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刺猬紫檀HPLC指紋圖譜研究

2019-09-10 07:22:44魏建華紀(jì)玲珍吳劍光魏霜
農(nóng)業(yè)災(zāi)害研究 2019年6期
關(guān)鍵詞:液相色譜指紋圖譜鑒別

魏建華 紀(jì)玲珍 吳劍光 魏霜

摘要 利用反相高效液相色譜法分析了8批刺猬紫檀樣品,采用相似度分析軟件“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2012版)”計(jì)算處理,相似度均在0.9以上;建立了由6個(gè)共有特征峰組成的刺猬紫檀指紋圖譜,同時(shí)對(duì)該指紋圖譜檢測(cè)方法進(jìn)行方法學(xué)考察。該方法結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好,所建立的指紋圖譜可作為刺猬紫檀的輔助鑒定,鑒定指標(biāo)客觀,鑒定方法簡(jiǎn)便,為刺猬紫檀的無損真?zhèn)舞b別提供了新方法。

關(guān)鍵詞 液相色譜;指紋圖譜;刺猬紫檀;鑒別

中圖分類號(hào):R796.9?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A?文章編號(hào):2095-3305(2019)06-119-05

DOI: 10.19383/j.cnki.nyzhyj.2019.06.046

Fingerprint Analysis of Pterocarpus erinaceus Poir by HPLC

WEI Jian-huaet al(1.Center of Technology, Shantou EntryExit Inspection and Quarantine Bureau, Shantou,Guangdong515041;2. Shantou Customs District,Shantou,Guangdong515031)

Abstract?Eight batches of Pterocarpus erinaceus Poir were determined by RPHPLC. The similarity analysis software "similarity evaluation system of Chinese traditional medicine chromatogram fingerprint(2012 edition)" was used to calculate and process the eight batches of P. erinaceus and the similarities were above 0.9. The fingerprint of P.erinaceus. was established which was composed of six common characteristic peaks,and the method of fingerprint detection was investigated. The method was accurate with good reproducibility. As a reference,the fingerprint can be used as an auxiliary identification of P. erinaceus,which was characterized by objective identification index,simple identification method and nondamage detection. It provided a new method for the nondestructive identification of P. erinaceus.

Key words HPLC;Fingerprint;Pterocarpus erinaceus Poir; Identification method

紅木作為一類珍貴的木材資源,不是樹木分類學(xué)上某個(gè)樹種的名稱,而是來源于明清時(shí)代的宮廷、王府及不同地區(qū)的生產(chǎn)者和經(jīng)銷商,長(zhǎng)期自然形成的經(jīng)過歸類的木材商品名。由于其具有特征性顏色與良好物理力學(xué)性能而備受人們青睞,在不同時(shí)代、不同地區(qū),紅木都有著不同的內(nèi)涵[1]。由于紅木資源非常短缺,隨著人民生活水平的提高,人們對(duì)木材質(zhì)量的追求越來越高,因此紅木價(jià)格很高,不同種類的紅木價(jià)格差別又極大。由于紅木造假利潤(rùn)空間極大,于是市場(chǎng)上以次充好、以假亂真的現(xiàn)象較為普遍。

刺猬紫檀(Pterocarpus erinaceus Poir)是紫檀屬花梨木類樹木,主要產(chǎn)地為塞內(nèi)加爾、幾內(nèi)亞比紹等熱帶非洲國(guó)家。刺猬紫檀是珍貴紅木之一,已經(jīng)進(jìn)入《瀕危野生動(dòng)植物種國(guó)際貿(mào)易公約》(簡(jiǎn)稱CITES公約)目錄,得到管制和保護(hù)。其是貴重家具及美術(shù)工藝品的原材料,由于成材需時(shí)長(zhǎng),加之材質(zhì)耐用,能散發(fā)一定的香氣,具有很高的市場(chǎng)價(jià)值和使用價(jià)值。刺猬紫檀作為紅木原材,價(jià)格相對(duì)比較便宜,廣泛用于紅木家具制造產(chǎn)業(yè)。市場(chǎng)所售刺猬紫檀常常會(huì)出現(xiàn)摻假現(xiàn)象,一方面常被不法分子用來冒充價(jià)格相對(duì)較高的紅木,如巴里黃檀;另一方面也有不是紅木的膠漆樹、木莢豆被用來冒充刺猬紫檀,因此對(duì)其進(jìn)行真?zhèn)舞b別極有必要。

1?紅木鑒定方法概述

木材識(shí)別是一種實(shí)踐性和專業(yè)性都很強(qiáng)的工作,需要從業(yè)者具有較強(qiáng)的木材構(gòu)造專業(yè)知識(shí)和豐富的鑒定經(jīng)驗(yàn)。傳統(tǒng)木材鑒定主要是以簡(jiǎn)便實(shí)用的宏觀特征(如密度、材色、重量、結(jié)構(gòu)和紋理)為依據(jù)來確定,輔以必要的木材解剖特征與觀察記載相比較,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)木材的鑒定[2-3]。但這種方法往往只能將紅木鑒定到類,鑒定到種就比較困難,存在一定的人為因素。而同屬同類的不同樹種間價(jià)格差異懸殊,因此不能很好地滿足木材交易市場(chǎng)、木材經(jīng)銷商和消費(fèi)者的實(shí)際需求。

在紅木識(shí)別中,對(duì)紅木家具或工藝品的識(shí)別比原木識(shí)別更具有實(shí)際價(jià)值。然而傳統(tǒng)木材鑒定過程中截取樣品要滿足徒手切片或切片機(jī)切片的要求,木樣長(zhǎng)、寬、高的尺寸有一定的要求,長(zhǎng)度紋理方向與樹干方向平行,寬度和高度紋理方向與樹干方向垂直,但由于一套紅木家具或工藝品價(jià)值很高,紅木所有者難以接受傳統(tǒng)木材識(shí)別方法對(duì)樣品造成的破壞。另外,受樹木立地條件的影響,木材構(gòu)造存在差異,即使是同一株樹,不同的樹高和樹徑部分的微觀構(gòu)造有一定的差異[4-5],而且截取的樣品并沒有包含一個(gè)完整的生長(zhǎng)輪,在觀察其切面微觀構(gòu)造特征時(shí)存在一定的局限性,影響鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

研究人員也嘗試將分子生物學(xué)DNA鑒定技術(shù)引入紅木鑒定[6],但是紅木樣品無論是家具還是木材往往保存時(shí)間已經(jīng)很長(zhǎng),由于紅木是心木,心木的細(xì)胞均死亡很久,DNA受到很大程度的破壞,DNA的提取受到很大限制,所以很難應(yīng)用于實(shí)際。

近幾十年,色譜指紋圖譜技術(shù)已經(jīng)越來越多地被用于蜂蜜、中藥材、茶葉等,特別是在中藥材地道性上應(yīng)用最為廣泛,具有非常重要的應(yīng)用價(jià)值。近年來,色譜指紋圖譜技術(shù)也逐漸被運(yùn)用于紅木輔助鑒定。紅木由于生長(zhǎng)的立地條件不同,同一樹種木材的密度、材色、管孔分布類型(生長(zhǎng)輪類型)、紋理、結(jié)構(gòu)等都有不同程度的變異,即使同一樹株,在不同的樹高和樹徑部位的木材也有差異。但是作為同一樹種的木材,特別是心木,一個(gè)基本假設(shè)就是總會(huì)含有一些共同的化學(xué)物質(zhì),化學(xué)物質(zhì)量之間的比例有一定的規(guī)律,不同種紅木樣品含有不同的化學(xué)物質(zhì)。HPLC指紋圖譜技術(shù)就是提取同樹種心木的共有特征,相同的保留時(shí)間代表有相同的化學(xué)物質(zhì),峰面積之間的比例關(guān)系代表化學(xué)物質(zhì)之間量的關(guān)系,從而印證和利用這個(gè)基本假設(shè)進(jìn)行木材鑒定。沈明月等[7]應(yīng)用HPLC技術(shù)構(gòu)建了印度紫檀、大果紫檀、東非黑黃檀、盧氏黑黃檀的指紋圖譜,可用于這些紅木的輔助鑒定。羅莎[8]利用GC-MS技術(shù)構(gòu)建了大果紫檀、交趾黃檀、微凹黃檀、盧氏黑黃檀的指紋圖譜,并結(jié)合木材構(gòu)造特征探索了指紋圖譜信息對(duì)木材分類與鑒別的作用。以上研究說明了色譜指紋圖譜技術(shù)用于紅木鑒定是可行的,是一種人為因素較小、分辨率高、特異性強(qiáng)的輔助傳統(tǒng)方法的木材識(shí)別方法。

該文利用汕頭出入境檢驗(yàn)檢疫局多年來從事紅木進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫業(yè)務(wù)積累的、經(jīng)廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心國(guó)家木制品檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室復(fù)核鑒定的標(biāo)本,改進(jìn)紅木色譜指紋圖譜技術(shù),采用相似度分析軟件“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2012版)”計(jì)算處理,建立了由6個(gè)共有特征峰組成的刺猬紫檀指紋圖譜并應(yīng)用于刺猬紫檀的真?zhèn)舞b定。該方法突出特點(diǎn)是無損、快速和客觀,由于取樣量?jī)H為0.2 g,對(duì)于成品家具或藝術(shù)品實(shí)現(xiàn)一定意義上的無損傷檢測(cè);操作簡(jiǎn)便,耗時(shí)短,做到快速鑒別;由于避免了人為的主觀判斷,因此是一種客觀的鑒定方法,對(duì)于木材交易市場(chǎng)、木材經(jīng)銷商、消費(fèi)者、公安機(jī)關(guān)、海關(guān)和科研機(jī)構(gòu)等具有很強(qiáng)的應(yīng)用價(jià)值。

2?試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.1?試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料來自汕頭出入境檢驗(yàn)檢疫局多年來積累的從非洲尼日利亞等原產(chǎn)地進(jìn)口的刺猬紫檀標(biāo)本,所有的樣品都通過木材鑒定人員的鑒定,結(jié)合原產(chǎn)地資料正確定名的樹種樣品,并經(jīng)廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心國(guó)家木制品檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室復(fù)核鑒定。

2.2?儀器與試劑

選用Agilent 1200型高效液相色譜儀(美國(guó)):DAD檢測(cè)器,四元梯度泵;Millipore Advantage A10超純水系統(tǒng)(美國(guó));梅特勒-托利多AL204IC電子分析天平(瑞士);CBL photoelectron TECHNOLOGY Model C9860A型超聲波清洗器。液相用乙腈為色譜純;液相用水為超純水;其余試劑均為分析純。

2.3?色譜條件

色譜柱:Agilent Eclipse XDBC18,填料粒徑5 μm,柱長(zhǎng)250 mm,柱內(nèi)徑4.6 mm;流動(dòng)相:以水為流動(dòng)相A,乙腈為流動(dòng)相B,按照表1進(jìn)行梯度洗脫;檢測(cè)波長(zhǎng):290 nm;柱溫:30℃;流速:1.0 ml/min。

2.4?供試品制備

稱取刺猬紫檀樣品(已經(jīng)通過傳統(tǒng)木材形態(tài)學(xué)鑒定,被正確定名的樣品)心材部分木屑0.2 g(精確至0.001 g),置于50 ml離心管中,加入5 ml甲醇、5 ml高純水,震搖5 min,超聲提取5 min,濾紙過濾,再以0.2 μm的微孔濾膜過濾后備用[7]。

2.5?樣品測(cè)定

吸取上述步驟所得供試品溶液,注入高效液相色譜儀中進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè),進(jìn)樣量為20 μl。按照上述色譜條件分析測(cè)定,采集103 min色譜數(shù)據(jù)。

2.6?數(shù)據(jù)分析

將經(jīng)過高效液相采集的木材圖譜,導(dǎo)入色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件中進(jìn)行指紋圖譜共有峰、強(qiáng)峰、特征峰確證和相似度分析,通過多個(gè)同種紅木樣品,建立該珍貴木材的對(duì)照?qǐng)D譜,并建立譜庫。

對(duì)于每個(gè)收集到的刺猬紫檀樹種的高效液相采集圖譜,將其導(dǎo)入國(guó)家藥典委員會(huì)頒布的“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2012版)”,選取時(shí)間窗寬度為0.1~0.2 min,以中位數(shù)生成對(duì)照?qǐng)D譜,經(jīng)過多點(diǎn)校正后自動(dòng)匹配,生成其指紋圖譜對(duì)照?qǐng)D譜,并計(jì)算所比對(duì)批次樣品的指紋圖譜與該對(duì)照?qǐng)D譜的相似度。在多批刺猬紫檀的共有峰中篩選出峰比高的且穩(wěn)定出現(xiàn)的峰作為刺猬紫檀標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的特征峰,從而建立刺猬紫檀的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。

3?結(jié)果與分析

3.1?刺猬紫檀的HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜

選定8批刺猬紫檀樣品,將其導(dǎo)入國(guó)家藥典委員會(huì)頒布的“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2012版)”,選取時(shí)間窗寬度為0.2 min,以中位數(shù)生成對(duì)照?qǐng)D譜,經(jīng)過多點(diǎn)校正后自動(dòng)匹配,生成刺猬紫檀指紋圖譜共有模式,并計(jì)算8批樣品的指紋圖譜與該共有模式的相似度(表2)。8批刺猬紫檀與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜相似度計(jì)算結(jié)果分別為:0.998、 0.995、 0.984、 0.999、 1、0.998、0.999、0.999、8批樣品的相似度在0.984以上。

該共有模式含有6個(gè)共有峰,經(jīng)驗(yàn)證這6個(gè)共有峰的性噪比S/N都大于10,說明峰信號(hào)穩(wěn)定,在8批次的刺猬紫檀里都穩(wěn)定出現(xiàn),故確定該共有峰即為特征峰,保留時(shí)間分別為31.862、35.231、 46.415、 58.021、 63.243、 84.681 min,RSD<0.5%(表3)。

不同的樣本在進(jìn)行后續(xù)數(shù)據(jù)處理時(shí),需要同一組分在不同樣本中的保留時(shí)間一致,因此要對(duì)色譜保留時(shí)間和保留面積數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,求得相對(duì)值,以避免色譜峰漂移對(duì)分析結(jié)果的影響。6號(hào)峰峰面積最大,以其為參照確定6個(gè)共有峰(即特征峰)為構(gòu)成刺猬紫檀指紋圖譜的特征峰,樣品共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和峰面積分別見表4、5。共有指紋峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD值均小于0.3%,由于紅木立地條件的差異較大,1號(hào)峰相對(duì)峰面積的RSD值小于0.5%,2號(hào)峰相對(duì)峰面積的RSD值小于0.8%,3號(hào)峰相對(duì)峰面積的RSD值小于0.7%,4號(hào)峰相對(duì)峰面積的RSD值小于0.5%,5號(hào)峰相對(duì)峰面積的RSD值小于1.5%。6個(gè)共有峰相對(duì)保留時(shí)間的tg分別為:0.376、0.416、0.548、0.685、0.837、

1.000、RSD<0.3%。

測(cè)定8批刺猬紫檀HPLC指紋圖譜,并進(jìn)行分析比較,得到由其共有特征峰構(gòu)成的刺猬紫檀HPLC的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜(圖1、2)。

3.2?方法學(xué)考察

3.2.1?精密度試驗(yàn)?取同一供試品溶液(C3),依據(jù)2.3色譜條件和2.5樣品測(cè)定方法,連續(xù)進(jìn)樣5次。采用中藥色譜指紋圖譜評(píng)價(jià)分析系統(tǒng)(2012版)對(duì)其指紋圖譜進(jìn)行分析,與生成的對(duì)照指紋圖譜對(duì)比,各圖譜的相似度均大于0.984。以6號(hào)峰為參照峰,計(jì)算出1~6號(hào)共有指紋峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD值均小于3%,相對(duì)峰面積的RSD值均小于0.5%,表明儀器穩(wěn)定,精密度良好。

3.2.2?重現(xiàn)性試驗(yàn)?取同一批刺猬紫檀木屑(C3),精密稱取5份,按2.4供試品制備方法平行制備5份供試品溶液,分別依據(jù)2.3色譜條件和2.5樣品測(cè)定方法進(jìn)樣。采用相似度軟件對(duì)其指紋圖譜進(jìn)行分析,與生成的對(duì)照指紋圖譜相比,5份樣品的相似度均大于0.990。以6號(hào)峰為參照峰,計(jì)算出1~6號(hào)共有指紋峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD值小于2%,由于天然紅木樣品的不均一性,4號(hào)峰相對(duì)峰面積的RSD值為0.9108%,其他共有峰相對(duì)峰面積的RSD值均小于0.5%,表明該方法共有峰保留時(shí)間重現(xiàn)性良好。

3.2.3?穩(wěn)定性試驗(yàn)?取同一份供試品溶液(C3),依據(jù)2.3色譜條件和2.5樣品測(cè)定方法,分別于0、3、6、9、15、24 h進(jìn)樣檢測(cè)。采用相似度軟件對(duì)其指紋圖譜進(jìn)行分析,與生成的對(duì)照指紋圖譜相比,6份樣品的相似度均大于0.980。以9號(hào)峰為參照峰,計(jì)算出1~9號(hào)共有指紋峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD%值均小于1.5%,相對(duì)峰面積的RSD值小于0.3%,表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.3?刺猬紫檀標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中共有特征峰特異性的考察

3.3.1?與其他紅木指紋圖譜的比較?課題組除了建立刺猬紫檀的HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜,還研究了印度紫檀、印度小葉紫檀、大果紫檀、非洲紫檀、海南黃花梨油梨、海南黃花梨糠梨、微凹黃檀、東非黑黃檀、賽州黃檀、盧氏黑黃檀、闊葉黃檀、伯利茲黃檀、交趾黃檀、巴里黃檀、奧氏黃檀、白花崖豆木、蘇拉威西烏木等紅木,合計(jì)320個(gè)樣品,建立了各自相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。將刺猬紫檀與其他樹種的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行比較,考察刺猬紫檀標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中6個(gè)共有特征峰的特異性。為了避免保留時(shí)間漂移引起的誤差,導(dǎo)致漏掉相同的峰,該文規(guī)定考察不同樹種是否含有刺猬紫檀所具有的共有特征峰時(shí),對(duì)照刺猬紫檀標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜6個(gè)共有特征峰的保留時(shí)間在±0.250 min的峰視為同一峰,分別計(jì)算各紅木樹種標(biāo)準(zhǔn)圖譜中的峰面積與其最大峰面積的百分比(表6)。

從表6可見,第2峰是刺猬紫檀特有的,其他共有特征峰在不同樹種的紅木中也可能含有,但含量百分比不同;刺猬紫檀標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的6個(gè)共有特征峰中,賽州黃檀標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜含有其中4個(gè),但是兩者標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜差別非常大,將兩者數(shù)據(jù)導(dǎo)入相似度軟件“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2012版)”,其相似度僅為0.013,說明兩者完全不同;6個(gè)峰只在刺猬紫檀同時(shí)出現(xiàn),可以說明這6個(gè)共有特征峰具有足夠的特異性將刺猬紫檀與其他紅木相區(qū)別。

3.3.2?近似樹種指紋圖譜的比較?市場(chǎng)上刺猬紫檀摻假現(xiàn)象嚴(yán)重,一方面常被不法分子用來冒充價(jià)格昂貴的高檔紅木,如巴里黃檀;另一方面也有不是紅木的膠漆樹、木莢豆被用來冒充刺猬紫檀。由表6的對(duì)比結(jié)果可見,巴里黃檀的HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜完全沒有包含刺猬紫檀HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的共有特征峰,因此該研究建立的針對(duì)刺猬紫檀的HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜具有足夠的特異性用于區(qū)別其近似種巴里黃檀。

分別將正確定名的膠漆樹、木莢豆各1個(gè)樣品的指紋圖譜,與刺猬紫檀和巴里黃檀的HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行對(duì)比(圖3)。木莢豆在該研究所建立的色譜條件下出峰數(shù)量極少,只有1個(gè)色譜峰,極易與刺猬紫檀區(qū)分;膠漆樹在該研究所建立的色譜條件下出峰數(shù)量較多,大多數(shù)峰保留時(shí)間在30 min之內(nèi),與刺猬紫檀區(qū)分特征明顯;巴里黃檀HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜共有特征峰分別標(biāo)識(shí)峰編號(hào)1、2、3,與刺猬紫檀標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜所示的共有特征峰區(qū)別特征明顯,并沒有峰保留時(shí)間相近或者相同的現(xiàn)象??梢姶题咸碒PLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜6個(gè)共有特征峰,其特異性可滿足刺猬紫檀與其近似種的區(qū)分鑒別。

4?討論與結(jié)論

對(duì)紅木的鑒定,不能照搬中藥材質(zhì)量控制、道地性和真?zhèn)舞b別的指紋圖譜方法。紅木樹種鑒定的相似度判斷指標(biāo)和相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的標(biāo)準(zhǔn)偏差判斷指標(biāo)要比一般的中藥材等一年生植物的范圍放寬一些,才有實(shí)用意義。

保留時(shí)間的含義是對(duì)應(yīng)樣品所含的化學(xué)成分,峰面積含義是該化學(xué)成分含量,為了盡可能減少各種條件造成高效液相保留時(shí)間的漂移對(duì)指紋圖譜的影響,重點(diǎn)研究相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。刺猬紫檀木材分布地理位置非常廣泛,主要是非洲的岡比亞、加納等國(guó)家,同一類樹種含有相同的化學(xué)成分相對(duì)化學(xué)成分含量來說,貢獻(xiàn)更大。經(jīng)木材結(jié)構(gòu)學(xué)鑒定后正確定名的8批刺猬紫檀的6個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于0.3%,相對(duì)峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.5%以下,因此相對(duì)保留時(shí)間對(duì)刺猬紫檀的鑒定更有現(xiàn)實(shí)意義。

用于刺猬紫檀鑒定的高效液相標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜,只保留其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間的特征,即具有6個(gè)特征峰,其中保留時(shí)間最長(zhǎng)的特征峰的峰面積最大;以該峰面積最大的所述特征峰為參照峰,6個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間tg分別為:0.376、0.416、0.548、0.685、0.837、

1.000、RSD%<0.3%。對(duì)疑似刺猬紫檀樣品的HPLC指紋圖譜與刺猬紫檀HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜采用相同的色譜柱和色譜條件,可以利用指紋圖譜相似度軟件分析相似度,結(jié)合共有特征峰相對(duì)保留時(shí)間的標(biāo)準(zhǔn)偏差進(jìn)行真?zhèn)闻袛?。通過刺猬紫檀與其他16個(gè)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的對(duì)比,以及與其近似種巴里黃檀、易假冒的非紅木類樹種膠漆樹和木莢豆樣品的指紋圖譜的對(duì)比,可見刺猬紫檀HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜6個(gè)共有特征峰,其特異性可滿足刺猬紫檀與其他紅木樹種特別是近似種的區(qū)分鑒別。

色譜條件中波長(zhǎng)的選擇是指紋圖譜研究的重要參數(shù)。一方面,要能較多地檢測(cè)出刺猬紫檀木材浸提物中的化學(xué)物質(zhì),以便呈現(xiàn)其整體特征,但又不能太多,否則色譜峰數(shù)量太多將導(dǎo)致后續(xù)統(tǒng)計(jì)分析工作量巨大;另一方面,刺猬紫檀指紋圖譜研究目的在于區(qū)分刺猬紫檀與其他紅木及近似種,而不是研究其所含化學(xué)成分,所以需要采用一致的紫外波長(zhǎng),即選擇一個(gè)能兼顧多種紅木樹種或摻偽樹種指紋圖譜的研究,以便于比較。該研究參照沈明月[7]的方法,采用290 nm的波長(zhǎng),從研究結(jié)果來看,該波長(zhǎng)能夠滿足區(qū)分刺猬紫檀與其他紅木及近似種的需求。

對(duì)于木材識(shí)別,由最早的樹木分類科、屬系統(tǒng)根據(jù)宏觀的顏色、氣味、氣干密度等特征,發(fā)展到根據(jù)微觀的木材解剖學(xué)角度的顯微結(jié)構(gòu)識(shí)別?;ɡ婺绢惏?個(gè)樹種:安達(dá)曼紫檀、刺猬紫檀、印度紫檀、大果紫檀和囊狀紫檀,這5個(gè)樹種的花梨木由于不同的稀缺程度和木質(zhì)特點(diǎn),價(jià)格相差懸殊。HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜技術(shù)具有人為因素較小、分辨率高、特異性強(qiáng)、快速準(zhǔn)確的突出特點(diǎn),作為一種輔助傳統(tǒng)方法的木材識(shí)別方法,可以鑒定到樹種,對(duì)于木材交易市場(chǎng)、木材經(jīng)銷商、消費(fèi)者、公安機(jī)關(guān)、海關(guān)和科研機(jī)構(gòu)等具有很強(qiáng)的應(yīng)用價(jià)值。

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責(zé)任編輯:李楊

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