晏意良 明溪縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 福建明溪 365200

在日常檢測(cè)工作中，接收采自豬場(chǎng)的血樣時(shí)，經(jīng)常會(huì)遇到一些豬場(chǎng)由于路途比較遠(yuǎn)、道路崎嶇顛簸而造成豬全血溶血的情況。我們一貫做法都是棄之不用，要求豬場(chǎng)重新送樣。但是豬全血溶血對(duì)抗體檢測(cè)到底有否影響，我們也是模棱兩可。因此，有必要通過(guò)試驗(yàn)來(lái)摸清豬全血溶血對(duì)樣本檢查的具體影響。本試驗(yàn)通過(guò)觀察豬全血是否溶血對(duì)豬瘟抗體檢測(cè)的影響，對(duì)溶血情況是否會(huì)影響抗體檢測(cè)作初步探索，為日常檢測(cè)工作提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料 在明溪縣某規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)選擇75日齡肉豬20頭（21日齡一免廣東永順傳代細(xì)胞苗，55日齡二免中牧豬丹毒-巴氏桿菌-豬瘟三聯(lián)苗），每頭豬抽取全血各2份，共40份。相同條件保存，每頭2份血樣其中1份在運(yùn)輸過(guò)程中反復(fù)顛簸，注射到5 mL離心管中離心，獲得20份溶血的血清并編號(hào)；另外1份正常保存，正常離心，獲得20份的血清編號(hào)與溶血的血清相對(duì)應(yīng)，確保相對(duì)應(yīng)的血清來(lái)源于同一頭豬。

1.2 方法 離心后立即對(duì)血清進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，試劑盒為北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn)；兩組血清在同一包被板上進(jìn)行操作，分別設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照，在深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司生產(chǎn)的RT-6100型酶標(biāo)儀上讀取，波長(zhǎng)450 nm，100×（陰性對(duì)照A平均值-樣品A值）/陰性對(duì)照A平均值≥40判斷為陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

2.1 溶血對(duì)血清外觀的影響 隨著全血的溶血，離心得到的血清變得鮮紅。

2.2 溶血對(duì)血清豬瘟抗體檢測(cè)的影響 共檢測(cè)40份血清，其中溶血血清20份，未溶血血清20份，分別對(duì)應(yīng)同一頭豬的2份全血，樣品A值分別見表1-表2。觀察溶血與未溶血血清樣品A值，發(fā)現(xiàn)溶血血清的A值較未溶血血清略低。

表1 未溶血血清樣品A值

表2 溶血血清樣品A值

再通過(guò)公式計(jì)算阻斷率，樣品阻斷率分別見表3-表4。觀察溶血與未溶血血清樣品阻斷率，發(fā)現(xiàn)溶血的血清較未溶血的血清阻斷率略低，但不影響樣品的陰陽(yáng)性判定。兩組樣品都是相對(duì)應(yīng)的3個(gè)樣品陰性，相對(duì)應(yīng)的17個(gè)樣品陽(yáng)性。

表3 未溶血血清樣品阻斷率

表4 溶血血清樣品阻斷率

3 討 論

試驗(yàn)結(jié)果表明，豬全血溶血，除了使血清變得鮮紅，對(duì)血清豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有明顯影響，分別對(duì)應(yīng)的兩組20份樣品陰陽(yáng)性均一致。筆者認(rèn)為在豬瘟抗體檢測(cè)采樣時(shí)，樣品保存運(yùn)輸過(guò)程中，除了正常的保存外，不必在意樣品是否溶血會(huì)對(duì)豬瘟抗體檢測(cè)造成影響。