王曉琴

【中圖分類號】R766.1 ? ? ?【文獻標(biāo)識碼】A ? ? 【文章編號】2095-6851（2019）08-253-01

1 引言

隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，醫(yī)學(xué)和治療技術(shù)的更新，各種干預(yù)措施的采用[1]，抗生素的廣泛使用，越來越多的耐藥菌株，細菌耐藥機制日益復(fù)雜，以及免疫功能下降和感染增加的各種原因，臨床醫(yī)學(xué)對細菌學(xué)檢測提出了更為迫切的要求[2]，臨床細菌學(xué)檢測方法發(fā)展迅速。本文簡要介紹了以下問題。

2 臨床使用的先進實驗室設(shè)備

不同自動化水平的臨床細菌學(xué)檢測設(shè)備不斷進入實驗室，使得相當(dāng)數(shù)量的檢測項目實現(xiàn)了半自動或自動化[3]，這不僅可以提高質(zhì)量控制，提高病原體診斷的準確性，還可以縮短結(jié)果的返回時間。進一步滿足了臨床需要。主要有以下幾個種類。

2.1 血液培養(yǎng)儀

血液培養(yǎng)裝置的性能逐漸提高，實現(xiàn)了從手動到半自動到全自動的升級過程。血液培養(yǎng)儀的原理-PH值顯色法，在檢測系統(tǒng)的底部含有彩色傳感器， 用于分離培養(yǎng)基和彩色傳感器的半透硅膜，僅有的CO2可以通過硅膜。當(dāng)微生物在血液培養(yǎng)瓶內(nèi)增殖時，放出的CO2浸透到傳感器內(nèi)，被水飽和，產(chǎn)生氫離子（H+），傳感器的pH值變化， 結(jié)果，傳感器的顏色從灰色變?yōu)辄S色，就可計算出有無微生物生長。除血樣外，其他標(biāo)本也可以用血液培養(yǎng)儀培養(yǎng)，大大縮短了報告時間[4]。

2.2 試劑盒

該工具包為沒有昂貴進口儀器和設(shè)備的中小型實驗室提供了強大的細菌學(xué)檢驗工具。此外，一些經(jīng)過改良的特殊培養(yǎng)基也可以為某些特殊的細菌提供培養(yǎng)條件。

2.3 細菌自動識別儀及抗菌藥敏測試儀

自動化細菌鑒定儀器和抗菌藥敏試驗者正在逐步進入實驗室。細菌鑒定儀器可以增加細菌鑒定的多樣性，并提供準確的病原體鑒定。敏感性測試儀為合理使用抗生素提供了可靠的參考。此外，它在監(jiān)測耐藥菌株的出現(xiàn)和流行以及提高臨床癥狀的生物檢測水平方面發(fā)揮著重要作用。

2.4 質(zhì)譜

臨床細菌學(xué)檢驗鑒定儀器現(xiàn)在最新的是采用質(zhì)譜進行的，與在完全自動化的微生物鑒定系統(tǒng)中分析細胞脂肪酸組成一樣，質(zhì)譜分析需要專門的數(shù)據(jù)分析和特定細菌的專家系統(tǒng)。將蛋白質(zhì)圖譜與在菌株文庫中收集的細菌蛋白指紋圖譜進行比較。因此，它可以直接分析微生物的蛋白質(zhì)混合物，并具有廣泛的適應(yīng)性、準確性、靈敏度、特異性、快速鑒定、高通量和經(jīng)濟效益的優(yōu)點， 而且對微生物株的鑒定具有革命性意義。

3 分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展

3.1 聚合酶鏈反應(yīng)

聚合酶鏈反應(yīng)是一種高度敏感的生物技術(shù)，可以放大少于10種甚至一種病原體。一些學(xué)者斷言，基因擴增技術(shù)和基因探針技術(shù)將取代傳統(tǒng)的細菌培養(yǎng)，開辟微生物診斷和研究的新途徑，并為傳染病的病原學(xué)診斷帶來了良好的前景。

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的應(yīng)用也存在一些問題。首先，是污染問題。有些單位不具備進行聚合酶鏈反應(yīng)的條件而倉促投入運行，造成污染和誤導(dǎo)臨床診斷。其次，如何解決擴增產(chǎn)物的特異性問題。作為回應(yīng)，衛(wèi)生部不得不決定暫停聚合酶鏈式反應(yīng)的常規(guī)使用。目前，聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)已經(jīng)得到蓬勃的發(fā)展，在檢驗中發(fā)揮的作用也越來越大。一是放大和改進封閉狀態(tài)下放大產(chǎn)物的分析方法;另一種是將擴增產(chǎn)物與探針進行測序或雜交，以解決擴增產(chǎn)物的特異性問題。目前使用的技術(shù)包括微板核酸雜交，聚合酶鏈反應(yīng)點雜交和熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)。

3.2 細菌的分型方法

目前，臨床實驗室一般用于在病原細菌鑒定水平上診斷傳染病，但是對于流行病學(xué)調(diào)查，例如耐藥菌株的流行和感染，對醫(yī)院感染爆發(fā)的調(diào)查必須在亞型鑒定水平上進行。有許多細菌分型方法，如生化分型，細菌素分型，抗生素和重金屬分型，噬菌體分型，血清學(xué)分型和質(zhì)粒分析。近年來，用于細菌染色體片段多態(tài)性的脈沖場凝膠電泳已廣泛用于許多細菌類型中。

4 當(dāng)前細菌檢測中面臨的挑戰(zhàn)

4.1 密切與臨床的關(guān)系滿足臨床的迫切需求

臨床細菌學(xué)檢查應(yīng)符合臨床治療的迫切要求，即應(yīng)采取有效措施縮短報告時間。提高檢測結(jié)果的正確性，提升在細菌檢測中臨床治療的依賴性，才能獲得更好的檢測結(jié)果。目前，從采集標(biāo)本到確認細菌學(xué)檢驗的結(jié)果通常需要3-4天，其中一些需要很長時間，這使得及時的臨床治療變得困難。據(jù)統(tǒng)計，中國約有80%的住院患者使用抗生素，其中86%的患者根據(jù)自己的經(jīng)驗給予臨床醫(yī)生抗生素。也就是說，根據(jù)細菌抗生素敏感性試驗的結(jié)果，只有14%的患者是選擇抗生素的臨床醫(yī)生。原因是臨床醫(yī)生有自己的用藥習(xí)慣和治療經(jīng)驗，此外，臨床細菌學(xué)檢查不能為臨床醫(yī)生及時使用藥物提供參考。目前，各種細菌鑒定儀器和血液培養(yǎng)儀器正在逐步進入實驗室，但如何正確選擇和使用這些儀器仍存在許多問題。

4.2 臨床細菌檢驗結(jié)果的可靠性

可靠性是臨床細菌學(xué)檢查的終極目的，只有可靠的結(jié)果才能對解決患者的病情問題有所幫助。有許多因素會影響細菌檢測結(jié)果的可靠性，包括樣本的使用和標(biāo)本的運輸。分離培養(yǎng)技術(shù)、方法和鑒定方法。其中，人們往往注重培養(yǎng)和鑒定方法，但往往忽略了標(biāo)本的采集方法和質(zhì)量。目前，最嚴重的問題是標(biāo)本的損壞，因此確定受損樣本的質(zhì)量非常重要。上呼吸道分泌物中有17種細菌，它們是引起下呼吸道感染的常見細菌。因此，痰標(biāo)本應(yīng)在培養(yǎng)前用革蘭氏染色。細胞類型和細菌的存在在決定是培養(yǎng)還是保留標(biāo)本中起著質(zhì)量控制的作用。這減少了抗生素的誤診和濫用。

參考文獻：

[1]趙會晶，牛淼，呂永強.細菌學(xué)及血清學(xué)檢驗在布氏菌病診斷中應(yīng)用[J].臨床軍醫(yī)雜志，2018，46（6）：682-682.

[2]易毅.痰培養(yǎng)標(biāo)本采集處理方法改進對細菌學(xué)檢驗質(zhì)量的影響探討[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2017，21（17）：2246-2247.

[3]尹東梅.結(jié)核病診斷細菌學(xué)檢驗分析[J].臨床醫(yī)學(xué)研究與實踐，2017，2（02）：95-96.

[4]王輝，馬筱玲，寧永忠，等.細菌與真菌涂片鏡檢和培養(yǎng)結(jié)果報告規(guī)范專家共識[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2017，40（1）：17-30.