任艷玲 王濤 王 力 楊豐 何絲汀 安可 羅麗華

摘? ? 要：為了篩選出有效防治辣椒炭疽病的藥劑，采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定12 種殺菌劑對(duì)辣椒炭疽病菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，供試殺菌劑對(duì)辣椒炭疽病菌絲生長(zhǎng)均有不同程度的抑制，其中化學(xué)殺菌劑毒力由強(qiáng)到弱依次為多菌靈、氟硅唑、腐霉利、己唑醇、嘧菌酯、溴菌腈、菌核凈、噻呋酰胺和嘧霉胺，EC50值分別為0.43、057、1.20、3.27、7.97、11.80、13.96、41.71、105.07 mg·L-1;生物殺菌劑毒力由強(qiáng)到弱依次為丁子香酚、多抗霉素和中生菌素，EC50值分別為1.84、8.02、20.48 mg·L-1。研究結(jié)果為防治辣椒炭疽病提供了科學(xué)指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞： 辣椒; 炭疽病; 殺菌劑; 菌絲生長(zhǎng)速率法; 毒力測(cè)定

Abstract：Anthracnose is an important disease in the production and storage of pepper. Agents for effective control of pepper were screened to provide guidance for prevention. The indoor toxicity of 12 fungicides was detected by using mycelial growth aate method. The strongest efficacy was found in Pythium， while the weakest efficacy was revealed in thifluzamide （Drug efficacy： carbendazim >fluorosilazole > fumarin >hexazolol >pyrimethimide > bromonitrile > sclerotin >thiafuramide >pyrimethimide .The EC50 was 0.43、057、1.20、3.27、7.97、11.80、13.96、41.71 and 105.07 mg·L-1， respecitively）. The virulence of biological fungicides was strongest efficacy for butyrophenol， and weakest for polyantimycin （eugenol >polyclonal antibiotic > mesomycin， with the EC50 was1.84， 8.02 and 20.48 mg L-1， respectively）. In order to enhance the efficacy of microbicides and extend the onset time， the reasonable rotation or mixing microbicides should be scientifically measured according to the onset time of microbicides and the type of action. The current study provides scientific guidance for the prevention and control of pepper diseases caused by anthracnos.

Key words：Pepper; Anthracnos; Fungicide; Growth rate method; Toxicity measurement

辣椒是原產(chǎn)南美的一年生茄科草本經(jīng)濟(jì)作物，其果實(shí)因豐富的維生素C等營(yíng)養(yǎng)和獨(dú)特的口感贏得消費(fèi)者廣泛認(rèn)可，成為重要蔬菜及調(diào)味品，種植面積和產(chǎn)量在蔬菜類(lèi)作物中名列前茅[1-4]。辣椒在我國(guó)已有數(shù)百年栽培食用史，貴州在全國(guó)辣椒產(chǎn)業(yè)中具有重要地位，2016年貴州辣椒種植面積32萬(wàn)hm2，產(chǎn)量487萬(wàn)t，產(chǎn)值146億元，全國(guó)占比分別超過(guò)24%、17%和21%，辣椒已成為貴州重要優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)，在促進(jìn)農(nóng)民增收，推進(jìn)精準(zhǔn)脫貧方面發(fā)揮重要作用[5-6]。長(zhǎng)時(shí)間大面積種植，特別是連片連作導(dǎo)致辣椒病害頻繁發(fā)生，影響產(chǎn)量和質(zhì)量，給從業(yè)者造成較大經(jīng)濟(jì)損失。炭疽病是辣椒上的主要病害，在我國(guó)、印度、印度尼西亞和韓國(guó)等主產(chǎn)區(qū)常年引起減產(chǎn)達(dá)30% 以上，泰國(guó)減產(chǎn)嚴(yán)重年份高達(dá)80%[7]，我國(guó)陜西少數(shù)嚴(yán)重區(qū)域損失達(dá)90%[8]，貴州5個(gè)主產(chǎn)區(qū)辣椒病害調(diào)查，發(fā)現(xiàn)炭疽病廣泛發(fā)生，危害最嚴(yán)重的貴陽(yáng)市辣椒基地發(fā)病率高達(dá)83%，危害最輕的遵義發(fā)病率也有33%[9]。辣椒炭疽病致病菌群種類(lèi)復(fù)雜，已先后報(bào)道10余種病原菌[7-8]，不同地區(qū)致病菌種類(lèi)區(qū)別很大，即使同一種致病菌，由于栽培環(huán)境和用藥習(xí)慣不同，對(duì)同種殺菌劑敏感性差異也可能較大[10-12]。由于地區(qū)辣椒炭疽病針對(duì)性研究相對(duì)較少，各地在辣椒炭疽病藥劑防治中存在較大盲目和隨意性，筆者以2017年從貴陽(yáng)花溪辣椒種植基地分離出的炭疽病原菌為目標(biāo)，2018年9—12月在貴州山地特色水果及制品工程研究中心，選擇廣泛使用的殺菌劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，以篩選出具有較強(qiáng)抑制作用的藥劑，為針對(duì)性防治提辣椒炭疽病供技術(shù)支持和科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株與藥劑

供試?yán)苯诽烤也【–olletotrichum gloeosporioides），由貴州山地特色水果及制品工程研究中心從貴州省貴陽(yáng)市花溪區(qū)種植基地辣椒上分離、鑒定，保存于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）斜面上，4 ℃冰箱備用，使用前先進(jìn)行活化。

供試的12種殺菌劑分別為丁子香酚、中生菌素、多抗霉素、嘧霉胺、噻呋酰胺、溴菌腈、多菌靈、氟硅唑、菌核凈、己唑醇、腐霉利和嘧菌酯，各藥劑的生產(chǎn)廠家、劑型、有效成分含量及毒力測(cè)試配置濃度詳見(jiàn)表1。

1.2 方法

研究參考方中達(dá)、沈晉良和張焱能等的方法[13-15]。殺菌劑室內(nèi)毒力測(cè)定采用菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行。在無(wú)菌條件下，用無(wú)菌水配制好供試藥劑的母液，然后分別加入55 ℃左右的PDA培養(yǎng)基中，配成表1濃度，搖勻后倒入9 cm的培養(yǎng)皿中制成相應(yīng)濃度的含藥平板，對(duì)照用等量無(wú)菌水與PDA培養(yǎng)基混合均勻制成;供試?yán)苯诽烤也【罨蠼臃N在PDA培養(yǎng)基上，25 ℃恒溫培養(yǎng)5 d，用直徑5 mm打孔器在菌落邊緣取菌餅，接種到含有不同濃度藥劑的培養(yǎng)基上，每皿放置1個(gè)菌餅，置于25 ℃恒溫箱培養(yǎng)5 d，十字交叉測(cè)量各處理菌落直徑，每處理3次重復(fù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)

抑菌率/%=（對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑-處理菌落增長(zhǎng)直徑）/對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑×100;將抑菌率換算為概率值，濃度計(jì)算轉(zhuǎn)化為濃度對(duì)數(shù)，用SPSS軟件計(jì)算求得毒力回歸方程、抑制中濃度EC50和相關(guān)系數(shù)，根據(jù)EC50大小評(píng)價(jià)殺菌劑的抑菌效果。

2 結(jié)果與分析

從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，供試12種殺菌劑對(duì)辣椒炭疽病菌菌絲生長(zhǎng)均有不同程度的抑制作用（表2），多菌靈和氟硅唑?qū)苯诽烤也【z生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)，EC50值均小于1mg·L-1，分別為0.43、0.57 mg·L-1;腐霉利、丁子香酚、己唑醇、嘧菌酯和多抗霉素的抑制作用次之，EC50值均在1～10 mg·L-1之間，分別為1.20、1.84、3.27、7.97、8.02 mg·L-1;溴菌腈、菌核凈、中生菌素、噻呋酰胺和嘧霉胺的抑制作用最弱，EC50值分別為11.80、13.96、20.48、41.71、105.07 mg·L-1。

3 討論與結(jié)論

炭疽病是辣椒上的重要病害，可侵染葉、枝和果實(shí)等部位，影響辣椒產(chǎn)量和質(zhì)量，發(fā)生嚴(yán)重時(shí)能造成重大損失。辣椒炭疽病防治措施歸納起來(lái)主要包括選用抗性品種、農(nóng)業(yè)防治、生物防治和化學(xué)藥劑防治等。由于辣椒抗性品種有限、不同區(qū)域優(yōu)勢(shì)炭疽菌種類(lèi)及生物學(xué)特性區(qū)別較大，制約了抗性品種和生物防治的推廣應(yīng)用，目前生產(chǎn)中防治辣椒炭疽病主要依賴(lài)化學(xué)藥劑。部分地區(qū)進(jìn)行辣椒炭疽病殺菌劑毒力測(cè)試，但選用藥劑種類(lèi)相對(duì)較少，湖南和海南研究?jī)H用了1種[12，16]，貴州2個(gè)團(tuán)隊(duì)測(cè)試分別選擇了3種和5種[4，9]，重慶、廣西和山東試驗(yàn)選用了5種、6種和6種殺菌劑[17-19]。大部分辣椒產(chǎn)區(qū)未進(jìn)行當(dāng)?shù)貎?yōu)勢(shì)炭疽病原菌對(duì)不同種類(lèi)殺菌劑的毒力測(cè)試，在藥劑防治中存在較大盲目性和隨意性，以致辣椒炭疽病造成損失不斷增加。

筆者針對(duì)生產(chǎn)需要，選取12種常見(jiàn)藥劑進(jìn)行辣椒炭疽病菌的的室內(nèi)毒力測(cè)定。結(jié)果表明，供試殺菌劑對(duì)辣椒炭疽病菌均有一定抑制活性，但不同類(lèi)型化學(xué)藥劑間的抑菌能力差異較大，苯并咪唑類(lèi)殺菌劑防效最好，這與廣西和貴州其他團(tuán)隊(duì)已有研究結(jié)果一致[4，9，18];苯并咪唑類(lèi)的多菌靈、三唑類(lèi)的氟硅唑和己唑醇、亞胺類(lèi)的腐霉利和甲氧基丙烯酸酯類(lèi)的嘧菌酯抑菌效果較好，可作為化學(xué)防治首選用藥;機(jī)制作用方式未知的溴菌腈、亞胺類(lèi)的菌核凈、噻唑酰胺類(lèi)的噻呋酰胺和吡啶類(lèi)的嘧霉胺也有一定防效，可作為防治的備選或輪換用藥。

化學(xué)殺菌劑因效果快捷、方便在防治中處于主導(dǎo)地位，但生物農(nóng)藥因低毒安全、對(duì)環(huán)境的友好和較難產(chǎn)生抗性等優(yōu)勢(shì)越來(lái)越多得到重視，是高品質(zhì)高附加值農(nóng)產(chǎn)品的首選投入品。筆者選用了3種生物農(nóng)藥進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，填補(bǔ)了同類(lèi)研究較少采用生物農(nóng)藥的空白。結(jié)果表明丁子香酚抑菌活性最好，僅次于多菌靈、氟硅唑和腐霉利3種化學(xué)殺菌劑;多抗霉素也有一定的防效，抑菌活性高于溴菌腈、菌核凈、中生菌素、噻呋酰胺和嘧霉胺等化學(xué)殺菌劑，兩者可作為防治辣椒炭疽病的首選或輪換藥劑。如果長(zhǎng)期使用單一殺菌劑，選擇壓力極易導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性，為有效延長(zhǎng)不同類(lèi)型殺菌劑在寄主上的使用時(shí)間，降低抗藥性產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)，生產(chǎn)中應(yīng)依據(jù)殺菌劑的持效期及作用類(lèi)型確定使用策略，不同類(lèi)別殺菌劑輪流使用，避免長(zhǎng)期、多次使用單一藥劑或作用機(jī)理相同的藥劑。

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