●李沐森 郭 蕊 張桂熒 王 佟 劉智慧 李世關(guān) 賈欣月(吉林農(nóng)業(yè)科技學院動物科技學院 吉林 吉林 132109)
●趙傳芳※(中國農(nóng)業(yè)科學院特產(chǎn)研究所 吉林 長春 130112)
非洲獅屬貓科動物,平均壽命在15年左右,分布區(qū)域在非洲南部,體型較大,有“草原霸主”之稱。近年來非洲獅的數(shù)量在逐漸減少,成為瀕臨滅絕的動物。非洲獅在草原上結(jié)群生活,群體主要由2~5只雄獅、雌獅和幼獅構(gòu)成。雌獅承擔捕獵工作,食物包括野兔、河馬、牛羚、斑馬及鴕鳥等。非洲獅可常年繁殖,孕期100~119d。每胎產(chǎn)仔1~7 只,2.5~4 歲性成熟,壽命一般為20~25年。
吉林市江南公園圈養(yǎng)多只非洲獅,作為動物園的珍稀動物之一,非洲獅具有極高的觀賞價值,因此非洲獅的健康至關(guān)重要。在非洲獅的疾病中,寄生蟲病比較常見。常見的體外寄生蟲有蜱、疥螨及癢螨;常見的體內(nèi)吸蟲有華支睪吸蟲和肝片吸蟲[2];線蟲有錫蘭鉤口線蟲、貓弓蛔蟲和獅弓蛔蟲;絳蟲有中絳絳蟲卵;球蟲有等孢球蟲。寄生蟲在宿主的細胞、組織或腔道內(nèi)寄生并引起一系列的危害,這不僅見于原蟲、蠕蟲的成蟲,而且也見于移行中的幼蟲,它們對宿主的危害在多個方面可體現(xiàn)[1]。動物機體被寄生蟲侵害,會導致它們的生長發(fā)育受到影響。一部分會導致動物貧血、消瘦,有的還會危及生命,嚴重威脅動物的健康。越來越多的研究顯示寄生蟲病是危害野生動物的主要疾病之一[3],會引起其他疾病的發(fā)生。
2018年10月至2019年5月,我們對吉林市江南公園園內(nèi)非洲獅進行了體內(nèi)、外寄生蟲感染檢測和分析,根據(jù)感染情況制定相應(yīng)的預防和治療計劃[4],此次調(diào)查為預防及防治非洲獅寄生蟲病提供了科學依據(jù),同時也可降低非洲獅患寄生蟲病的幾率。
1.1.1 試驗器械 手術(shù)刀、小鑷子、玻璃棒、載玻片、光學顯微鏡、大燒杯、試管、玻璃平皿、蓋玻片、膠頭滴管、離心機、火柴棍、特質(zhì)鐵絲圈、漏斗架、40 目銅篩。
1.1.2 試驗試劑 硫酸鈉溶液、50%的甘油水溶液、煤油、5%的氫氧化鉀溶液。
1.1.3 樣品采集 根據(jù)吉林市江南公園非洲獅的生活環(huán)境特點,園區(qū)工作人員幫助采集非洲獅的新鮮糞便和皮屑。采集40 份糞便,每份大約30g,編號后放入塑料袋,并于采集當日帶回學校,放在動物科技學院的寄生蟲實驗室的冰箱內(nèi),貯藏溫度大約為4℃。
1.1.4 試驗地點 糞樣采集地點:吉林市豐滿區(qū)江南公園。試驗地點:動物科技學院左家校區(qū)的動物寄生蟲實驗室。
1.2.1 體表寄生蟲檢查法
1.2.1.1 煤油浸泡法。把采集的病料放在載玻片上,滴1~2 滴煤油,蓋上另一個載玻片,用手輕輕搓動兩片載玻片,使病料粉碎[5],再在低倍鏡下觀察有無蟲卵及其形態(tài)。
1.2.1.2 皮屑溶解法。取一個載玻片,上面放好病料,浸入5%的氫氧化鉀溶液中,達到管的1/3 處即可,加熱煮沸2~5min(需酒精燈),待皮屑全部溶解后,放進離心管中,用離心機分離2~3min,然后倒去上層液,吸取里面的沉淀物,制成鏡檢片,在光學顯微鏡下鏡檢。
1.2.2 消化道寄生蟲檢查法
1.2.2.1 尼龍篩淘洗檢查法。取5~10g的糞便放在燒杯內(nèi)搗碎,加清水100mL混勻,用40 目的金屬篩將糞液過濾到500mL的燒杯中,先用尼龍篩濾去粗渣,濾液再用尼龍篩兜(有雙層紗布)淘洗,至濾液清澈,瀝干,以除去色素及其他可溶性物和小于網(wǎng)孔的糞渣,用膠頭吸管吸取尼龍篩兜內(nèi)物,滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,放在顯微鏡下鏡檢。
1.2.2.2 硫酸鈉溶液漂浮法。取采集好的新鮮糞便10g左右,放在玻璃平皿或玻璃燒杯中搗碎(玻璃棒和鑷子均可),加入100mL的硫酸鈉溶液攪拌均勻,然后將攪拌好的濾液分別過濾到幾個試管當中,靜置半個小時左右,當蟲卵可以集中在上層液面時(即凸起液面),用載玻片輕輕沾取凸液面,蓋上玻片,在顯微鏡下觀察;或者用特制的鐵絲圈沾取凸液面后鏡檢。
1.2.2.3 直接涂片檢查法。在載玻片上滴50%的甘油水溶液或者清水2~3 滴,然后用棉簽或鑷子取少許的糞便放在載玻片上,將載玻片上的甘油水溶液和糞便混合均勻。再用小鑷子去掉大的草棍和雜質(zhì)之后,把糞液慢慢涂薄,蓋上蓋玻片,放在光學顯微鏡下觀察蟲卵或幼蟲形態(tài)特征。檢查時不要有遺漏,要查遍蓋玻片下的所有部分。
1.2.2.4 離心沉淀法。取5~10g的糞便放在燒杯內(nèi)搗碎,然后加入約100mL的清水,充分攪拌均勻,用40 目金屬篩過濾到500mL的燒杯中,然后將濾液分別放入4 個離心管內(nèi),放在離心機上離心3~5min(1 500~2 000r/min),然后倒掉上清液,加水再離心,反復離心3 次,最后取離心管底部的沉淀物,涂于載玻片上鏡檢。
1.3.1 癢螨 呈長圓形,肉眼可見,體長0.5~0.9mm。體表有細紋。
1.3.2 疥螨 呈龜形;顏色為淺黃色;腹面扁平,背面隆起。
1.3.3 蜱 長橢圓形;無胸、頭、腹之分;背腹扁平。由軀體、假體兩部分組成。
1.3.4 貓弓首蛔蟲卵 蟲卵呈亞球形,有小胃(食道和腸管間)。蟲體小,前端箭頭狀。雄蟲長30~60mm,雌蟲長40~100mm。蟲卵近圓形,直徑為65~75m。內(nèi)含未分裂的卵胚。卵殼表面有蜂窩狀構(gòu)造。貓弓首蛔蟲屬于無飾科弓首屬,俗稱貓蛔蟲,多寄生于一些肉食動物體內(nèi)(小腸中)。
1.3.5 獅弓蛔蟲卵 蟲卵圓形,表面平滑,食道呈圓柱形,無食道球和腺胃,蟲卵殼厚。蟲卵直徑75~85m。雄蟲體長40~80mm,尾部呈圓錐形,均勻變細,無指形突起,兩根交合刺等長,長0.9~1.5mm,無尾翼,背唇髓部形成2 個前突,肛前有21~28 對乳突,肛后有5 對乳突;雌蟲體長60~100mm,陰門開口于蟲體前1/3。
1.3.6 華支睪吸蟲卵 蟲卵小,蟲卵像燈泡,黃褐色,形似燈泡,大小為(27~35)m×(12~20)m,蟲卵里面有毛蚴,下端有一突起,上端有卵蓋。
1.3.7 肝片吸蟲卵 蟲卵較大,橢圓形,黃褐色。大小為(133~157)m×(74~91)m。卵蓋不明顯,須仔細觀察。卵內(nèi)有卵胚細胞(前端)和卵黃細胞(中間)。
1.3.8 錫蘭鉤口線蟲卵 蟲卵橢圓形,卵殼很薄,無色透明,蟲體里面有卵胞(多個),卵殼與卵胞界限清晰。
1.3.9 等孢球蟲卵囊 卵囊呈長橢圓形,較大,大小為(20~33)m×(10~19)m。成熟的卵囊內(nèi)含有2個橢圓形的孢子囊,無卵囊殘留體;每個孢子囊含有4 個半月形的子孢子和1 個殘留體,無囊塞。
1.3.10 中絳絳蟲卵 卵體積較大,形態(tài)特征明顯,易于鑒別。成熟的孕節(jié)常隨糞便排出體外,白色,狀如一小段扁的面條;孕節(jié)干燥后狀如白芝麻,常掛于肛門周圍。
通過對非洲獅皮屑檢查,可知吉林市江南公園非洲獅體表無蜱、疥螨以及癢螨等寄生蟲。通過對采集的糞便樣本檢測,可見非洲獅感染寄生蟲病的實際情況,具體感染情況見表1、表2和表3。
表1 非洲獅體內(nèi)寄生蟲蟲卵寄生部位
表2 非洲獅體表寄生蟲感染情況
表3 非洲獅糞檢體內(nèi)寄生蟲蟲卵感染情況
由于在診斷和治療非洲獅寄生蟲病過程中存在一些固有問題,所以,吉林市江南公園治療方案的重點是預防。新進園動物在到園1 周內(nèi)進行一次寄生蟲檢查;每年春季對非洲獅進行一次寄生蟲普查;保持飼料衛(wèi)生和飲水清潔(盡量不要給非洲獅飲用生水),春季和秋季是驅(qū)蟲的最佳季節(jié),糞便和驅(qū)蟲后糞便要盡快處理,經(jīng)常打掃衛(wèi)生,并進行消毒。
在發(fā)現(xiàn)非洲獅患寄生蟲病后要第一時間制定治療方案,根據(jù)動物的感染情況、健康情況及精神狀態(tài)等對癥用藥。注意驅(qū)蟲藥要交替使用。
3.3.1 線蟲可用丙硫咪唑治療,口服,每千克體重10mg,每天2 次;也可用鹽酸左旋咪唑片防治,口服,每千克體重10mg,每天2 次。
3.3.2 絳蟲可用吡喹酮防治,口服,每千克體重5~10mg,連用2~3d。
3.3.3 吸蟲可用硝氯酚防治,口服,每千克體重5mg,每天1 次。
3.3.4 球蟲可用常山酮防治,口服,每千克體重10mg,每天1 次;也可用莫能菌素防治,口服,每千克體重30mg,每天1 次。
對患病動物要認真負責,使動物的生活環(huán)境保持安靜,讓它們有足夠的時間來恢復健康。必要時,在治療一段時間后,再進行1 次病原體檢查,以判定療效。護理人員每天都要交接好治療任務(wù)。
用藥時,尤其有些藥物具有潛在毒性,一定要仔細查看藥物的副作用及是否適合非洲獅服用;其次在治療過程中我們要嚴格控制用藥劑量,投藥后對動物進行看護,時刻觀察動物的表現(xiàn),如若出現(xiàn)嚴重的副作用,應(yīng)馬上對動物實施解救措施;驅(qū)蟲需按時給藥,不要遺忘,記錄清楚用藥名稱、時間及給藥人員。
通過對非洲獅進行體外寄生蟲檢測,可知吉林市江南公園的非洲獅體表無蜱、疥螨以及癢螨寄生;通過對非洲獅糞便進行直接涂片法、硫酸鈉溶液漂浮法、離心沉淀法及淘洗法檢測,可以看出,江南公園非洲獅體內(nèi)消化道寄生蟲以獅弓蛔蟲蟲卵和等孢球蟲蟲卵感染為主,感染率分別為25%和25%。
根據(jù)此次寄生蟲感染情況進行數(shù)據(jù)分析,非洲獅感染寄生蟲病可能原因為圈舍環(huán)境衛(wèi)生較差、飼喂食物的選擇不當和飼養(yǎng)方式不對等。應(yīng)及時對動物進行隔離,并進行相應(yīng)的驅(qū)蟲治療,加強飼養(yǎng)管理[6];環(huán)境衛(wèi)生也不容忽視,定期對圈舍進行清掃和消毒;飼養(yǎng)人員要定期做體檢;加強滅鼠和防蟲工作;非洲獅的食物要嚴格控制和檢查,每隔一段時間對非洲獅進行寄生蟲的檢查。除此之外,還需加強免疫接種[7],定期進行糞便檢查,尤其在炎熱季節(jié),以便控制感染寄生蟲。
根據(jù)目前吉林市江南公園非洲獅體內(nèi)、外寄生蟲感染情況,可以合理應(yīng)用相應(yīng)的驅(qū)蟲藥進行防治,將寄生蟲病的危害控制到最低水平??紤]到非洲獅可能對驅(qū)蟲劑產(chǎn)生抗藥性,需要輪換使用驅(qū)蟲劑。