白哈達 薩仁圖雅

摘要? ? 高效液相色譜法是一種新型分析與檢測技術(shù)，廣泛應(yīng)用于食品、藥品、農(nóng)產(chǎn)品、化工產(chǎn)品等分析分離與檢驗中，具有分析速度快、分析準(zhǔn)確度高、高靈敏度、操作簡便等優(yōu)點。本文主要闡述了高效液相色譜法技術(shù)及其在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中的應(yīng)用研究，以期為該技術(shù)的廣泛應(yīng)用提供參考。

關(guān)鍵詞? ? 高效液相色譜法;農(nóng)產(chǎn)品;質(zhì)量安全

中圖分類號? ? O657.7+2? ? ? ? 文獻標(biāo)識碼? ? A? ? ? ? 文章編號? ?1007-5739（2019）11-0236-02

Abstract? ? High performance liquid chromatography（HPLC） is a new analytical and detection technology，which is widely used in the analysis，separation and inspection of food，medicine，agricultural products and chemical products. High performance liquid chromatography has the advantages of fast analysis speed，high accuracy，high sensitivity and simple operation. This paper mainly expounded the application of high performance liquid chromatography in the quality safety detection of agricultural products，so as to provide references for the widely utilization of this technology.

Key words? ? high performance liquid chromatography（HPLC）;agriculture product;quality safety

農(nóng)產(chǎn)品是指農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品，主要包括糧食、油料、水果、蔬菜、食用菌、肉類、乳、蛋、茶等[1]。我國是一個農(nóng)業(yè)大國、農(nóng)產(chǎn)品消費大國，而農(nóng)產(chǎn)品安全問題是中國經(jīng)濟生活中的重大問題。為了提高農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)量，在農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)過程中使用農(nóng)藥、獸藥、飼料、添加劑、動物激素等，雖然確實增加了農(nóng)產(chǎn)品數(shù)量，但是農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題日漸突出。蔬菜和水果農(nóng)藥殘留物超標(biāo)、肉類獸藥殘留物超標(biāo)、激素類藥物超標(biāo)、飼料添加劑超標(biāo)等問題時有發(fā)生，對人們身體健康造成了嚴(yán)重的威脅。為了保證全民身體健康，農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量監(jiān)督檢查檢驗必須按照《中華人民共和國食品安全法》，按照國家地方行業(yè)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行嚴(yán)格檢驗。高效液相色譜法（HPLC）作為一種新型分析檢驗技術(shù)，在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測中起著重要的作用，具有高分離效果、快速、高靈敏度、高準(zhǔn)確度、自動化等優(yōu)點。高效液相色譜法（HPLC）在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全分析檢測領(lǐng)域已成為核心技術(shù)[2]。

1? ? 高效液相色譜技術(shù)

高效液相色譜法（HPLC）是20世紀(jì)60年代中后期發(fā)展起來的新型分離分析技術(shù)，是在經(jīng)典液相色譜的基礎(chǔ)上結(jié)合氣相色譜理論技術(shù)設(shè)計的新型技術(shù)，具有高效色譜柱、高壓輸液泵、高靈敏度檢測器。目前高效液相色譜在醫(yī)藥、化學(xué)化工、環(huán)保、生物等諸多領(lǐng)域成為重要的分離分析核心技術(shù)[3]。高效液相色譜法（HPLC）也稱為高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜或現(xiàn)代液相色譜[4]。該技術(shù)分離效率極高，檢測靈敏度可達到皮克數(shù)量級（10～12 g），配備計算機，數(shù)據(jù)自動處理，直接繪圖和打印分析檢測結(jié)果，可以對儀器的全部操作進行程序控制，操作簡單便捷。高效液相色譜儀是實現(xiàn)液相色譜分析的儀器設(shè)備[4-5]。

2? ? 高效液相色譜法在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中的應(yīng)用

2.1? ? 農(nóng)藥殘留物的檢測

農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用到的各類藥劑的總稱，谷物、蔬菜、水果、禽蛋及制品中經(jīng)常有殘留的農(nóng)藥，畜禽肉及其制品中也檢測到農(nóng)藥殘留物。隨著農(nóng)業(yè)和工業(yè)的快速發(fā)展，農(nóng)藥的種類和數(shù)量越來越多，用在農(nóng)產(chǎn)品中的量也越來越多，如殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、營養(yǎng)劑等。農(nóng)藥大部分屬于有機物，含磷、氯、氨基甲酸酯類、有機雜環(huán)類，比如甲胺磷、對硫磷、內(nèi)吸磷、乙酰甲胺磷、六六六、樂果、敵百蟲、馬拉硫磷、滴滴涕、七氯、艾氏劑、百草枯（除草劑）等。多數(shù)農(nóng)藥有毒性，對人體和動物有害。有的農(nóng)藥由于毒性大、選擇性差、殘留量大、生態(tài)危害大，是嚴(yán)令禁止使用的，但由于價格便宜仍會被使用。農(nóng)藥殘留物分析是農(nóng)藥研究與開發(fā)生產(chǎn)過程中必不可少的檢測控制手段，在安全生產(chǎn)和合理使用過程中意義重大。目前檢測農(nóng)藥的文獻報道較多，有氣相色譜法、紫外-可見光分光光度法、熒光分光光度法、高效液相色譜法等，其中高效液相色譜法靈敏度高、檢測準(zhǔn)確度高，同時可以完成大批量檢測。高效液相色譜法已成為農(nóng)藥檢測分析的核心技術(shù)，可以對農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留物進行有效檢測、有效控制[6]。

2.2? ? 獸藥殘留物的檢測

獸藥是動物在飼養(yǎng)過程中被攝入的抗生素類、抗菌類、抗寄生蟲類和殺蟲劑類藥品，獸藥殘留是指在飼養(yǎng)動物過程中由于沒有合理使用藥物，部分獸藥被分解或直接排除體外，另一部分獸藥留在了畜禽體內(nèi)[7]。獸藥主要有青霉素類、四環(huán)素類抗生素、磺胺類、喹諾酮類等，這些獸藥通過食物鏈在人體內(nèi)累積，對人體內(nèi)產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致胃腸道菌群失衡、免疫功能下降、過敏，還會致突變、致畸甚至致癌[8]，也會對環(huán)境造成影響，破壞生態(tài)環(huán)境，影響人們的生活質(zhì)量。因此，在飼養(yǎng)畜禽中，必須嚴(yán)格控制獸藥使用量，必須嚴(yán)格監(jiān)督檢測，以保證食品安全。目前檢測獸藥的方法很多，比如固-液萃取法、高效液相色譜法、分光光度法、液質(zhì)聯(lián)用法、毛細(xì)管電泳法、薄層色譜法、免疫分析法、氣相色譜法、微生物抑制分析法等[9-11]，其中高效液相色譜法應(yīng)用范圍較廣、檢測準(zhǔn)確度高。因此，在獸藥殘留物檢測中普遍采用該方法進行分析檢測。

2.3? ? 乳及乳制品中三聚氰胺的檢測

三聚氰胺是三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，化學(xué)式為C3N3（NH2）3，含氮量高達66%，是一種含氮雜環(huán)有機化工原料，可用于塑料、膠粘劑、涂料、餐具等領(lǐng)域[12]。三聚氰胺長期被攝入人體或動物體內(nèi)，影響到生殖系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)，危害健康。但不法分子為了提高乳及乳制品中的蛋白質(zhì)含量，在牛奶、奶粉中添加三聚氰胺冒充蛋白質(zhì)，如三鹿毒奶粉事件，對嬰兒身體產(chǎn)生了不可逆轉(zhuǎn)的危害。因此，乳及乳制品中三聚氰胺的檢測是非常重要的質(zhì)量安全檢測環(huán)節(jié)。檢測三聚氰胺的方法有高效液相色譜法、氣相色譜法、毛細(xì)管電泳法、近紅外光譜法等[13]。目前，主要采用高效液相色譜法檢測奶粉和牛奶中的三聚氰胺，該方法具有方法成熟、檢測誤差小、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點。在適宜的試驗條件下，三聚氰胺檢測限為0.005 μg/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4%，線性范圍為0.01～8.00 μg/mL [14]。

2.4? ? 激素殘留物檢測

在農(nóng)產(chǎn)品中加入激素是為了促進生長發(fā)育，達到少投入、多回報的目的。在畜禽飼養(yǎng)、植物和水果生長過程中加入激素類藥品會促使其生長、長肉、催熟等。農(nóng)產(chǎn)品中常見的激素為類固醇、氨基酸衍生物、丘腦激素、前列腺素、垂體激素、胃腸激素、降鈣素激素等[15]。激素（如瘦肉精，學(xué)名鹽酸克倫特羅）、催乳劑、催熟劑、性激素等廣泛用于家禽、豬、牛、水果、蔬菜中。激素容易在畜禽肉及肉制品、乳制品、水果、蔬菜中殘留，對人體產(chǎn)生危害，長期攝入時在體內(nèi)累積易引起心臟病、水鹽代謝紊亂、消化系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)并發(fā)癥、骨質(zhì)疏松及椎骨壓迫性骨折、精神異常、致畸、致突變、致癌，對人體危害非常大[15-16]。目前，我國已禁止在動物飼養(yǎng)中使用激素。農(nóng)業(yè)部第235號公告《動物性食品中獸藥最高殘留限量》中明確規(guī)定豬牛肉中激素殘留物限量[17]。激素殘留物檢測方法有2類，一類是色譜技術(shù)，另一類是免疫技術(shù)。色譜技術(shù)包括高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、薄層色譜法、氣相色譜-傅里葉變換紅外光譜聯(lián)用法、毛細(xì)管電泳法等;免疫技術(shù)主要包括放射免疫技術(shù)、酶聯(lián)免疫技術(shù)、試紙條檢測技術(shù)、免疫生物傳感器技術(shù)等[1]。其中，高效液相色譜法分析檢測結(jié)果更準(zhǔn)確，分析速度快，是在激素殘留物檢測中較成熟的一種檢測方法。據(jù)文獻報道，羅曉燕等[18]用高效液相色譜法測定畜禽組織中雌雄性激素殘留，結(jié)果顯示，線性關(guān)系良好，己烯雌酚的相關(guān)系數(shù)為0.999，檢出限為9.5 μg/kg，丙酸睪酮的相關(guān)系數(shù)為0.999 94，檢出限為8.4 μg/kg。

3? ? 結(jié)語

農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題既關(guān)系到中國十幾億人口的食品安全，又關(guān)系到出口產(chǎn)品的質(zhì)量安全問題。因此，必須做好農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作，按標(biāo)準(zhǔn)、按法規(guī)嚴(yán)格執(zhí)行質(zhì)量監(jiān)督檢查工作[19-20]。幾年來，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，檢測分析方法從傳統(tǒng)的化學(xué)分析法快速轉(zhuǎn)變?yōu)閮x器分析法[21]。目前，高效液相色譜法（HPLC）在農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量檢測方面技術(shù)方法成熟，操作過程實現(xiàn)了自動化，檢測速度快，檢驗結(jié)果更準(zhǔn)確、更精密。

4? ? 參考文獻

[1] 張玉廷，張彩華.農(nóng)產(chǎn)品檢驗技術(shù)[M].1版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2009：1-6.

[2] 許俊哲.高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗中的應(yīng)用分析[J].首都食品與醫(yī)藥，2019，26（2）：165.

[3] 王炳強.藥物分析[M].2版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：40-46.

[4] 高曉松.儀器分析[M].1版.北京：科學(xué)出版社，2009：285-293.

[5] 崔婷婷.高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)原理及其在輕工領(lǐng)域的應(yīng)用[J].輕工標(biāo)準(zhǔn)與量，2014（4）：78-80.

[6] 朱之烔，柳菡，寧倩倩，等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定蜂蜜中9種農(nóng)藥殘留[J].色譜，2019，37（1）：8-14.

[7] 劉巍.高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的運用[J].食品安全導(dǎo)刊，2018（30）：80.

[8] 王京，王慶齡，葉佳明，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定動物源食品中30種獸藥殘留[J].分析試驗室，2016，35（8）：955-960.

[9] 田夢.動物源性食品中獸藥殘留檢測方法分析[J].畜禽業(yè)，2018，29（12）：48.

[10] 宋偉，趙暮雨，韓芳，等.超高效液相色譜-四極桿飛行時間質(zhì)譜法測定克氏螯蝦中39種獸藥殘留[J].色譜，2018，36（12）：1261-1268.

[11] 馬青超.雞蛋中獸藥殘留的檢測方法及防控措施[J].現(xiàn)代畜牧科技，2017（8）：153.

[12] 陳旻實，劉偉，鄭思遠，等.高效液相色譜法檢測食品接觸材料中三聚氰胺的殘留量[J].福建分析測試，2012，21（5）：17-20.

[13] 曹倩，朱森森.三聚氰胺檢測方法簡述[J].廣州化學(xué)，2017，42（2）：77-81.

[14] ALI S Y，SAMANEH R Y，TAHEREH H，et al.Determination of melamine in soil samples using surfactant-enhanced hollow fiber liquid phase microextraction followed by HPLC-UV using experimental design[J].Journal of Advanced Research，2015，6（6）：957-966.

[15] 張敬敬，曹小妹，陳學(xué)武，等.畜產(chǎn)品中激素殘留檢測方法的進展[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2012，24（11）：1617-1623.

[16] 劉暢，李曉雯，王柯.高效液相色譜-四極桿-飛行時間質(zhì)譜法檢測豬肉中15種糖皮質(zhì)激素殘留[J].中國食品衛(wèi)生雜志，2016，28（2）：204-208.

[17] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.動物性食品中獸藥最高殘留限量（農(nóng)業(yè)部公告第235號）[Z].2002-12-24.

[18] 羅曉燕，林玉娜，劉莉治，等.固相萃取高效液相色譜法同時測定禽畜組織中雌雄性激素殘留的研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2005，15（4）：387-389.

[19] 陳新紅.淺析獸藥的使用和管理[J].中國城市經(jīng)濟，2011（8）：315.

[20] 劉英姿，潘博.農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與認(rèn)證[J].吉林農(nóng)業(yè)，2008（10）：14.

[21] 張國林，杜耀軍，馬偉.采用綜合措施加快畜禽標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)[J].山東畜牧獸醫(yī)，2003（2）：50-51.