◆作者:呂永彪 孫麗華 王勇 黃金鳳
◆單位:廣州市優(yōu)百特飼料科技有限公司,廣東廣州510545
人工受精技術(shù)是規(guī)模豬場生產(chǎn)的重要組成部分,決定著豬場的整體繁殖效益和生產(chǎn)性能。而公豬繁殖力的好壞是做好人工受精的先決條件,常用精液品質(zhì)、性欲、精子體外受精能力和母豬受胎率等指標(biāo)來評價。其中,精液品質(zhì)包括精液的產(chǎn)出能力、精子的活力等,決定并影響母豬人工授精的配種數(shù)量和受胎率。在生產(chǎn)中,精液品質(zhì)差是公豬繁殖力降低的重要原因。因此,如何提高精液品質(zhì)是提高公豬繁殖力的首要目標(biāo)。
通過日糧營養(yǎng)的調(diào)控已可部分改善公豬的精液品質(zhì),如能量、蛋白水平可改善公豬性欲、精液量和精子濃度高低,添加硒、維生素E等滿足公豬精子形成的特殊需求。而近年來,日糧n-3多不飽和脂肪酸(n-3 poly unsaturated fatty acid,n-3 PUFA)有利于精子數(shù)、精子活力和形態(tài)的提高并改善了公豬繁殖力,逐漸引起養(yǎng)殖者的關(guān)注。n-3多不飽和脂肪酸包括動物源性的二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)和植物性來源的α-亞麻酸。大多的研究均為通過添加富含EPA和DHA的深海魚油的方式補(bǔ)充n-3多不飽和脂肪酸,添加植物源性n-3 PUFA的研究較少。本研究通過在公豬日糧中添加富含植物源性n-3 PUFA功能性脂肪粉探討其對公豬精液品質(zhì)的改善作用,為實際生產(chǎn)提供參考。
本試驗所用功能性脂肪粉由中鏈脂肪酸、月桂酸單甘脂和n-3 PUFA(植物源性)組成,為水溶性的微膠囊粉劑,商品名為速生元,由廣州市優(yōu)百特飼料科技有限公司提供。
試驗一:選取體質(zhì)健康,月齡、體重相近的長白公豬18頭,隨機(jī)分成2組,每組9頭公豬。兩組均飼喂豬場種公豬配方飼料,試驗組額外添加速生元30g·頭-1·天-1,對照組不做處理。
試驗二:選取健康長白公豬配種公豬3頭,連續(xù)觀察8周精子質(zhì)量后飼喂速生元30g·頭-1·天-1,繼續(xù)飼喂4周觀察飼喂后對精子質(zhì)量的變化情況。
每頭公豬每供給2.5~3 kg飼料,分別于8:00和17:00各飼喂1次,自由飲水。按豬場正常程序免疫和驅(qū)蟲,清潔和消毒工作按常規(guī)進(jìn)行,保持圈舍通風(fēng)、衛(wèi)生、干燥。記錄各公豬投料量和剩料量,觀察采食情況及食后反應(yīng)情況。試驗一在飼喂8周后采集精液樣品,試驗二每10天取樣一次,采精人員固定,采精方法為設(shè)立臺式假母豬,訓(xùn)練公豬爬跨,人工采精。
1.4.1 精液量
采精用帶刻度的集精杯(500 mL)進(jìn)行,精液經(jīng)4層紗布過濾去除膠體等雜質(zhì)為每次精液量,每頭豬采精完成之后立刻讀取刻度,記錄數(shù)據(jù),精確到lmL。
1.4.2 精子活力
精液過濾后立即在顯微鏡下觀察精子活力,采用百分制法,直線前進(jìn)精子數(shù)占總精子數(shù)的百分比為精子活力。
1.4.3 精子密度
利用分光光度計,在波長440nm下快速測定公豬精液吸光度值 (蒸餾水作為空白),用Macro精子計數(shù)板,查出對應(yīng)精液吸光度值的精子密度。
1.4.4 精子畸形率
采用龍膽紫酒精溶液染色法,將精子涂片染色,在400倍顯微鏡下觀察,計算不同視野500個精子中畸形精子占比例即為畸形率(取3次計算的平均值)。
試驗數(shù)據(jù)以重復(fù)(頭)為統(tǒng)計單位,采用獨(dú)立樣本T檢驗方差分析,數(shù)據(jù)以平均數(shù)表示。
功能性脂肪酸對公豬精液品質(zhì)的影響相見下表。有表1可知,試驗組精液量比對照組提高了12.09%,精子密度提高了9.03%,精子活力提高了10%。
表1 功能性脂肪酸對公豬精液品質(zhì)的影響
連續(xù)觀察試驗結(jié)果詳見下表2。由表2可知,飼喂試驗開始前,精液的采集量波動范圍大,精子密度和精子活力逐漸降低,畸形率在觀察的最后兩次中呈上升上升趨勢,配種精液稀釋入庫數(shù)減少;飼喂功能性脂肪酸后觀察發(fā)現(xiàn),精液的采集量基本穩(wěn)定,精子密度和活力逐步提升,畸形率降低,配種精液稀釋入庫數(shù)增加到最高。
表2 功能性脂肪酸對種公豬精液品質(zhì)的改善
精液品質(zhì)與精子的結(jié)構(gòu)是息息先關(guān)的,精子的膜結(jié)構(gòu)和功能是精卵結(jié)合的重要保障。跟體細(xì)胞一樣,精子膜是磷脂雙分子層結(jié)構(gòu),其中60%~70%的脂肪酸是 n-6PUFAs和 n-3PUFAs。研究表明,外源性添加n-3 PUFA,可通過提高精子濃度、精子產(chǎn)量從而改善公豬的精液產(chǎn)量,進(jìn)而影響公豬的繁殖性能。Strzezek等發(fā)現(xiàn)日糧中添加魚油,PUFA持續(xù)性地融入精子細(xì)胞膜中,膜完整的精子比例更高,增強(qiáng)了對不良環(huán)境的耐受性,每次射精的精子總數(shù)顯著增加。Rooke等報道飼糧添加3%金槍魚油 (富含DHA、EPA)可增加精子活力及具有正常頂體形態(tài)和正常精子形態(tài)的精細(xì)胞含量。
由于動物機(jī)體缺乏n-6PUFAs(一般豆油為其主要來源)和n-3PUFAs起始合成酶,因此,為滿足公豬精子受精能力發(fā)揮時對 PUFAs的生理需要,PUFAs必須從日糧中添加。生產(chǎn)中公豬日糧一般為玉米-豆粕型日糧,玉米和豆粕中以亞油酸(C18∶2,n-6 PUFA)含量最高,而 n-3 PUFA含量很低,使得日糧中n-6∶n-3比大于10∶1,較難滿足精子DHA和n-3 PUFA含量的需要。n-6PUFA和n-3PUFA在體內(nèi)的代謝過程中共用同一種同工酶,相互競爭,n-6PUFAs脂肪酸比例過高會導(dǎo)致n-3PUFA的缺乏和必需脂肪酸及其衍生物比例的不平衡,從而影響精液品質(zhì)。通過日糧n-3 PUFA外源攝入途徑,可滿足精子膜對二十二碳六烯酸的特殊物質(zhì)和功能需要,在調(diào)節(jié)精子膜結(jié)構(gòu)和功能后改善精子受精能力。
目前研究補(bǔ)充n-3 PUFA的方式主要有兩種,通過添加DHA和EPA性添加劑或深海魚油(富含DHA和EPA,一般含量在20%以上)。而有植物源性來源n-3 PUFA,如α-亞麻酸對公豬繁殖性能及精液品質(zhì)影響的研究很少。亞麻酸為動物機(jī)體必需脂肪酸,參與體內(nèi)磷脂的合成、代謝并轉(zhuǎn)化為動物機(jī)EPA和DHA。本研究結(jié)果表明,增加飼糧中添加富含植物源性n-3 PUFA的功能性脂肪酸,調(diào)節(jié)公豬日糧的n-3 PUFA/n-6 PUFA的比值,對公豬的精子密度、活力等具有明顯的改善。公豬精液中精子的數(shù)量和密度是評價公豬繁殖性能和商品價值的重要依據(jù)之一。公豬提供的精液中精子數(shù)量越多、密度越大,可稀釋的倍數(shù)就越大,在本實驗中反應(yīng)為精子入庫數(shù)量增加。因此可配種的母豬數(shù)就越多,從而減少公豬的飼養(yǎng)量,提高公豬的商業(yè)價值。
日糧中添加富含植物源性n-3PUFA的功能性脂肪粉“速生元”可有效地改善公豬的精子活力和精子密度,降低精子畸形率,從而達(dá)到改善精液品質(zhì)的作用。
參考文獻(xiàn):(略)