人群突變分布特點(diǎn)趨近廣東地區(qū)的情況，另一方面，惠州作為客家人聚集地，有一定遺傳異質(zhì)性，導(dǎo)致其分布具有地區(qū)特點(diǎn)。

對(duì)比中間型β地貧患者和對(duì)照人群的相關(guān)指標(biāo)，結(jié)果顯示，觀察組MCV、MCH均低于對(duì)照組，HbA2高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），分析這一現(xiàn)象，可能是由于中間型β地貧患者的β珠蛋白基因發(fā)生點(diǎn)突變，導(dǎo)致β珠蛋白合成減少或無(wú)法合成，血紅蛋白α鏈與β鏈的合成比例失衡，未能配對(duì)的α鏈在紅細(xì)胞內(nèi)沉積并形成包涵體，嚴(yán)重影響紅細(xì)胞變形能力，異常紅細(xì)胞流經(jīng)骨髓、脾臟受到破壞，導(dǎo)致血液中紅細(xì)胞減少，MCV和MCH水平降低，β鏈減少導(dǎo)致多余的α鏈和δ鏈異常結(jié)合，造成HbA2水平增高[14]。

此外，對(duì)比中間型β地貧不同突變基因型患者的HbA2含量，CD41-42型、CD17型、IVS-1-5型HbA2含量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。中間型β地貧患者的臨床表現(xiàn)介于輕型和重型之間，紅細(xì)胞仍具有一定的β珠蛋白合成量，異常增高的HbA2經(jīng)電泳后，幾種突變基因型的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯差異，說(shuō)明惠州地區(qū)中間型β幾種常見(jiàn)突變基因型難以通過(guò)檢測(cè)HbA2進(jìn)區(qū)分，仍需要RDB檢測(cè)確定，而近年來(lái)基于我國(guó)兩廣和西南地區(qū)的地貧基因型篩查研究也顯示處類(lèi)似結(jié)論[15-20]。

綜上所述，惠州地區(qū)中間型β地貧人群突變分布具有一定的地域特點(diǎn)，不同突變基因類(lèi)型HbA2差異不大，需要通過(guò)基因檢測(cè)確定類(lèi)型。

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（收稿日期：2019-04-30） （本文編輯：董悅）