黨 斌

(青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院,青海省青藏高原農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,青海西寧 810016)

藜麥(ChenopodiumquinoaWilld.)又稱南藜麥、藜谷、奎奴亞藜等,是一種藜科藜屬的雙子葉假谷物,發(fā)源于南美洲的安第斯山脈,具有5000～7000多年的食用和種植歷史,是印加土著居民的主要傳統(tǒng)食物,有“糧食之母”的美稱[1-2]。藜麥種子顏色主要有黑、紅、白幾種顏色,其中黑、紅色的籽粒較小,白色口感較好[2]。藜麥在1980年代被美國宇航局用于宇航員的太空食品,聯(lián)合國糧農(nóng)組織認(rèn)為藜麥?zhǔn)且环N單體植物,可滿足人體基本營養(yǎng)需求的食物,正式推薦藜麥為最適宜人類的完美全營養(yǎng)食品。聯(lián)合國將2013年宣布為國際藜麥年,以促進(jìn)人類營養(yǎng)健康和食品安全,實(shí)現(xiàn)千年發(fā)展目標(biāo),各國均加強(qiáng)了對藜麥的研究和開發(fā)[3-6]。我國自上世紀(jì)末引入以來,藜麥在我國發(fā)展迅速,不但種植面積逐漸擴(kuò)大,主要分布于山西、吉林、甘肅、青海和西藏等地區(qū),在四川、廣東、吉林、河北等地也有大面積的種植[7-8]。由于引進(jìn)資源混雜,資源之間在營養(yǎng)功能成分含量方面的差異不明確,品種退化嚴(yán)重,亟需篩選出營養(yǎng)品質(zhì)優(yōu)異、功能特異的種質(zhì)資源。

藜麥營養(yǎng)豐富合理,滿足了人們追求更營養(yǎng)更健康的消費(fèi)需求,符合大健康產(chǎn)業(yè)的發(fā)展要求,具有很大的開發(fā)潛力,開發(fā)營養(yǎng)功能全面的藜麥?zhǔn)称肥瞧湮磥戆l(fā)展的方向,功能性藜麥新品種的選育是基礎(chǔ)[7,9-13]。目前針對藜麥營養(yǎng)成分已開展大量研究,藜麥蛋白質(zhì)、脂肪酸、礦物質(zhì)、維生素、膳食纖維等營養(yǎng)物質(zhì)豐富,氨基酸組成和比例均衡,可滿足人體日常需要。藜麥高蛋白、低熱量、活性物質(zhì)豐富的特點(diǎn)使其有助于輔助免疫、預(yù)防肥胖，改善心血管疾病、糖尿病、癌癥等疾病,因此藜麥?zhǔn)艿搅丝茖W(xué)家和消費(fèi)者的廣泛關(guān)注[14-16]。趙亞東等[8]、Woldemichael等[17]的研究發(fā)現(xiàn)藜麥種子中含有很高的皂甙(20%～30%)。研究表明,藜麥種子及新芽中有較多的總多酚,具有良好的體外抗氧化活性[18-20]。藜麥還含有大多水果蔬菜中含量很少且具有抗菌消炎、抗突變、降壓等功效的異黃酮,是人體和動(dòng)物重要的外源性功能化合物[21]。藜麥的這些活性成分,能夠預(yù)防治療疾病,對于維持人類身體健康具有十分重要的作用。但功能成分含量及活性高的藜麥品種缺乏,開展高活性藜麥資源的篩選尤為重要。

基于此,本研究以收集的90份青海藜麥資源為研究對象,比較分析青海藜麥資源的酚類物質(zhì)含量(主要包括游離酚、結(jié)合酚、游離黃酮、結(jié)合黃酮)及其抗氧化活性,進(jìn)一步明確不同藜麥資源酚類物質(zhì)含量及其抗氧化活性差異,篩選出酚類物質(zhì)含量高或抗氧化活性強(qiáng)的優(yōu)異藜麥資源,為高活性藜麥資源的篩選及功能性藜麥新品種的選育提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

藜麥 青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院作物育種栽培研究所提供(見表1),所有材料于2015年春在青海省農(nóng)林科學(xué)院試驗(yàn)田(西寧)統(tǒng)一進(jìn)行種植,試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù),隨機(jī)區(qū)組排列。收獲后從精選種子中按四分法各取500 g種子為分析樣品,藜麥粉采用高速粉碎機(jī)粉碎過60目篩,備用;DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)、TPTZ(三吡啶三吖嗪)、Trolox(水溶性維生素E)、ABTS[2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)、沒食子酸、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 純度≥98.0,購自上海源葉生物科技有限公司;福林酚(優(yōu)級純)和齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品 購自北京索萊寶科技有限公司;甲醇、乙醇、冰乙酸、丙酮、高氯酸、過硫酸鉀、三氯化鐵、無水醋酸鈉等 均為國產(chǎn)分析純。

表1 試驗(yàn)材料Table 1 Experiment varieties

HH-4型數(shù)顯恒溫水浴鍋 國華電器有限公司;TGL-20M型低速冷凍離心機(jī) 湖南湘儀有限公司;N4S型紫外可見分光光度計(jì) 上海儀電分析儀器有限公司;KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器 昆山市超聲波儀器有限公司;R-215型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 瑞士布奇有限公司;FW200型高速粉碎機(jī) 天津華鑫儀器廠。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 藜麥中游離酚與結(jié)合酚的提取及總酚、總黃酮含量測定 藜麥游離酚和結(jié)合酚的提取參考Yang等[22]的方法。

1.2.1.1 藜麥游離酚提取液的制備 準(zhǔn)確稱取1.0 g藜麥粉,按照料液比1∶20比例加入體積分?jǐn)?shù)70%的丙酮,于35 ℃及功率450 W條件下超聲提取25 min,4000 r/min冷凍離心10 min,收集上清液,殘?jiān)猛瑯拥姆椒ㄖ貜?fù)提取2次,合并三次提取上清液即為游離酚提取液,45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干后用甲醇轉(zhuǎn)移定容至10 mL,-20 ℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.1.2 藜麥結(jié)合酚提取液的制備 向提取游離酚后的殘?jiān)屑尤?0 mL正己烷振蕩后2000 r/min離心5 min棄去上清液,加入20 mL體積分?jǐn)?shù)11%的硫酸甲醇溶液提取試劑,75 ℃水浴1 h,pH調(diào)至2,加入30 mL乙酸乙酯萃取5次,3 000 r/min離心5 min后合并乙酸乙酯萃取相,45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干后用甲醇轉(zhuǎn)移定容至10 mL,過0.45 μm有機(jī)濾膜后即得藜麥結(jié)合酚提取液,-20 ℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.1.3 總酚含量測定 采用Folin-Ciocalteu法,以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品,總酚含量以每100 g提取物(干基)中所含相當(dāng)于沒食子酸的質(zhì)量mg表示[23],以沒食子酸濃度為橫坐標(biāo),A765值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為Y=0.0042X+0.0124(0～300 μg/mL,R2=0.9996)。

1.2.1.4 總黃酮含量的測定 采用硝酸鋁比色法,以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,A510值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為Y=0.0055X-0.0047(0～80 μg/mL,R2=0.9947);總黃酮含量以每100 g提取物(干基)中所含相當(dāng)于蘆丁的質(zhì)量mg表示，單位為mg GAE/100 g DW。

1.2.2 藜麥酚類物質(zhì)體外抗氧化試驗(yàn)

1.2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 DPPH自由基清除能力以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)物,517 nm處測吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行回歸處理,得回歸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=-0.0042X+0.9163(0～140 μmol/L,R2=0.9928)。樣品的DPPH·清除能力以每100 g提取物(干基)中所含相當(dāng)于水溶性維生素E的量(μmol Trolox Eq/100 g DW)表示。

FRAP抗氧化能力以Trolox作為標(biāo)準(zhǔn)品,在波長593 nm下測定吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程:Y=0.0072X-0.0012(0～300 μmol/L,R2=0.9992)。樣品的FRAP抗氧化能力以μmol Trolox Eq/100 g DW表示。

ABTS+·清除能力以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)物,734 nm處測吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行回歸處理,得回歸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=-0.001X+0.6242(0～300 μmol/L,R2=0.9907)。樣品的ABTS+·清除能力以μmol Trolox Eq/100 g DW表示。

1.2.2.2 DPPH·清除能力、FRAP抗氧化能力及ABTS+·自由基清除能力 均參考Yang等[22]的方法。

A.DPPH·清除能力測定:吸取從1 g藜麥粉中提取的游離酚或結(jié)合酚樣品提取液1 mL于試管中,再加入4.5 mL 0.1 mmol/L DPPH甲醇溶液,充分搖勻后避光反應(yīng)30 min,以甲醇代替樣品提取液為空白調(diào)零,在波長517 nm下測定吸光度,重復(fù)三次。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算DPPH·清除能力。計(jì)算公式為:DPPH·清除能力(μmol Trolox Eq/100 g DW)=[(Y×V)/(1000×M)]×100。

其中:Y為標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的DPPH·清除能力(μmol/L);V為提取液的總體積(mL);M為樣品干重(g)。

B.FRAP抗氧化能力測定:FRAP工作液的配制:為300 mmol·L-1pH3.6的醋酸鈉緩沖液(3.0762 g C2H3NaO2·加20 mL C2H4O2,用蒸餾水定容至250 mL)、10 mmol·L-1TPTZ溶液(0.1562 g TPTZ 用40 mmol·L-1鹽酸定容至100 mL)和20 mmol·L-1FeCl3溶液,按照體積比為10∶1∶1 的比例混合,于37 ℃水浴鍋中預(yù)熱備用。

測定方法:吸取樣品提取液50 μL于試管中,再加入4.5 mL FRAP工作液,充分搖勻后避光反應(yīng)30 min,以甲醇代替樣品提取液為空白調(diào)零,在波長593 nm下測定吸光度,重復(fù)三次。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品提取液鐵還原能力,以μmol Trolox Eq/100 g DW表示。計(jì)算公式為:FRAP鐵還原能力(μmol Trolox Eq/100 g DW)=[(Y×V)/(1000×M)]×100

其中:Y為標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的FRAP鐵還原能力(μmol/L);V為提取液的總體積(mL);M為樣品干重(g)

C.清除 ABTS+·能力測定:ABTS+·工作液的配制:將5 mL 7 mmol/L ABTS+·溶液和88 μL 140 mmol/L過硫酸鉀溶液混合,室溫避光條件下靜置12～16 h,得ABTS+·儲(chǔ)備液。將此儲(chǔ)備液按適當(dāng)比例1∶100 (V/V)與無水甲醇混合,要求其在734 nm下的吸光值達(dá)到0.70±0.02,得到ABTS+·工作液,備用。

測定方法:吸取樣品提取液200 μL于試管中,再加入4 mL ABTS+·工作液,充分搖勻后避光反應(yīng)30 min,以甲醇代替樣品提取液為空白調(diào)零,在波長734 nm下測定吸光度,重復(fù)三次。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品提取液清除ABTS+·能力,以μmol TE/100 g DW表示。

計(jì)算公式為:ABTS+·清除能力(μmol Trolox Eq/100 g DW)=[(Y×V)/(1000×M)]×100。

其中:Y為標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的ABTS+·自由基清除能力,μmol/L;V為提取液的總體積,mL;M為樣品干重,g。

1.2.3 利用SPSS 21.0軟件進(jìn)行相關(guān)分析、聚類分析,采用歐氏距離平方法和組間連接聚類法進(jìn)行聚類分析),繪制聚類分析樹狀圖。

1.3 數(shù)理統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差” 表示。采用Excel 2017軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理與分析;利用SPSS 21.0軟件進(jìn)行方差分析(ANOVA),多重比較采用LSD法進(jìn)行差異顯著性分析,并用該軟件完成檢測指標(biāo)間的相關(guān)性分析和基于全部檢測指標(biāo)的聚類分析。差異顯著性水平表示方法:顯著(P<0.05);極顯著(P<0.01)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藜麥酚類物質(zhì)含量分析

2.1.1 不同藜麥酚類物質(zhì)含量描述性分析 由表2可知,不同藜麥酚類化合物含量均存在較大差異,且不同藜麥資源結(jié)合酚類物質(zhì)含量差異較大,游離酚類物質(zhì)含量相對較小。其中參試藜麥結(jié)合黃酮含量平均為10.08 mg/100 g,變幅為1.32～33.44 mg/100 g,變異系數(shù)達(dá)62.49%,50%以上的參試藜麥結(jié)合黃酮含量高于平均值,且參試藜麥中sy-13、sy-28、LM1-118的結(jié)合黃酮含量分別達(dá)33.44、27.37、24.67 mg/100 g。結(jié)合酚含量的變異系數(shù)為52.12%,平均含量為255.52 mg/100 g,53.78%的參試藜麥結(jié)合酚含量低于平均值,其中sy-13、sy-22、sy-28和sy-34的結(jié)合酚含量達(dá)634.33、607.98、646.58、647.42 mg/100 g。游離黃酮含量均值為69.96 mg/100 g,游離酚含量平均為442.19 mg/100 g,變異系數(shù)分別為23.40%、14.05%,不同藜麥資源間差異較小。50%以上的參試藜麥資源游離酚類物質(zhì)含量高于平均值,其中LM1-56和sy-24的游離黃酮含量分別達(dá)106.1、111.54 mg/100 g;LM2-10、LM1-76和sy-24的游離酚含量分別達(dá)557.03、593.20、601.22 mg/100 g。

表2 不同藜麥功能成分含量分析Table 2 Analysis of functional components content of different quinoas

酚類物質(zhì)是植物中含量最多的次生代謝產(chǎn)物,目前國內(nèi)外相關(guān)學(xué)者已證實(shí)植物中酚類物質(zhì)種類、含量及活性受到籽粒顏色和基因型的影響,酚類物質(zhì)在不同品種、不同生態(tài)條件均會(huì)導(dǎo)致其種類和含量相差很大[24-25]。本研究中參試藜麥的多酚種類豐富,不同資源間含量差異較大,主要是不同藜麥資源間的基因型差異導(dǎo)致的。且藜麥中的酚類物質(zhì)含量均高于王黎明等[13]研究報(bào)道,這與參數(shù)藜麥的生產(chǎn)環(huán)境有關(guān),相關(guān)研究報(bào)道,酚類物質(zhì)含量的累積受栽培環(huán)境的綜合影響,其中光是影響植物多酚含量的重要非生物因素[26],參試藜麥種植于青海高原,日照長,有利于酚類物質(zhì)的合成、累積,這是導(dǎo)致參數(shù)藜麥酚類物質(zhì)含量較高的原因。

2.1.2 不同粒色藜麥酚類物質(zhì)含量比較分析 由表3可知,不同粒色藜麥之間游離酚類物質(zhì)含量相對一致,結(jié)合酚類物質(zhì)含量差異較大,變異系數(shù)均達(dá)到45%以上。紅色藜麥的游離酚和游離黃酮含量最高,且紅色藜麥資源間的變異系數(shù)較小,其中游離酚含量在386.09～557.03 mg/100 g之間,游離黃酮含量在55.69～99.20 mg/100 g之間。白色藜麥的游離酚類物質(zhì)含量均最低,其結(jié)合酚和結(jié)合黃酮含量最高,且白色藜麥資源間的變異系數(shù)高達(dá)53.68%、68.67%,結(jié)合酚含量在109.37～646.58 mg/100 g之間,結(jié)合黃酮含量在1.33～33.44 mg/100 g之間。紅色藜麥的結(jié)合酚類物質(zhì)含量均最低?？梢?藜麥中游離酚類物質(zhì)含量較豐富,種類多樣,這與相啟森等人研究結(jié)果一致[3-4]。

表3 不同粒色藜麥的功能成分含量分析Table 3 Analysis of functional components of different grain colors quinoa

2.2 不同藜麥酚類物質(zhì)抗氧化活性分析

2.2.1 不同藜麥酚類物質(zhì)抗氧化性分析 從圖1可以看出,90份參試藜麥中的酚類化合物均具有較強(qiáng)的抗氧化活性,且結(jié)合酚類物質(zhì)在清除DPPH·、ABTS+·及FRAP還原能力方面存在明顯差異。結(jié)合酚類具有較強(qiáng)的清除DPPH·、ABTS+·能力,分別達(dá)4732.56、3371.97 μmol Trolox Eq/100 g DW;游離酚類的FRAP還原能力相對較強(qiáng),達(dá)1408.64 μmol Trolox Eq/100 g DW。Hirose等[27]報(bào)道藜麥中的酚類物質(zhì)具有抗氧化功能,且總多酚含量與其DPPH自由基清除能力呈顯著正相關(guān),這與本研究結(jié)果一致。

圖1 不同藜麥酚類物質(zhì)抗氧化活性Fig.1 Antioxidant activity of phenols in different quinoas注:不同小寫、大寫字母分別表示參試藜麥間游離酚類、 結(jié)合酚類化合物抗氧化差異顯著(P<0.05)。

2.2.2 不同粒色藜麥酚類物質(zhì)抗氧化性比較分析 不同粒色參試藜麥的酚類物質(zhì)清除DPPH·能力較強(qiáng)(見圖2),且結(jié)合酚類物質(zhì)DPPH·清除能力優(yōu)于游離酚物質(zhì)。白色、黃色藜麥的結(jié)合酚類物質(zhì)清除DPPH·能力顯著高于紅色藜麥,分別達(dá)4657.41、5065.66 μmol Trolox Eq/100 g DW;不同粒色參試藜麥的游離酚類物質(zhì)清除DPPH·能力差異不顯著,黃色藜麥相對較高(2089.23 μmol Trolox Eq/100 g DW),白色紅色藜麥相對較低。楊希娟等[28]報(bào)道4種顏色組青稞的結(jié)合態(tài)酚類提取物的DPPH·清除能力顯著高于游離態(tài)提取物。延莎等[29]對不同米色小米多酚提取物的含量及體外抗氧化試驗(yàn)表明，米色與小米中多酚的含量及其抗氧化活性關(guān)系不大。本研究結(jié)果表明結(jié)合態(tài)酚類物質(zhì)具有較強(qiáng)的DPPH·清除能力,且紅色藜麥的DPPH·清除能力最弱;而紅色藜麥的游離酚和游離黃酮含量最高,白色、黃色藜麥的結(jié)合酚和結(jié)合黃酮含量最高,說明結(jié)合態(tài)的酚類物質(zhì)與其DPPH·清除能力密切相關(guān),參試藜麥的DPPH·清除能力主要與結(jié)合態(tài)酚類物質(zhì)含量有關(guān),與籽粒顏色關(guān)系不大,這與前人的研究結(jié)果一致。

圖2 不同粒色藜麥酚類物質(zhì)DPPH·清除能力Fig.2 The DPPH· scavenging ability of phenols in different colors of quinoas注:不同小寫、大寫字母分別表示不同粒色藜麥間游離酚類、 結(jié)合酚類化合物抗氧化差異顯著(P<0.05);圖3、圖4同。

紅色、黃色藜麥結(jié)合酚類物質(zhì)清除ABTS+·能力較強(qiáng),差異顯著(P<0.05),游離酚類清除ABTS+·能力均較弱,差異不顯著(見圖3)。其中白色、黃色藜麥的結(jié)合酚類物質(zhì)清除ABTS+·能力分別為3532.37、3350.72 μmol Trolox Eq/100 g DW;紅色藜麥較弱,為487.49 μmol Trolox Eq/100 g DW。這可能與不同粒色藜麥中不同形態(tài)的酚類化合物中單體多酚組成及含量有關(guān),不同單體酚對不同自由基的清除具有選擇性[30]。

圖3 不同粒色藜麥酚類物質(zhì)ABTS+·清除力Fig.3 The ABTS+· scavenging ability of phenols in different colors of quinoas

從圖4可知,不同粒色參試藜麥的結(jié)合酚類物質(zhì)FRAP還原能力差異顯著(P<0.05),游離酚類FRAP還原能力差異不顯著。紅色藜麥的酚類物質(zhì)FRAP鐵還原力最強(qiáng)(3264.42 μmol Trolox Eq/100 g DW),白色和黃色藜麥次之,分別為869.05、683.2μmol Trolox Eq/100 g DW。谷物中酚類物質(zhì)抗氧化活性的相關(guān)報(bào)道[31-32]表明,游離態(tài)酚類物質(zhì)的FRAP鐵離子還原能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于結(jié)合態(tài)酚類物質(zhì),這與本研究結(jié)果一致。紅色藜麥的FRAP鐵離子還原能力最強(qiáng),同時(shí)其游離態(tài)酚類物質(zhì)含量最高,紅色藜麥的FRAP鐵離子還原能力強(qiáng)弱與其游離態(tài)酚類物質(zhì)含量高低一致。

圖4 不同粒色藜麥酚類物質(zhì)FRAP還原力Fig.4 The FRAP ability of phenols in different colors of quinoa

2.3 青海不同藜麥資源聚類分析

2.3.1 不同藜麥酚類物質(zhì)含量與抗氧化性相關(guān)性分析 由表4可知,參試90份藜麥的結(jié)合酚或結(jié)合黃酮含量與DPPH自由基清除能力和ABTS+·清除能力等指標(biāo)呈極顯著相關(guān)關(guān)系(P<0.01),說明結(jié)合態(tài)酚類物質(zhì)含量高低與藜麥的DPPH·清除能力和ABTS+·清除能力密切相關(guān)。游離酚或游離黃酮含量與ABTS+·清除能力和FRAP鐵還原能力等指標(biāo)呈極顯著或顯著正相關(guān)關(guān)系(P<0.01或P<0.05),與DPPH·清除能力無顯著相關(guān)性,說明游離態(tài)酚類化合物含量高低與其ABTS+·清除能力和FRAP鐵還原能力大小密切相關(guān)。結(jié)合酚或結(jié)合黃酮含量與游離酚或游離黃酮之間呈現(xiàn)極顯著或顯著性負(fù)相關(guān)(P<0.01或P<0.05),結(jié)合酚與結(jié)合黃酮、游離酚與游離黃酮間均呈現(xiàn)極顯著正相關(guān)性(P<0.01),表明藜麥中的多酚類物質(zhì)含量越高,其所含黃酮含量就越高。

表4 不同藜麥酚類化合物含量與抗氧化性間的相關(guān)性分析Table 4 Correlation analysis between phenols content and antioxidant activity

2.3.2 不同藜麥資源聚類分析 對青海90份藜麥資源的酚類物質(zhì)含量(游離酚、結(jié)合酚、游離黃酮、結(jié)合黃酮)和抗氧化活性等7個(gè)指標(biāo)采用歐氏距離平方法和組間連接聚類法進(jìn)行聚類分析(圖5)。

結(jié)果顯示,歐式距離為5處將參試藜麥資源劃分為3類(表5),第I類共有79個(gè)藜麥資源,參試的藜麥資源大多部分都劃分為此類,結(jié)合酚類物質(zhì)含量較低,DPPH·清除力、ABTS+·清除力較弱,但FRAP鐵還原力較強(qiáng)。第II類共有6個(gè)藜麥資源,結(jié)合酚類物質(zhì)含量最高,抗氧化活性居中的一類。第III類共有5個(gè)藜麥資源,游離酚類和結(jié)合酚類含量居中,抗氧化活性表現(xiàn)最強(qiáng)的一類。此研究結(jié)果有利于對不同育種目標(biāo)的藜麥資源開展進(jìn)一步的篩選,為功能性藜麥新品種的選育提供依據(jù)。

表5 青海不同藜麥資源化學(xué)成分含量和抗氧化活性的聚類結(jié)果Table 5 Clustering results of functional components content and antioxidant activities of different quinoas

3 結(jié)論

不同藜麥酚類化合物含量均存在較大差異,且不同藜麥資源結(jié)合酚類物質(zhì)含量差異較大,游離酚類物質(zhì)含量相對較小。有50%以上的藜麥結(jié)合黃酮含量高于平均值,sy-13、sy-28、LM1-118三個(gè)藜麥資源結(jié)合黃酮含量高達(dá)33.44、27.37、24.67 mg/100 g。53.78%藜麥的結(jié)合酚含量低于平均值,其中sy-13、sy-22、sy-28和sy-34四個(gè)藜麥資源結(jié)合酚含量高達(dá)634.33、607.98、646.58、647.42 mg/100 g。不同粒色藜麥之間游離酚類物質(zhì)含量相對一致,結(jié)合酚類物質(zhì)含量差異較大,變異系數(shù)均達(dá)到45%以上。紅色藜麥的游離酚和游離黃酮含量最高,但結(jié)合酚類物質(zhì)含量均最低。

抗氧化研究表明,藜麥中的酚類物質(zhì)均具有較強(qiáng)的清除DPPH·自由基能力,結(jié)合酚類在清除DPPH·、ABTS+·、FRAP方面存在明顯差異,結(jié)合酚類具有較強(qiáng)的清除DPPH·、ABTS+·能力,游離酚類在FRAP方面相對較強(qiáng)。紅色藜麥的酚類物質(zhì)FRAP鐵還原力最強(qiáng),白色和黃色藜麥的結(jié)合酚類清除DPPH·自由基能力、ABTS+·清除力最強(qiáng)。

聚類分析結(jié)果表明,參試的青海藜麥資源約有88%表現(xiàn)為結(jié)合酚類物質(zhì)含量較低,DPPH·自由基清除力、ABTS+·自由基清除力較弱,但FRAP鐵還原力較強(qiáng)。有6個(gè)藜麥資源表現(xiàn)為結(jié)合酚類物質(zhì)含量最高,有5個(gè)藜麥資源表現(xiàn)為抗氧化活性表現(xiàn)最強(qiáng)。此結(jié)果為功能性藜麥新品種的選育提供了優(yōu)質(zhì)資源,對藜麥新品種的選育具有重要的指導(dǎo)意義。