侯冕 汪章勛 操海群 檀根甲

摘要 為了篩選防治小麥赤霉病和控制毒素的高效殺菌劑，通過田間小區(qū)藥效試驗及小麥樣品DON毒素檢測，研究了4種殺菌劑對小麥赤霉病的防治效果和控制毒素的能力。結(jié)果表明，36%克菌丹·葉菌唑SC、45%戊唑醇·咪鮮胺EW、48%氰稀·戊唑醇SC和40%戊唑·多菌靈SC在小麥抽穗80%，揚花初期施用，對小麥赤霉病均有較好的防治效果，病指防效在84.25%～93.96%，樣品DON毒素檢測結(jié)果在0.12～0.64 μg/ml，其中36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2的病指防效為93.96%，樣品平均DON毒素檢測結(jié)果為0.12 μg/ml，控制毒素效果達93.72%。

關(guān)鍵詞 小麥赤霉病;殺菌劑;防治效果;毒素

中圖分類號：S435.121?文獻標(biāo)識碼：A?文章編號：2095-3305（2019）06-003-03

DOI： 10.19383/j.cnki.nyzhyj.2019.06.002

Controlling Efficacy of Fungicide Combinations on Fusarium Head Blight and Its Deoxynivalenol Toxin

HOUMian et al（School of Plant Protection，Anhui Agricultural University，Key Laboratory of Biology and Sustainable Management of Plant Diseases and Pests of Anhui Higher Education Institutes，Hefei，Anhui 230036）

Abstract?In order to study controlling efficacy of fungicide combinations on Fusarium head blight and its deoxynivalenol toxin，controlling efficacy of different fungicide combinations on Fusarium head blight （FHB），as well as their impact on content of deoxynivalenol toxin in wheat grain were investigated through field experiment. The results showed that FHB could be controlled by tested fungicides. 36% captan·metconazole SC 900 ml/hm2 had the best control effects on Fusarium head blight，and the control effect was 93.96%. Meanwhile，it had the best inhibition effects of DON，the average DON toxin content in wheat grain was 0.12 μg/ml，and the control effect was 93.72%.

Key words Fusarium head blight;Fungicide;Controlling efficacy;Deoxynivalenol toxin

小麥赤霉病是世界溫暖潮濕和半潮濕地區(qū)麥田廣泛發(fā)生的一種毀滅性病害，在我國江淮地區(qū)發(fā)生尤為嚴重，屬于典型的氣候型病害，并具有周期性流行的特點[1-2]。2010年以來，我國小麥赤霉病流行明顯增加，呈現(xiàn)北擴西移的趨勢。近年來由于氣候條件和栽培方式的變化，小麥赤霉病連續(xù)幾年在安徽地區(qū)大發(fā)生，在大流行年份病穗率超過40%，造成減產(chǎn)20%～40%，甚至絕收，中等流行年份病穗率30%～40%，減產(chǎn)5%～15%[3]。小麥受害后，不僅影響產(chǎn)量，還產(chǎn)生脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）等真菌毒素，影響食品安全[3-6]。人畜誤食病粒后會引起發(fā)熱、嘔吐、腹瀉等中毒反應(yīng)，還有致癌、制畸和誘變的作用，嚴重的甚至導(dǎo)致死亡。相關(guān)研究認為賁門癌高發(fā)和食用DON污染的小麥有關(guān)，大骨節(jié)病也和DON相關(guān)[1]。因此，許多國家都制定了DON限量標(biāo)準，我國DON限量標(biāo)準為1 000 μg/kg[1]。自2000年以來，小麥赤霉毒素暴發(fā)頻率增加，DON毒素成為小麥增產(chǎn)與質(zhì)量安全的主要威脅，尤其對我國長江流域、黃淮流域等重要冬麥區(qū)構(gòu)成重大危害，流行年份受害小麥面積達700萬hm2[1]。由于小麥籽粒中的毒素含量超過國家限量標(biāo)準，部分省區(qū)出現(xiàn)小麥收儲與利用難題。目前，化學(xué)防治仍是控制小麥赤霉病的重要手段，為此筆者開展了不同殺菌劑防治小麥赤霉病的田間藥效試驗，為今后指導(dǎo)小麥赤霉病防治提供科學(xué)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?試驗材料

1.1.1?供試殺菌劑?36%克菌丹·葉菌唑SC（陜西上格之路生物科學(xué)有限公司），45%戊唑醇·咪鮮胺EW（四川國光農(nóng)化股份有限公司），48%氰烯·戊唑醇SC（江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司），40%戊唑·多菌靈SC（江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司）。

1.1.2?供試品種?小麥品種是寧麥13，為小麥赤霉病感病品種。

1.2?試驗設(shè)計

試驗田選擇地勢平坦、肥力中等的田塊。試驗設(shè)6個處理（表1）：36%克菌丹·葉菌唑SC 750、900 ml/hm2，45%戊唑醇·咪鮮胺EW 600 ml/hm2，48%氰烯·戊唑醇SC 750 ml/hm2，40%戊唑·多菌靈SC 1 050 ml/hm2，空白對照（清水噴施），每處理3次重復(fù)，共18個小區(qū)，小區(qū)面積50 m2，隨機區(qū)組排列。各小區(qū)的肥力、管理條件一致。

1.3?施藥時間和方法

于小麥抽穗80%，揚花初期第1次施藥，間隔7 d左右進行第2次施藥。該試驗各處理于2017年4月13日施藥1次，施藥時小麥處于始見花期，4月21日施第2次藥。

將配好的藥液采用衛(wèi)士牌WS？鄄16型背負式手動噴霧器，按每公頃對水450 L均勻細水噴霧，藥液重點噴霧于小麥穗部。全田均勻噴霧，施藥時按單個重復(fù)依次施藥。

1.4?DON毒素測定

1.4.1?小麥樣品取樣及處理?于小麥成熟期，每小區(qū)對角線隨機5點取樣，共計取麥粒1 kg，對應(yīng)重復(fù)處理區(qū)編號。共36份小麥樣品。

采用實驗室小型磨樣機（浙江托普，F(xiàn)S？鄄II），將病麥粒磨成粉末，并收集保留。為避免樣品間的混雜和污染，在每個樣品磨碎、收集之后，用刷子將磨樣機的研磨片及出樣口處清潔干凈。

1.4.2?毒素提取及測定?樣品研磨完成后進行毒素的提取，首先稱取研磨好的樣品2.5 g，裝入50 ml塑料離心管中，加入10 ml（4倍）的乙腈水溶液（乙腈∶水=84∶16），浸泡4 h，其間可震蕩混勻數(shù)次。浸泡后將離心管置于離心機中，4 000 r/min離心5 min;吸取上清液4 ml到Bond Elut Mycotoxin凈化柱，自然流速進行凈化;準確吸取凈化液2 ml于15 ml離心管中，并用50℃氮氣緩慢吹干后，用0.5 ml流動相甲醇水（20∶80）定容，最后將0.5 ml流動相全部過0.22 μm有機系微孔濾膜，此時收集的濾液可用于液相色譜測定。

將DON標(biāo)準品（普瑞邦）進行1、5、10、20和25 μg/ml的梯度稀釋，之后進行吸收譜峰測定，用于標(biāo)準曲線繪制。實驗室所用色譜分析儀為Agilent 1260 Infinity，色譜柱為Agilent ZORBAX Bonus？鄄RP分析柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），樣品進樣量為20 μl，流動相為甲醇水（20∶80），流速為1 ml/min，紫外檢測波長設(shè)置為220 nm。檢測過程中記錄每個樣品的吸收譜峰面積值，并將譜峰值對應(yīng)到標(biāo)準曲線計算的線性方程中，得到毒素濃度。

1.5?調(diào)查項目與方法

1.5.1?病情調(diào)查與防效計算?于小麥蠟熟期（5月11日，小麥赤霉病病情穩(wěn)定期）調(diào)查各小區(qū)發(fā)病情況，每小區(qū)在中間位置對角線5點取樣調(diào)查，每點調(diào)查200穗，每小區(qū)調(diào)查1 000穗，調(diào)查各級病穗數(shù)，計算病穗率、病情指數(shù)、防治效果。嚴重度分級標(biāo)準：0級，全穗無病;1級，枯穗面積占全穗面積的1/4以下;3級，枯穗面積占全穗面積的1/4～1/2;5級，枯穗面積占全穗面積的1/2～3/4;7級，枯穗面積占全穗面積的3/4以上。

計算公式：

病穗率（%）=（病穗數(shù)/總調(diào)查株樹）×100（1）

病情指數(shù)=∑（各級病穗數(shù)×相對應(yīng)級別）/（調(diào)查總穗數(shù)×最高級值）×100（2）

病穗防效（%）=（對照區(qū)病穗率-處理區(qū)病穗率）/對照區(qū)病穗率×100（3）

病指防效（%）=（對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)×100（4）

1.5.2?小麥的安全性?施藥后定期觀察所有藥劑處理區(qū)小麥生長狀態(tài)，觀察有無藥害現(xiàn)象發(fā)生。

2?結(jié)果與分析

2.1?幾種復(fù)配殺菌劑對小麥赤霉病的防治效果

由表2可知，5個處理組的病指防效分別為89.24%、93.96%、91.34%、90.39%和84.25%。病情穩(wěn)定期（臘熟期）調(diào)查，36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2對小麥赤霉病具有較好的防治效果，對小麥赤霉病的病穗和病指防效分別為92.16%和93.96%，高于45%戊唑醇·咪鮮胺EW 600 ml/hm2、48%氰烯·戊唑醇SC 750 ml/hm2和36%克菌丹·葉菌唑SC 750 ml/hm2，顯著高于40%戊唑·多菌靈SC 1 050 ml/hm2。

2.2?不同復(fù)配殺菌劑控制DON毒素的作用

2.2.1?DON標(biāo)準曲線的繪制?根據(jù)DON標(biāo)準品濃度和不同濃度在液相色譜儀上呈現(xiàn)的吸收峰面積間的關(guān)系繪制DON標(biāo)準曲線，兩者之間呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系，線性方程為y=22 168x，相關(guān)系數(shù)R2=0.996（圖1）。

2.2.2?樣品DON毒素含量?根據(jù)線性關(guān)系式對樣品中DON毒素的含量進行測定和計算（表3）。在安徽地區(qū)施用36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2樣品平均DON毒素含量最低，為0.12 μg/ml，控制毒素效果達93.72%，施用36%克菌丹·葉菌唑SC 750 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.42 μg/ml，控制毒素效果為78.01%，由此可以看出同一藥劑不同用量，樣品DON毒素含量存在極顯著差異。施用48%氰烯·戊唑醇SC 750 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.17 μg/ml，施用40%戊唑·多菌靈SC 1 050 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.28 μg/ml，施用45%戊唑醇·咪鮮胺EW 600 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.64 μg/ml，均遠遠低于清水對照（1.91 μg/ml）。

3?小結(jié)與討論

2017年小麥赤霉病在安徽地區(qū)發(fā)生流行，田間藥效試驗與小麥樣品DON毒力檢測結(jié)果表明36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2防治小麥赤霉病最理想，且對小麥生長安全，未發(fā)現(xiàn)有藥害現(xiàn)象，說明可大面積推廣使用，建議第1次施藥在小麥始見花期，間隔7～8 d進行第2次防治，可獲得理想效果。

DON是小麥赤霉病致病菌侵染小麥過程中產(chǎn)生的一種真菌毒素，通過結(jié)合到核糖體上的肽基轉(zhuǎn)移酶抑制蛋白質(zhì)合成，破壞人和動物的免疫系統(tǒng)，急性中毒主要表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉、頭暈、炎癥和細胞壞死等癥狀，慢性中毒主要表現(xiàn)在對神經(jīng)系統(tǒng)的危害，引起拒食和體重下降等[7-9]。供試殺菌劑對DON具有良好的抑制效果，均能降低小麥籽粒中DON檢出量。其中，在安徽地區(qū)施用36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2處理對DON抑制效果最好，樣品平均DON毒素含量最低，控制毒素效果達93.72%。

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責(zé)任編輯：鄭丹丹