張雪梅 曹院章 祁俊娟 許東保

（北京市朝陽區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心 100018）

隨著北京市朝陽區(qū)城鄉(xiāng)經(jīng)濟(jì)社會一體化新格局的發(fā)展，城市、村鎮(zhèn)各類要素相互滲透、相互融合，經(jīng)濟(jì)、觀賞、伴侶、實(shí)驗、表演等各類動物與人們的生活更加貼近、關(guān)系更加密切，加強(qiáng)動物疫病檢疫凈化工作，防止重大動物疫病和人畜共患病傳播對于維護(hù)公共衛(wèi)生安全具有重大意義[1]。本區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心承擔(dān)全區(qū)重大動物疫病防控工作重任，近幾年，通過采取科學(xué)措施，有效防止馬傳染性貧血疫病的傳入和流行，確保本區(qū)重大馬術(shù)國際賽事的順利舉辦，保障本區(qū)馬場的無疫安全。

馬傳染性貧血病毒主要臨床特征包括出血、黃疸、心臟衰竭、浮腫、消瘦、反復(fù)發(fā)熱及貧血。馬屬動物均易感，其中馬易感性最強(qiáng)，驢、騾次之。該病一旦發(fā)生，很難消滅，嚴(yán)重威脅我國乃至世界養(yǎng)馬業(yè)的安全，我國將其列為二類動物疫病。

1 對馬傳貧陽性馬匹處置情況

1.1 發(fā)病情況

2012年9月26 日區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心對蟹島跑馬場進(jìn)行馬傳貧病檢疫凈化時發(fā)現(xiàn)，該場一匹 “康2 號” 馬疑似馬傳貧陽性，10月9日經(jīng)市疫控中心化驗室復(fù)檢，確診為馬傳貧陽性?？? 號馬匹毛色為黑紅色，年齡 7 歲，屬普通馬。跑馬場負(fù)責(zé)人稱此馬于2012年4月從康西草原購入。到達(dá)馬場后7d 隔離后無異常關(guān)入馬舍，之后一兩個月內(nèi)偶爾出現(xiàn)不愛吃食，精神狀態(tài)不好，發(fā)熱，再后來病馬表現(xiàn)為體溫升高、精神沉郁、后軀無力、食欲減少等癥狀。

1.2 實(shí)驗室診斷

馬傳染性貧血病情復(fù)雜，慢性型更甚，應(yīng)根據(jù)該病的流行病學(xué)、臨床診斷及生物學(xué)分析等結(jié)果進(jìn)行綜合分析。在診斷時，具備馬傳貧流行特點(diǎn)、臨床癥狀、病理變化，做出初步診斷，再通過實(shí)驗室診斷技術(shù)進(jìn)行確診。對于 “康2 號” 馬在秋防過程中初步診斷已表現(xiàn)出疑似馬傳貧陽性，需進(jìn)一步實(shí)驗室確證。實(shí)驗室檢測馬傳染性貧血的方法有瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗 (AGID)、馬傳貧酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA) 和馬傳貧病原分離鑒定。

本區(qū)馬屬動物分布較廣、馬場較多，馬傳染性貧血病疫情一旦發(fā)生影響極大。本單位作為區(qū)縣級疫病預(yù)防控制中心，肩負(fù)防治動物疫病和人畜共患病的重任。每年都要對轄區(qū)內(nèi)的所有馬匹進(jìn)行春季和秋季兩次疫病凈化。本實(shí)驗室采用的檢測方法為瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗。

在此著重介紹瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散。反應(yīng)板的制備：溶化1%～1.2%的瓊脂糖，在無菌操作臺里將溶化的瓊脂糖倒在無菌瓊脂板上，制成厚度約3～4mm 厚的瓊脂糖凝膠板，待冷卻后用打孔器打成梅花形的孔、封板，封板溫度以板底不燙手為宜。檢測：將抗原加在中間孔，抗體分別加入外周三孔中，樣品加在另三孔（如圖1），抗原、抗體和樣品在瓊脂板上相互擴(kuò)散，在瓊脂中呈現(xiàn)不透明的白色沉淀線或無沉淀線產(chǎn)生。

下面3 張圖為反應(yīng)后的結(jié)果：圖1：3 份樣品均為陰性；圖2:3 份樣品均為陽性，此圖也是 “康2 號” 馬檢測后的結(jié)果。

圖3:3 份樣品為可疑樣品。標(biāo)準(zhǔn)陽性血清孔與抗原孔之間的沉淀線末端，似乎向毗鄰受檢血清孔內(nèi)側(cè)偏彎，不易判斷時，可將抗原稀釋2倍、4 倍、6 倍、8 倍進(jìn)行重新測試，并最終判定結(jié)果。觀察時間可延至5d。判定結(jié)果時，應(yīng)從不同折光角度仔細(xì)觀察平皿上抗原孔與受檢血清孔之間有無沉淀線。這樣的血清應(yīng)判為可疑，要重新采集同一匹馬的血清進(jìn)行重復(fù)檢測，最終結(jié)合臨床癥狀、病理變化和實(shí)驗結(jié)果綜合判定。經(jīng)診斷檢疫確定的陽性馬，應(yīng)堅決撲殺。

1.3 無害化處理

馬傳貧病被國家列為二類動物疫病[2]，根據(jù) 《中華人民共和國動物防疫法》 規(guī)定：發(fā)生二類動物疫病時，縣級以上地方人民政府根據(jù)需要組織有關(guān)部門和單位采取隔離、撲殺、銷毀、消毒、無害化處理等相關(guān)措施。疫控中心2012年10月16日上午10 點(diǎn)會同金盞鄉(xiāng)農(nóng)服中心，按照 《馬傳染性貧血防治技術(shù)規(guī)范》 規(guī)定，將陽性馬在不放血的條件下進(jìn)行撲殺，撲殺的陽性動物、排泄物等按照國標(biāo) 《GB 16548-2006 病害動物和病害動物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程》 進(jìn)行深埋。疫控中心給蟹島跑馬場發(fā)放了消毒藥品并提出以下要求。

（1）金盞鄉(xiāng)農(nóng)服中心監(jiān)督指導(dǎo)蟹島跑馬場對全場進(jìn)行徹底消毒。

（2）對深埋的動物尸體做好看護(hù)工作。

（3）加強(qiáng)重大動物疫病防控的宣傳。

（4）進(jìn)出境的動物要做好報檢報驗。

（5）發(fā)現(xiàn)異常情況按程序立即上報。

2 開展馬傳貧防控工作措施

2.1 加強(qiáng)馬場監(jiān)管，落實(shí)官方登記制度

從2013年本中心對全區(qū)的馬場進(jìn)行統(tǒng)計調(diào)查，并制作了養(yǎng)殖臺賬。在馬場推行官方登記制度，如 《北京動物（動物產(chǎn)品）產(chǎn)地檢疫登記記錄》 《動物防疫消毒記錄》 《無害化處理記錄》 等。建立馬匹 《健康免疫檔案》，并現(xiàn)場指導(dǎo)填寫。為有效預(yù)防控制動物疫病，維護(hù)公共衛(wèi)生安全，根據(jù) 《動物防疫條件審查辦法》，對馬場進(jìn)行審查，對符合要求的單位發(fā)放《動物防疫條件合格證》。

2.2 掌握馬匹存欄數(shù)據(jù)

從2013年初開始，組織開展了本區(qū)馬屬動物存欄及流行病學(xué)調(diào)查，將轄區(qū)內(nèi)役用馬、觀賞用、騎乘用、比賽用等馬屬動物分類造冊，了解掌握馬屬動物存欄和疫病發(fā)生情況。本區(qū)目前共有馬場17 家，比賽及騎乘用馬832 匹，跨省市流動較為頻繁，另外，每年要舉辦40 余次的國際、國內(nèi)馬術(shù)比賽和馬戲表演，外埠馬匹進(jìn)入本區(qū)較頻繁，針對引進(jìn)馬匹建立個體檔案，活動區(qū)域范圍。如表1、表2 所示。

表1 馬屬動物活動區(qū)

表2 馬匹個體檔案

2.3 開展疫病檢疫凈化工作

本區(qū)負(fù)責(zé)動物檢疫工作，按照北京市動物疫病預(yù)防控制中心關(guān)于動物疫病檢疫凈化的要求，組織開展春秋兩次集中動物檢疫凈化工作和全年常態(tài)化馬屬動物檢疫凈化工作。

2.4 嚴(yán)格產(chǎn)地檢疫管理

對調(diào)出移動的馬匹要開具產(chǎn)地檢疫證明。動物檢疫部門人員應(yīng)到現(xiàn)場，查看馬場檔案資料和 《馬匹健康免疫證明》，對馬匹進(jìn)行臨床檢查，只有臨床健康，檢疫和免疫均在有效期，開具 《動物檢疫合格證明》。

表3 本單位近幾年來的檢測結(jié)果（單位：匹）

2.5 加強(qiáng)調(diào)入馬匹的監(jiān)管

查看馬匹的 《動物檢疫合格證明》和《運(yùn)載工具消毒證明》 是否有效，檢疫證明是否有公路檢疫站的簽章。對新進(jìn)馬匹進(jìn)行隔離一個半月，并進(jìn)行馬傳染性貧血和馬鼻疽檢測，結(jié)果為陰性的方允許混群飼養(yǎng)。如檢疫發(fā)現(xiàn)馬傳貧或馬鼻疽陽性，應(yīng)當(dāng)立即對病馬進(jìn)行隔離，撲殺、消毒等措施。

2.6 落實(shí)消毒制度，切斷傳染病的傳播

消毒工作是動物防疫工作的重點(diǎn)，為防止動物疫病的發(fā)生、傳播，本區(qū)為蟹島跑馬場配備了消毒工具和消毒藥品。如菌毒克、二氧化硫、聚維酮碘等，確保徹底消滅傳染源。

2.7 采取轄區(qū)管理措施

對馬場以及旅游騎乘馬活動區(qū)域，加強(qiáng)馬鼻疽、馬傳染性貧血等馬屬動物疫病防控。按照中心下移，關(guān)口前移的方針，區(qū)級動物防疫部門負(fù)責(zé)防疫條件的審核、疫病的檢疫凈化、流行病學(xué)的調(diào)查、馬匹進(jìn)出檢疫出證、發(fā)生疫情時的處置、法律法規(guī)和疫病防控知識的宣傳培訓(xùn)等。鄉(xiāng)級動物防疫部門協(xié)助上級部門做好轄區(qū)內(nèi)馬場的日常監(jiān)督管理，掌握基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，落實(shí)各項防疫措施，充分發(fā)揮村級防疫員的作用，加強(qiáng)日常的巡視，發(fā)現(xiàn)異常情況及時上報。

2.8 保障世界汗血馬協(xié)會特別大會暨中國馬文化節(jié)的各項活動順利舉辦

結(jié)合國際通行做法和北京市實(shí)際情況，將馬傳染病防控區(qū)分為核心控制區(qū)和免疫緩沖（保護(hù)）區(qū)，建立馬屬動物隔離場所，采取 “檔案管理” 的工作方式，完善了工作記錄和備賽馬匹的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)調(diào)查，實(shí)行 “日檢” 制度，加強(qiáng)日常消毒工作，召集駐場人員和志愿者成立疾病診斷小組、應(yīng)急處置小組、消毒小組和運(yùn)輸小組，保障應(yīng)急處理的每個環(huán)節(jié)均能夠有效落實(shí)。對賽時馬匹比賽、賽后馬匹安全返程實(shí)施了全過程監(jiān)管，有力保障了世界汗血馬協(xié)會特別大會暨中國馬文化節(jié)的各項活動順利進(jìn)行。

雖然馬傳貧在北京市已經(jīng)達(dá)到消滅標(biāo)準(zhǔn)。但為了有效防止馬匹疫病的傳入、發(fā)生和傳播，保障各項馬術(shù)比賽和演出的順利舉辦，促進(jìn)馬術(shù)業(yè)發(fā)展，維護(hù)公共衛(wèi)生安全，作為動物疫病預(yù)防控制中心，加強(qiáng)馬場各項防疫措施并落實(shí)到位是非常必要的。