陳志雄王洪海 張 峰

（1原南京軍區(qū)司令部農(nóng)副業(yè)基地，江蘇南京 210016；2中牧實業(yè)股份有限公司，北京 100070）

仔豬腹瀉是制約養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟效益的重要疾病之一。引起仔豬腹瀉的病因較為復雜，多種病原，如豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬德爾塔冠狀病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCoV）、傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（RV）、大腸桿菌、球蟲，以及飼養(yǎng)管理不當，如飼養(yǎng)密度過大、豬舍通風不良、豬群應激、營養(yǎng)不良等因素均可導致該病的發(fā)生。防控仔豬腹瀉必須查明病因，采取綜合防治措施才能見效。

PEDV可引起豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea,PED），該病對新生仔豬危害極大，臨床主要表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、脫水，感染后死亡率高。PEDV通常與TGEV、PDCoV等共同導致豬胃腸炎和腹瀉的發(fā)生。PDCoV于2012年首次在香港的豬群中被發(fā)現(xiàn)，于2014年在美國腹瀉仔豬和母豬的糞便中首次被檢測到，隨后在我國四川、江西等地腹瀉豬的臨床樣品中也分離到PDCoV毒株。

本文報道了江蘇省某規(guī)?；i場產(chǎn)房仔豬混合感染PEDV和PDCoV引發(fā)腹瀉的病例，通過流行病學、病理變化以及實驗室PCR/RT-PCR檢測結(jié)果，最終確診，并采取緊急免疫豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗（HB08株＋ZJ08株） （商品名“腹康”），添加保肝解毒、提高機體免疫力的藥物等綜合防控措施，取得明顯的效果。

1 流行病學

2018年10月初，江蘇省某規(guī)?；i場產(chǎn)房仔豬出現(xiàn)較大規(guī)模的腹瀉流行，仔豬出生后約2 d開始嘔吐、黃色水樣腹瀉，發(fā)病比例約40%，使用常規(guī)抗生素治療效果較差。該場獸醫(yī)聯(lián)系中牧實業(yè)股份有限公司（以下簡稱“中牧股份”）業(yè)務經(jīng)理及技術(shù)人員，咨詢腹瀉疫情控制方案。

2 臨床癥狀及病理剖檢

現(xiàn)場剖檢可見，病豬腸道內(nèi)充滿黃色液體，腸壁變薄并呈透明狀，腸系膜充血，其他組織未見異常。此外，個別仔豬出生后即出現(xiàn)外陰紅腫現(xiàn)象（圖1）。推斷豬群可能感染病毒性腹瀉疾病，同時伴有霉菌毒素中毒現(xiàn)象。

圖1 發(fā)病仔豬臨床癥狀及剖檢結(jié)果

3 實驗室檢測

將發(fā)病仔豬的肝臟、脾臟、肺臟、腎臟及淋巴結(jié)，適量取樣研磨后反復凍融3次，勻漿20 min，收集勻漿液12 000 r/min離心10 min，取上清液，用TaKaRa MiniBEST Viral DNA/RNA Extraction kit Ver.5.0試劑盒提取總DNA/RNA，分別進行CSFV、PRRSV（經(jīng)典毒株/高致病性毒株）、NADC30、PRV、PCV2、PCV3、PEDV、PDCoV的PCR/RT-PCR擴增，病原核酸PCR檢測方法及擴增目的基因片段大小見表1。反應結(jié)束后，吸取5 μL PCR產(chǎn)物于1%1×TAE瓊脂糖凝膠中電泳檢測。結(jié)果顯示3頭仔豬均為PEDV和PDCoV混合感染，見表2、圖2～9。

4 診斷及治療措施

通過與豬場獸醫(yī)溝通后，了解到該場每年9—10月份免疫腹瀉疫苗，而發(fā)病時還未免疫疫苗。另據(jù)了解，在病發(fā)約2個月前，豬場曾經(jīng)購買使用過1批霉變玉米，可能導致豬群發(fā)生霉菌毒素中毒，與仔豬初生后即表現(xiàn)外陰紅腫的臨床表現(xiàn)相符。

表1 病原核酸PCR檢測方法及擴增目的基因片段大小

表2 樣品病原檢測結(jié)果

綜上所述，該場可能是由于豬群發(fā)生霉菌毒素中毒導致免疫抑制，同時免疫腹瀉疫苗不及時，最終造成PEDV及新型腸道致病冠狀病毒PDCoV混合感染而發(fā)病。

圖2 CSFV核酸檢測凝膠電泳圖

圖3 PRRSV核酸檢測凝膠電泳圖

圖4 PRRSV NADC30株核酸檢測凝膠電泳

圖5 PRV核酸檢測凝膠電泳圖

圖6 PCV2核酸檢測凝膠電泳圖

圖7 PCV3核酸檢測凝膠電泳圖

圖8 PEDV核酸檢測凝膠電泳圖

圖9 PDCoV核酸檢測凝膠電泳圖

采取綜合防措施如下：

⑴全群母豬普免中牧股份豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗（HB08株＋ZJ08株） （商品名“腹康”）2頭份，15 d后未生產(chǎn)母豬加強免疫2頭份，產(chǎn)房初生仔豬緊急免疫，肌注1頭份。

⑵立即停止使用劣質(zhì)玉米，添加脫霉劑；

⑶在母豬飼料中添加黃芪多糖、電解多維、小蘇打、葡萄糖，提高免疫力，增加飼料能量攝取；

⑷在產(chǎn)房使用密斯陀干粉，噴霧帶豬消毒，降低濕度，同時注意保證產(chǎn)房環(huán)境溫度；

⑸腹瀉嚴重、脫水的仔豬處死后，進行無害化處理，減少病原傳播。

采取以上防控措施2周后，回訪豬場，腹瀉疫情得到明顯控制，產(chǎn)房基本恢復正常生產(chǎn)，新生仔豬沒有再出現(xiàn)腹瀉情況。

5 討論

該案例說明當前豬群中如存在霉菌毒素中毒等免疫抑制因素，可能會間接誘導腹瀉類疾病暴發(fā)，這為腹瀉的防控帶來難度。對于該案例中的PEDV和PDCoV的混合感染，雖然目前尚無有效的PDCoV疫苗，但在控制其他相關(guān)疾病的前提下，豬群仍可通過提高自身免疫力對PDCoV感染產(chǎn)生一定的抵抗能力。