韓紅艷，王柯柯，王文獻(xiàn)，段曉菡，胡益聰，張 馳，閆 鑌

(1. 河南中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院、第三附屬醫(yī)院，鄭州 450008； 2. 中國(guó)人民解放軍信息工程大學(xué)，鄭州 450002)

間使穴為手厥陰心包經(jīng)經(jīng)穴，主要治療心胸、神志病、胃腑病證及經(jīng)脈循行部位病證[1]。腦功能磁共振功能成像技術(shù)(functional magnetic resonance image, fMRI)，能即時(shí)直觀地反應(yīng)接受刺激后大腦皮層高級(jí)功能活動(dòng)，在探索針刺及腧穴在中樞皮層功能區(qū)活動(dòng)規(guī)律方面具有重要科學(xué)價(jià)值[2-4]。低頻振幅比率(fractional amplitude of low frequency fluctuation, fALFF)算法是應(yīng)用fMRI技術(shù)檢測(cè)靜息態(tài)下局部腦組織代謝變化的方法，在針刺作用機(jī)制研究方面具有較大優(yōu)勢(shì)[5-6]。該試驗(yàn)對(duì)18名健康被試者左側(cè)間使穴進(jìn)行針刺前后fMRI掃描，特別對(duì)針刺后留針狀態(tài)和拔針狀態(tài)細(xì)化設(shè)置連續(xù)性時(shí)間序列，比較針刺該穴前后腦內(nèi)fALFF隨時(shí)間序列變化顯著的腦區(qū)，以期探索針刺間使穴的中樞響應(yīng)機(jī)制。

1 對(duì)象與方法

1．1 研究對(duì)象

18名健康志愿者(男10名，女8名)平均年齡(24.89±1.811)歲，身高(167.39±8.045)cm,體質(zhì)量(60.44±12.433)Kg。右利手，飲食規(guī)律，不嗜煙、酒、茶、咖啡等，睡眠正常，體型適中。既往無(wú)嚴(yán)重軀體病史、腦部外傷史、精神病史、藥物依賴史及酒精成癮史，近期無(wú)嚴(yán)重感染、手術(shù)等，頭顱MRI常規(guī)掃描未發(fā)現(xiàn)任何器質(zhì)性病變。掃描前1周由同一專業(yè)針灸師通過(guò)針刺應(yīng)答排除無(wú)針刺反應(yīng)者或過(guò)度針刺反應(yīng)者。

受試者試驗(yàn)前均簽署知情同意書(shū)，試驗(yàn)方案獲河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批準(zhǔn)號(hào)2017HL-020)，且通過(guò)國(guó)家臨床試驗(yàn)注冊(cè)(注冊(cè)號(hào)ChiCTR-OOC-17011452)。

1．2 fMRI掃描

1.2.1 掃描設(shè)備及參數(shù) 采用河南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院SIEMENS SKYRA 3.0T MRI設(shè)備。T1結(jié)構(gòu)像采用T1-mprage-tra-p2-iso-1.0序列，F(xiàn)OV=230 mm×230 mm，Matrix=256×256，Slices=104，Slice thickness=1.3 mm，Gap=0.7 mm，TR=2200 ms，TE=2.48 ms，持續(xù)時(shí)間5 min 06 sec。功能像采用ep2d-bold-moco-p2-2 mm序列，F(xiàn)OV=192 mm×192 mm，Matrix=64×64，Slices=35，Slice thickness=3 mm，Gap=0.8 mm，TR=2000 ms，TE=30 ms，采集次數(shù)120次，掃描時(shí)間4 min 08 sec。

1.2.2 掃描流程 被試者在MRI檢查中心休息室安靜休息20 min，期間由針刺操作者在所測(cè)試被試者左側(cè)前臂標(biāo)記間使穴位置，穴位定位參照全國(guó)中醫(yī)藥院校規(guī)劃教材《針灸學(xué)》[1]。

被試者休息后步入掃描室內(nèi)，被試者耳內(nèi)被塞入一次性消音耳塞，標(biāo)準(zhǔn)頭部線圈固定后安靜仰臥于掃描床，掃描前被告知在掃描過(guò)程中盡量保持清醒、閉目、不執(zhí)行任何任務(wù)、不做任何動(dòng)作的靜止?fàn)顟B(tài)。

首先進(jìn)行T1結(jié)構(gòu)像掃描，對(duì)無(wú)腦結(jié)構(gòu)異常者行第1次靜息態(tài)功能像掃描(Rest1，R1)。

R1結(jié)束后，將被試者退出掃描倉(cāng)暫停掃描，針刺操作者步入掃描室內(nèi)對(duì)被試者進(jìn)行針刺操作，常規(guī)消毒后使用特制脫磁針灸針(0.3 mm×40 mm)，在被試者左側(cè)前臂間使穴處給予針刺刺激，針刺操作者感覺(jué)手下得氣，被試者訴有酸、麻、沉、脹等針感后，采用平補(bǔ)平瀉手法均勻捻轉(zhuǎn)，捻轉(zhuǎn)幅度±180°，頻率60次/min，操作1 min后將被試者送入掃描倉(cāng)繼續(xù)掃描。

被試者留針期間分別進(jìn)行R2、R3、R4、R5時(shí)間序列掃描，拔針后進(jìn)行R6、R7時(shí)間序列掃描，各序列掃描時(shí)間均為4 min 08 sec。

圖1 fMRI掃描流程圖

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用MRI Convert 2.0、SPM8對(duì)轉(zhuǎn)化后圖像進(jìn)行預(yù)處理，18例被試者各序列頭動(dòng)均未超過(guò)1.5 mm，數(shù)據(jù)合格，全部進(jìn)入fALFF分析。分別對(duì)每個(gè)被試者R1至R7序列的fALFF進(jìn)行單樣本t檢驗(yàn)，選擇t>5.0438、P<0.0001、簇?cái)?shù)值≥100個(gè)體素的團(tuán)塊為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的fALFF活躍腦區(qū)。

2 結(jié)果

2.1 純靜息態(tài)(R1)腦內(nèi)fALFF單樣本t檢驗(yàn)結(jié)果

表1圖2(R1)顯示，該狀態(tài)fALFF減弱腦區(qū)為左側(cè)小腦前葉，增強(qiáng)腦區(qū)為左側(cè)扣帶后回、額中回，右側(cè)額內(nèi)側(cè)回、角回、枕中回。

2.2 針刺狀態(tài)(R2、R3、R4、R5)腦內(nèi)fALFF單樣本t檢驗(yàn)結(jié)果

表2圖2(R2-R5)顯示，R2狀態(tài)內(nèi)fALFF增強(qiáng)腦區(qū)為左側(cè)額中回、額上回，右側(cè)額內(nèi)側(cè)回、額中回、額上回、緣上回；R3狀態(tài)內(nèi)fALFF增強(qiáng)腦區(qū)為雙側(cè)楔前葉，右側(cè)枕中回、頂下小葉、緣上回，左側(cè)額中回、額上回、額內(nèi)側(cè)回；R4狀態(tài)內(nèi)fALFF減弱腦區(qū)為右側(cè)小腦后葉，增強(qiáng)腦區(qū)為雙側(cè)楔前葉、左側(cè)距狀回、枕中回、額上回、額中回；R5狀態(tài)內(nèi)fALFF增強(qiáng)腦區(qū)為左側(cè)枕中回，右側(cè)楔前葉、額上回、額中回、額內(nèi)側(cè)回、緣上回。

2.3 拔針后(R6、R7)腦內(nèi)fALFF單樣本t檢驗(yàn)結(jié)果

表3圖2(R6-R7)顯示，R6狀態(tài)內(nèi)fALFF增強(qiáng)腦區(qū)為雙側(cè)楔前葉，左側(cè)額上回、額中回、額內(nèi)側(cè)回、枕中回，右側(cè)額上回；R7狀態(tài)內(nèi)fALFF增強(qiáng)為雙側(cè)楔前葉、左側(cè)扣帶后回、額上回、額中回、額內(nèi)側(cè)回，右側(cè)額上回、額內(nèi)側(cè)回。

注：圖中藍(lán)色區(qū)域?yàn)閒ALFF減弱區(qū)域，紅色區(qū)域?yàn)閒ALFF增強(qiáng)區(qū)域。圖中顯示為t>5.0438、P<0.0001、簇?cái)?shù)值≥100個(gè)體素團(tuán)塊圖2 R1-R7各時(shí)間序列內(nèi)針刺狀態(tài)fALFF顯著變化腦區(qū)圖(R1為純靜息態(tài)，R2-R5為針刺后留針期間各時(shí)間序列，R6-R7為拔針后各時(shí)間序列)

時(shí)間序列峰值點(diǎn)t值峰值點(diǎn)坐標(biāo)XYZ總簇?cái)?shù)大小(mm3)變化腦區(qū)簇?cái)?shù)值腦區(qū)R1-15.7362-3-39-338858697左側(cè)小腦前葉18.8607-12-57122671268左側(cè)扣帶后回9.04833542116499右側(cè)額內(nèi)側(cè)回10.8458-393930343234左側(cè)額中回10.828439-782714541右側(cè)角回39右側(cè)枕中回

注:表中顯示為t>5.0438、P<0.0001、簇?cái)?shù)值≥100個(gè)體素團(tuán)塊

表2 R2-R5序列內(nèi)fALFF顯著變化腦區(qū)比較(n=18)

注:表中顯示為t>5.0438、P<0.0001、簇?cái)?shù)值≥100個(gè)體素團(tuán)塊

表3 R6-R7序列內(nèi)fALFF顯著變化腦區(qū)比較(n=18)

注:表中顯示為t>5.0438、P<0.0001、簇?cái)?shù)值≥100個(gè)體素的團(tuán)塊

3 討論

3.1 針刺間使穴前后各時(shí)間序列fALFF顯著變化腦區(qū)

該試驗(yàn)中針刺前純靜息態(tài)(R1)fALFF減弱腦區(qū)為左側(cè)小腦前葉，增強(qiáng)腦區(qū)為左側(cè)扣帶后回、額中回，右側(cè)額內(nèi)側(cè)回、角回和枕中回。針刺間使穴得氣后，R2序列內(nèi)fALFF變化區(qū)域與R1比較，右側(cè)額內(nèi)側(cè)回正激活持續(xù)增強(qiáng)(對(duì)比峰值點(diǎn)t值和簇?cái)?shù)值，下同)，左側(cè)額中回延續(xù)R1序列正激活狀態(tài)；僅R2序列內(nèi)，左側(cè)角回、右側(cè)額中回、緣上回和雙側(cè)額上回出現(xiàn)正激活。R3序列內(nèi)fALFF變化區(qū)域與R1比較，右側(cè)枕中回、緣上回和左側(cè)額中回正激活增強(qiáng)，與R2比較，左側(cè)額上回正激活增強(qiáng)，僅R3序列內(nèi)，雙側(cè)楔前葉、左側(cè)額內(nèi)側(cè)回和右側(cè)頂下小葉出現(xiàn)正激活。R4序列內(nèi)fALFF變化區(qū)域與R3比較，雙側(cè)楔前葉正激活持續(xù)增強(qiáng)，左側(cè)額中回與R1-R3比較，左側(cè)額上回與R2-R3比較，正激活程度無(wú)顯著變化，僅R4序列內(nèi)右側(cè)小腦后葉為負(fù)激活，左側(cè)枕中回為正激活。R5序列內(nèi)fALFF變化區(qū)域與R2-R4比較右側(cè)楔前葉正激活持續(xù)增強(qiáng)，與R4序列比較左側(cè)枕中回正激活持續(xù)增強(qiáng)，與R2序列比較右側(cè)額中回和右側(cè)額內(nèi)側(cè)回正激活無(wú)顯著變化，右側(cè)額上回正激活有較弱增強(qiáng)，右側(cè)緣上回與R2比較正激活無(wú)顯著變化，與R3比較正激活減弱。拔針后R6序列內(nèi)fALFF變化區(qū)域與R3-R4比較左側(cè)楔前葉和左側(cè)額上回正激活持續(xù)增強(qiáng)，與R3-R5比較右側(cè)楔前葉正激活持續(xù)增強(qiáng)，與R4-R5比較左側(cè)枕中回正激活持續(xù)增強(qiáng)，與R3比較左側(cè)額內(nèi)側(cè)回正激活增強(qiáng)，左側(cè)額中回與R1-R4比較正激活程度無(wú)顯著變化。R7序列內(nèi)fALFF變化區(qū)域與R3、R4、R6比較左側(cè)楔前葉正激活持續(xù)增強(qiáng)，與R3-R6比較右側(cè)楔前葉正激活持續(xù)增強(qiáng)，與R6比較雙側(cè)額上回正激活減弱，與R3、R5比較左側(cè)額內(nèi)側(cè)回正激活減弱，與R1、R3、R5比較右側(cè)額內(nèi)側(cè)回正激活減弱，左側(cè)額中回與R1-R4、R6比較正激活無(wú)顯著變化。

3.2 針刺支溝穴對(duì)額上回、額中回、額內(nèi)側(cè)回fALFF時(shí)變效應(yīng)的影響

本試驗(yàn)中，雙側(cè)額上回fALFF變化表現(xiàn)為：左側(cè)額上回在留針12min24sec內(nèi)隨時(shí)間序列正激活持續(xù)性增強(qiáng)，右側(cè)額上回在留針4min08sec內(nèi)和12min24sec至16min32sec內(nèi)表現(xiàn)為無(wú)顯著變化的正激活，拔針后雙側(cè)額上回正激活均較留針期間有所減弱，且在拔針8min16sec內(nèi)正激活程度隨時(shí)間序列逐漸減弱，說(shuō)明針刺該穴對(duì)健康人腦內(nèi)雙側(cè)額上回fALFF產(chǎn)生較穩(wěn)定正激活效應(yīng)，且在拔針后延續(xù)該效應(yīng)。該試驗(yàn)中左側(cè)額中回fALFF在針刺前、留針12min24sec內(nèi)及拔針8min16sec內(nèi)正激活無(wú)顯著變化，右側(cè)額中回fALFF在留針4min08sec內(nèi)和12min24sec至16min32sec內(nèi)表現(xiàn)為隨時(shí)間序列逐漸增強(qiáng)的正激活，右側(cè)額內(nèi)側(cè)回在針刺前及留針4min08sec內(nèi)和12min24sec至16min32sec內(nèi)均為正激活，留針期間激活程度較針刺前隨時(shí)間序列增強(qiáng)；左側(cè)額內(nèi)側(cè)回在留針8min16sec至16min32sec內(nèi)呈漸弱的正激活，拔針4min08sec至8min16sec內(nèi)，雙側(cè)額內(nèi)側(cè)回正激活較留針期間減弱。說(shuō)明針刺該穴對(duì)健康人腦內(nèi)左側(cè)額中回fALFF正激活程度在針刺前、留針期間和拔針后隨時(shí)間序列無(wú)顯著變化，右側(cè)額中回則在留針期間產(chǎn)生間斷性正激活效應(yīng)；右側(cè)額內(nèi)側(cè)回在針刺前、留針期間正激活隨時(shí)間序列逐漸增強(qiáng)，拔針后其正激活效應(yīng)顯著降低；左側(cè)額內(nèi)側(cè)回僅在留針期間產(chǎn)生間斷性較強(qiáng)正激活效應(yīng)。

額上回位于前額葉上部，參與多項(xiàng)認(rèn)知任務(wù)和運(yùn)動(dòng)控制任務(wù)，該區(qū)域異?？赡鼙憩F(xiàn)為不能有效而準(zhǔn)確地完成上述任務(wù)[7]。同時(shí)，額上回通過(guò)其各亞區(qū)與額中回、額下回和額內(nèi)側(cè)回均存在有解剖連接和功能聯(lián)系，共同參與語(yǔ)言、閱讀、情感認(rèn)知和軀體運(yùn)動(dòng)等功能[8]，推測(cè)針刺間使穴后雙側(cè)額上回、額中回和額內(nèi)側(cè)回在留針期間和拔針后均表現(xiàn)為一致性較強(qiáng)的正激活效應(yīng)，正是基于額上回與額中回、額內(nèi)側(cè)回上述密切關(guān)系。

3.3 針刺支溝穴對(duì)雙側(cè)楔前葉、枕中回和右側(cè)緣上回fALFF時(shí)變效應(yīng)的影響

楔前葉位于大腦頂葉內(nèi)側(cè)、后中皮質(zhì)背側(cè)部分，與軀體感覺(jué)皮質(zhì)、視覺(jué)皮質(zhì)、扣帶后回和壓后皮質(zhì)緊密相連；枕中回主要參與語(yǔ)言、注意、情緒和記憶等神經(jīng)心理活動(dòng)視覺(jué)信息的收集和處理，并完成與其他皮質(zhì)信息交換；緣上回為語(yǔ)言運(yùn)用中樞，主管精細(xì)的語(yǔ)言協(xié)調(diào)功能，與語(yǔ)言加工調(diào)控具有密切關(guān)系。本試驗(yàn)中上述腦區(qū)fALFF主要表現(xiàn)為，左側(cè)楔前葉在留針4min08sec至8min16sec內(nèi)和拔針8min16sec內(nèi)呈隨時(shí)間序列漸增強(qiáng)正激活，右側(cè)楔前葉在留針4min08sec至16min32sec內(nèi)及拔針8min16sec內(nèi)呈隨時(shí)間序列漸增強(qiáng)正激活；左側(cè)枕中回留針12min24sec至16min32sec內(nèi)隨時(shí)間序列正激活效應(yīng)變化不明顯，拔針后4min08sec內(nèi)正激活減弱，右側(cè)枕中回在針刺前及留針4min08sec至8min16sec內(nèi)均為正激活，留針期間激活程度較針刺前隨時(shí)間序列增強(qiáng)；右側(cè)緣上回在留針8min12sec內(nèi)正激活隨時(shí)間序列增強(qiáng)，12min24sec至16min32sec內(nèi)正激活較前減弱。表明針刺間使穴對(duì)健康人腦內(nèi)雙側(cè)楔前葉fALFF在留針期間及拔針后均產(chǎn)生隨時(shí)間系列顯著增強(qiáng)的正激活效應(yīng)，右側(cè)枕中回在針刺前、留針期間正激活隨時(shí)間序列顯著增強(qiáng)，左側(cè)枕中回在拔針后較留針期間正激活減弱，右側(cè)緣上回在留針期間正激活減弱。

4 結(jié)束語(yǔ)

間使穴臨床主要治療心痛、心悸等心系病證，胃痛、嘔吐等胃系病證，神志及情志病證、外經(jīng)經(jīng)脈循行部位病證。上述分析表明，與針刺前比較，針刺后腦內(nèi)fALFF變化區(qū)域主要體現(xiàn)在雙側(cè)額上回、楔前葉、額中回、額內(nèi)側(cè)回、枕中回和右側(cè)緣上回，這些腦區(qū)功能與間使穴臨床治療情緒、記憶、注意、語(yǔ)言及肢體運(yùn)動(dòng)障礙等功效具有較密切的相關(guān)性。通過(guò)對(duì)針刺前后上述腦區(qū)不同時(shí)間序列內(nèi)fALFF變化特征的分析，為臨床針刺間使穴治療與上述腦區(qū)相關(guān)功能障礙類疾病提供一定的理論依據(jù)。