池艷艷 陳炳旭 全林發(fā) 董易之 徐淑

摘要 為評價(jià)新型殺螨劑30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨的活性，對荔枝葉螨的不同螨態(tài)進(jìn)行了室內(nèi)活性測定及田間藥效試驗(yàn)。室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明：采用玻片浸漬法和浸葉法測得的30%乙唑螨腈懸浮劑對成螨的LC50分別為0.977和0.248 mg/L，其毒力分別是對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的0.50和7.33倍;分別采用浸葉法和浸葉碟法測定了30%乙唑螨腈懸浮劑對幼若螨和卵的活性，LC50分別為0.094和0.380 mg/L，活性分別為對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的4.07和98.40倍。處理24 h后，相同濃度的30%乙唑螨腈懸浮劑和43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑對荔枝葉螨的產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)無明顯差異，但處理48 h及72 h后，30%乙唑螨腈懸浮劑的產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)顯著高于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑。田間防效試驗(yàn)結(jié)果表明：30%乙唑螨腈懸浮劑稀釋4 500倍藥后1 d防效達(dá)73%以上，藥后20 d防效仍維持在90%以上，30%乙唑螨腈懸浮劑防治荔枝葉螨的速效性和持效性均優(yōu)于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑。

關(guān)鍵詞 30%乙唑螨腈懸浮劑; 43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑; 荔枝葉螨; 生物活性; 田間防效

中圖分類號： S 436.67

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2018311

荔枝葉螨Oligonychus litchii屬葉螨科、小爪螨屬，寄主植物有21科34種，如荔枝、龍眼、蓮霧等，于1989年由Lo &Ho首次報(bào)道[1]。荔枝葉螨個(gè)體小、發(fā)育歷期短、繁殖快、一年發(fā)生多代，其主要為害葉片，吸取汁液可導(dǎo)致荔枝葉片出現(xiàn)白色斑點(diǎn)，嚴(yán)重時(shí)造成葉片變褐或提前脫落。近年來，在荔枝主產(chǎn)區(qū)荔枝葉螨的為害逐年加重，并有可能成為當(dāng)?shù)乩笾@的主要害蟲[2]。

乙唑螨腈[SYP-9625，（Z）-2-（4-叔丁基苯基）-2-氰基-1-（1-乙基-3-甲基吡唑-5-基）乙烯基-2，2-二甲基丙酸酯]是沈陽中化農(nóng)藥化工有限公司以腈吡螨酯為先導(dǎo)化合物，通過大量結(jié)構(gòu)修飾研究出來的丙烯腈類殺螨劑，2015年在我國獲得臨時(shí)登記，2017年以商品名“寶卓”（30%乙唑螨腈懸浮劑）投入市場[34]。據(jù)研究報(bào)道乙唑螨腈水解后對線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ表現(xiàn)出優(yōu)異的抑制作用，并對非靶標(biāo)生物如蜜蜂、鳥、魚、家蠶低毒[5]。目前，乙唑螨腈殺螨活性的研究主要集中在其對朱砂葉螨、二斑葉螨和柑橘全爪螨的室內(nèi)毒力及田間防效方面，對荔枝葉螨的相關(guān)研究尚未見報(bào)道。本研究測定了30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨不同螨態(tài)的生物活性，觀察了其對雌成螨產(chǎn)卵的抑制作用，并通過田間藥效試驗(yàn)明確了30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨的防效，以期為該藥劑的科學(xué)合理使用提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試?yán)笾θ~螨采自廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所大豐試驗(yàn)基地，在溫度（25±1）℃、相對濕度70%～80%、光周期L∥D=14 h∥10 h的養(yǎng)蟲室內(nèi)用新鮮干凈的荔枝葉片飼養(yǎng)多代。

供試藥劑：30%乙唑螨腈（SYP-9625）懸浮劑（SC），沈陽科創(chuàng)化學(xué)品有限公司;43%聯(lián)苯肼酯（bifenazate）懸浮劑（SC），麥德梅農(nóng)業(yè)解決方案有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 對雌成螨的生物活性測定

1.2.1.1 玻片浸漬法[67]

將雙面膠剪成2～3 cm長，貼在載玻片（長度76.2 mm，寬度25.4 mm，厚度1～1.2 mm）的一端，用毛筆挑選大小一致、體色鮮艷、行動活潑的雌成螨，將其背部粘在雙面膠上（注意：不要粘住螨足、螨須和口器），每片粘30頭。在養(yǎng)蟲室內(nèi)放置4 h后，用雙目解剖鏡剔除死亡或不活潑個(gè)體。將帶螨玻片的一端浸入配制好的系列藥液中10 s，取出后用吸水紙吸干螨體及周圍多余的藥液。置于溫度（25±1）℃、相對濕度70%～80%、光周期L∥D=14 h∥10 h培養(yǎng)箱中，24 h后用雙目解剖鏡檢查死亡數(shù)，計(jì)算死亡率。

1.2.1.2 浸葉法[8]

將新鮮、干凈的荔枝葉片浸入配制好的系列藥液中10 s，晾干后葉片周圍包一層脫脂棉，放置于鋪有濕海綿的培養(yǎng)皿中。每片葉接種20頭雌成螨，待螨體穩(wěn)定后在雙目解剖鏡下檢查螨數(shù)，不足者補(bǔ)齊。將處理后的荔枝葉片置于溫度（25±1）℃、相對濕度70%～80%、光周期L∥D=14 h∥10 h的培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)，24 h后檢查死亡數(shù)，計(jì)算死亡率。

1.2.2 對幼若螨和卵的生物活性測定

幼若螨測定方法：每片葉接入20頭幼若螨，其余與1.2.1.2相同。

卵測定方法：參照Keena等[9]的浸葉碟法并加以改進(jìn)。將新鮮、干凈的荔枝葉片放置于鋪有濕海綿的培養(yǎng)皿中，再將40頭雌成螨接入葉片，讓其產(chǎn)卵24 h，然后剔除雌成螨，將有卵的葉片浸入配制好的系列藥液中10 s，晾干后放回培養(yǎng)皿中，在雙目解剖鏡下檢查卵量。將處理后的荔枝葉片置于溫度（25±1）℃、相對濕度70%～80%、光周期L∥D=14 h∥10 h的培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。每處理重復(fù)3次，每次重復(fù)約40粒卵。待空白對照卵全部孵化時(shí)檢查孵化數(shù)、未孵化數(shù)，計(jì)算孵化率。

1.2.3 對雌成螨產(chǎn)卵的抑制作用

將浸葉法測得的30%乙唑螨腈懸浮劑和43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑對荔枝葉螨雌成螨的1/4 LC50、1/2 LC50和LC50（乙唑螨腈濃度為0.062 5、0.125、0.25 mg/L，聯(lián)苯肼酯濃度為0.5、1、2 mg/L）作為試驗(yàn)濃度，試驗(yàn)步驟同1.2.1.2，統(tǒng)計(jì)24、48和72 h的總產(chǎn)卵量，計(jì)算產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)。

1.2.4 對荔枝葉螨的田間藥效試驗(yàn)

試驗(yàn)在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所白云基地進(jìn)行，荔枝品種為‘糯米糍，種植期5年，株高2 m，施藥時(shí)荔枝葉螨發(fā)生嚴(yán)重。田間藥效試驗(yàn)設(shè)計(jì)參照《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則》[10]進(jìn)行，試驗(yàn)共設(shè)4個(gè)處理：30%乙唑螨腈懸浮劑6 000倍、4 500倍和3 000倍、43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑2 500倍和空白對照，每處理4次重復(fù)，共計(jì)20個(gè)小區(qū)。每個(gè)小區(qū)2株荔枝樹，每株東、南、西、北、中5個(gè)方位各標(biāo)記同一梢期的3片葉，藥前調(diào)查葉片上葉螨基數(shù)，藥后1、3、10、15和20 d調(diào)查活螨數(shù)。每次調(diào)查時(shí)觀察藥劑對荔枝植株、葉片和試驗(yàn)區(qū)內(nèi)非靶標(biāo)生物的影響，評價(jià)藥劑對荔枝和非靶標(biāo)生物的影響。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法

采用SPSS 16.0軟件對不同螨態(tài)的生物活性測定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;用鄧肯氏新復(fù)極差法對產(chǎn)卵抑制率和田間防效進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 對雌成螨的毒力

采用玻片浸漬法和浸葉法測定了30%乙唑螨腈懸浮劑和43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑對荔枝葉螨雌成螨的毒力，試驗(yàn)結(jié)果（表1）表明：玻片浸漬法測得的30%乙唑螨腈懸浮劑和43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑對成螨的24 h LC50分別為0.977、0.491 mg/L，浸葉法測得的兩藥劑24 h LC50分別為0.248、1.818 mg/L，兩種方法測得的30%乙唑螨腈懸浮劑活性分別是43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的0.50和7.33倍。玻片浸漬法主要測定的是藥劑對成螨的觸殺活性，浸葉法主要測定的是藥劑的胃毒活性，由以上試驗(yàn)結(jié)果可知雖然30%乙唑螨腈懸浮劑對成螨的觸殺活性弱于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑，但胃毒活性遠(yuǎn)強(qiáng)于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑。玻片浸漬法和浸葉法測得的30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨雌成螨的LC50均小于1 mg/L，表明30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨雌成螨具有較高的殺螨活性，尤其是胃毒活性。

2.2 對幼若螨和卵的毒力

分別采用浸葉法和浸葉碟法測定了30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨幼若螨和卵的活性，試驗(yàn)結(jié)果詳見表2。從表2可知：30%乙唑螨腈懸浮劑對幼若螨的LC50僅為0.094 mg/L，對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的LC50為0.383 mg/L;30%乙唑螨腈懸浮劑對卵的LC50為0.380 mg/L，對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的LC50為37.391 mg/L。30%乙唑螨腈懸浮劑對幼若螨和卵的活性分別是對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的4.07倍和98.40倍，可見30%乙唑螨腈懸浮劑對幼若螨和卵的毒力顯著高于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑，尤其是殺卵毒力。

2.3 對雌成螨產(chǎn)卵的抑制作用

30%乙唑螨腈懸浮劑和43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑不同濃度處理后荔枝葉螨雌成螨的產(chǎn)卵量和產(chǎn)卵抑制率詳見圖1和表3。30%乙唑螨腈懸浮劑和43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑處理24 h后雌成螨的產(chǎn)卵量相近，稍低于空白對照;30%乙唑螨腈懸浮劑處理48 h和72 h后的產(chǎn)卵量基本與24 h相近，而43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑處理后的產(chǎn)卵量大量增加，但仍少于空白對照（圖1）。

從表3中可見，經(jīng)1/4 LC50、1/2 LC50和LC50 30%乙唑螨腈懸浮劑處理荔枝葉螨雌成螨24 h后產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)分別為9.80%、15.69%、43.14%和0.05、0.09、0.28，略低于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑，后者3個(gè)濃度處理24 h后的產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)分別為19.61%、35.29%、52.94%和0.11、0.21、0.36。隨著處理時(shí)間的延長，30%乙唑螨腈懸浮劑處理后產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)大幅升高，部分處理顯著高于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑對應(yīng)濃度的產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)。這表明隨著試驗(yàn)濃度的升高和處理時(shí)間的延長，兩種藥劑對荔枝葉螨的產(chǎn)卵抑制率和產(chǎn)卵抑制指數(shù)都呈上升趨勢，但30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨雌成螨的產(chǎn)卵抑制作用顯著高于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑。

2.4 對荔枝葉螨的田間防效

30%乙唑螨腈懸浮劑、43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑對荔枝葉螨的田間防效試驗(yàn)結(jié)果見表4。藥后1 d，30%乙唑螨腈懸浮劑稀釋6 000、4 500、3 000倍防效分別為66.53%、73.12%和84.77%，對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑稀釋2 500倍防效為68.93%，與乙唑螨腈中低濃度處理無顯著差異。藥后3 d所有處理的防效均有所上升，藥后10 d乙唑螨腈中高濃度處理和聯(lián)苯肼酯的防效達(dá)最高值（100%），藥后15 d乙唑螨腈中高濃度處理的防效仍保持在100%，聯(lián)苯肼酯防效有所下降（96.84%）;藥后20 d乙唑螨腈中高濃度處理防效仍維持在100%，聯(lián)苯肼酯防效持續(xù)下降至89.16%。在試驗(yàn)中觀察到各處理小區(qū)未有藥害產(chǎn)生和藥劑對荔枝園內(nèi)的非靶標(biāo)生物無明顯影響。綜上所述，30%乙唑螨腈懸浮劑防治荔枝葉螨時(shí)，速效性優(yōu)于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑，持效期可達(dá)20 d，長于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑，且對荔枝樹和非靶標(biāo)生物都較為安全。

3 結(jié)論與討論

本研究表明，30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨不同螨態(tài)均具有較好的殺螨活性。通過玻片浸漬法和浸葉法測定的30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨雌成螨的LC50分別為0.977、0.248 mg/L，對幼若螨和卵的LC50分別為0.094和0.380 mg/L。本結(jié)果與宋玉泉等[11]、李斌等[4]報(bào)道的結(jié)果基本相近，但與宮亞軍等[5]的研究結(jié)果有較大差異，這與試驗(yàn)靶標(biāo)、試驗(yàn)方法等多種因素有關(guān)。

田間試驗(yàn)表明，30%乙唑螨腈懸浮劑稀釋3 000倍藥后1 d防效達(dá)84.77%，防效明顯高于對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑，直至藥后20 d防效仍維持在90%以上，其防治荔枝葉螨的速效性和持效性均優(yōu)于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑。該結(jié)果與馮聰?shù)萚12]、宮亞軍等[5]、周曉肖等[13]、劉少武等[14]的結(jié)果相似。

室內(nèi)試驗(yàn)表明，30%乙唑螨腈懸浮劑對荔枝葉螨雌成螨、幼若螨和卵具有較強(qiáng)的活性，對雌成螨產(chǎn)卵的抑制作用強(qiáng)于對照藥劑43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑;田間試驗(yàn)表明，30%乙唑螨腈懸浮劑速效性和持效性均優(yōu)于43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑。綜合室內(nèi)活性試驗(yàn)數(shù)據(jù)和田間防效結(jié)果，30%乙唑螨腈懸浮劑防治荔枝葉螨的活性優(yōu)于聯(lián)苯肼酯，可作為防治荔枝葉螨的藥劑推廣使用。此外，本研究通過玻片浸漬法和浸葉法兩種方法測定了藥劑的觸殺和胃毒活性，初步探明乙唑螨腈的觸殺活性弱于聯(lián)苯肼酯，但胃毒活性強(qiáng)于聯(lián)苯肼酯。乙唑螨腈是我國自主研發(fā)的新型殺螨劑，目前合成路徑、殺螨活性、田間藥效以及有效成分含量測定的分析方法等均有研究報(bào)道，但其作用方式、作用機(jī)理等方面有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1] LO P K， HO C C.The spider mite family tetranychidae in Taiwan I.The genus Oligonychus [J]. Journal of Taiwan Museum， 1989， 42： 5976.

[2] 徐淑，余姚，陳凱歌，等.5種殺螨劑對荔枝葉螨的毒力測定及田間藥效[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（14）：8385.

[3] 趙平.殺螨劑新產(chǎn)品少 創(chuàng)制產(chǎn)品乙唑螨腈上市將迎市場機(jī)遇[J].農(nóng)藥市場信息，2017（6）：38.

[4] 李斌，于海波，羅艷梅，等.乙唑螨腈的合成及其殺螨活性[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2016，15（6）：1516.

[5] 宮亞軍，陳金翠，姜傢耀，等.新型殺螨劑乙唑螨腈對二斑葉螨的毒力及田間防效[J].農(nóng)藥，2017，56（8）：561563.

[6] DAVID M， PAMELA M. Inhibition of octopamines-stimulated adenylate cyclase activity in two spotted mites by dicofol and related diphenylcarbinol acaricides [J].Pesticide Biochemistry and Physiology， 1993， 46： 228235.

[7] BUSVINE J R.Recommended methods for measurement of pest resistance to pesticide [S]. FAO Plant Production and Plant Protection Paper， 1980，21： 4954.

[8] 趙建周， 劇正理. 殺螨劑生物測定的三種新方法[J]. 植物保護(hù)， 1994， 20（4）： 4445.

[9] KEENA M A， GRAFTON-CARDWELL E， GRANETT J. Variability in response of laboratory-reared and field-collected populations of Tetranychus spp. （Acari： Tetranychidae） to hexythiazox[J]. Journal of Entomology， 1991， 84（4）： 11281134.

[10]農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.GB/T 17980.112000，農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則（一）殺螨劑防治桔全爪螨[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2000：4345.

[11]宋玉泉，馮聰，劉少武，等.新型殺螨劑乙唑螨腈的生物活性與應(yīng)用[J].農(nóng)藥，2017，56（9）：628631.

[12]馮聰，宋玉泉，劉少武，等.新型殺螨劑乙唑螨腈防治柑橘紅蜘蛛田間應(yīng)用[J].農(nóng)藥，2017，56（10）：712714.

[13]周曉肖，江景勇，邱莉萍，等.乙唑螨腈對草莓二斑葉螨的控制作用[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，58（11）：20032005.

[14]劉少武，宋玉泉，張俊龍，等.30%乙唑螨腈懸浮劑防治不同害螨田間藥效試驗(yàn)[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2018，17（3）：1821.

（責(zé)任編輯：楊明麗）