季 斐 ,董 紅 ,毋狀元 ,羅永明 ,陳 童 ,劉武軍,鄭新寶
(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830052;
2.新疆畜牧科學(xué)院畜牧研究所,新疆 烏魯木齊 830011)
肉羊超數(shù)排卵是在母羊發(fā)情周期的適當(dāng)時間通過注射外源促性腺激素,減少卵巢中閉鎖卵泡數(shù)量,從而使卵巢上有比自然生理狀態(tài)下更多的卵泡發(fā)育并排卵。超數(shù)排卵是肉羊胚胎移植技術(shù)中的關(guān)鍵技術(shù)[1],但目前不同品種、不同個體對超數(shù)排卵效果很不穩(wěn)定,個體反應(yīng)差異極大。影響超數(shù)排卵效果因素通常認(rèn)為主要有兩大類:一類是動物因素(遺傳因素),主要包括個體的遺傳特性、生理狀態(tài)等;另一類是環(huán)境因素(非遺傳因素),包括外源性激素質(zhì)量和用量、體況、季節(jié)、年齡以及其它影響動物的環(huán)境因素[2,3]。因此,如何降低超數(shù)排卵的不穩(wěn)定性,是提高肉羊胚胎移植效率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。
本實驗擬比較供體的體重體尺指標(biāo)等方面對薩福克肉羊超排效果的影響,為進一步提高肉羊胚胎移植效率,加速品種改良,提高肉羊繁殖效率提供依據(jù)。
試驗動物為新疆天山畜牧生物工程股份有限公司種羊場飼養(yǎng)的薩??思兎N肉羊,年齡1.5~2.5周歲,超排前1個月,根據(jù)供體母羊膘情,進行補飼,每只母羊每天精料添至800 g、胡蘿卜200 g、苜蓿草4 kg,配備舔磚,精料中添加亞硒酸鈉等微量元素。進行必要的防、檢疫和驅(qū)蟲工作。共計超排157只供體。
促卵泡素(FSH)、促排三號(LHRH-A3)、前列腺素(PGF2α),寧波三生藥業(yè)有限公司生產(chǎn);胚胎保存液(Holding),美國AB公司生產(chǎn);沖卵液(PBS),自配。
1.3.1 體尺、體重測量
在超排處理前1 d,對每只供體母羊進行體尺測量并稱重。在測量過程中,供體保持被端正地站立在平坦的地面上,四肢垂直,左右兩側(cè)的前后肢要在同一條直線上,待測羊的同側(cè)前后肢也應(yīng)該成直線,頭部自然伸直。測量用器為測杖、卷尺。體尺是羊體的各部位長、寬、高、圍度等數(shù)量化的指標(biāo)。體高:自耆甲最高點垂直到地面的距離;體斜長:從肩端前緣至臀端后緣的距離;胸圍:肩胛后角處體軀的垂直周徑。體重測量:使被測羊站在平臺式地秤進行實測。質(zhì)量指數(shù)采取BMI公式:體重/(體斜長×體斜長)
1.3.2 超數(shù)排卵
供體羊采用促卵泡素(FSH)減量法進行超排。在綿羊發(fā)情周期的第9~12 d(以發(fā)情之日算第0 d),以遞減劑量每天早晚2次注射FSH,連續(xù)4 d,總劑量為10 mg/只。在超排第3 d注射1支前列腺素(PG),母羊發(fā)情后14 h,使用腹腔鏡子宮角輸精技術(shù)輸精,間隔10~12 h再輸精1次,同時注射促排卵素(A3)1支。供體母羊在發(fā)情后6.5 d進行手術(shù)法沖胚,并統(tǒng)計黃體數(shù)、回收胚胎數(shù)及可用胚胎數(shù)。
利用Excel對原始數(shù)據(jù)進行處理分析,采用SPSS 19.0軟件對整理后的測量記錄及沖胚結(jié)果進行相關(guān)性分析[4],計算相關(guān)系數(shù)。從體重體尺中篩選出與沖胚結(jié)果有相關(guān)性的指標(biāo),分組并描述統(tǒng)計,進行對比。
由表1可知,供體薩福克母羊體重、體斜長、體高、胸圍、質(zhì)量指數(shù)、腰圍身高比平均值分別為64.65 kg、84.79 cm、75.75 cm、105.58 cm、0.90、1.24。 沖胚結(jié)果中黃體數(shù)、回收胚胎數(shù)、可用胚胎數(shù)、可用胚率平均值分別為8.52個、8.45個、4.48個、51.18%。
表1 表型統(tǒng)計量
由表2可知,供體薩福克母羊的體重與各體尺指標(biāo)之間都顯示為極顯著的正相關(guān)關(guān)系(P<0.01),相關(guān)系數(shù)為體重與體斜長0.712、體重與體高0.669、體重與胸圍0.684、體重與質(zhì)量指數(shù)0.385、體重與腰圍身高比0.377;各指標(biāo)中,也都有著較強的相關(guān)性關(guān)系(P<0.01),相關(guān)系數(shù)為體斜長與體高0.701、體斜長與胸圍0.786、體斜長與質(zhì)量指數(shù)-0.362(負(fù)相關(guān))、體斜長與腰圍身高比0.276、體高與胸圍0.815、體高與腰圍身高比0.610、胸圍與腰圍身高比0.809,其中質(zhì)量指數(shù)與體高、胸圍和腰圍身高比的相關(guān)性并不顯著(P>0.05)。
表2 體重、體尺指標(biāo)與薩福克羊沖胚數(shù)據(jù)之間的相關(guān)系數(shù)
在體重體尺指標(biāo)中,只有體重與沖胚數(shù)據(jù)中的回收胚胎數(shù)之間呈顯著正相關(guān)(0.01<P<0.05),相關(guān)系數(shù)為0.176,其他體重體尺指標(biāo)與沖胚數(shù)據(jù)中的黃體數(shù)、可用胚胎數(shù)、可用胚率的相關(guān)性不顯著(P>0.05)。
將實驗群體按照不同體重范圍分為3組。由表3可知,不同體重組的黃體數(shù)、可用胚胎率的差異性并不顯著(P>0.05),但是回收胚胎數(shù)及可用胚胎數(shù)都以60~79 kg組顯著差別于39~59 kg組及80 kg以上組(0.01<P<0.05),可用胚率為 60~79 kg組的平均值最大。
表3 體重對薩福克羊超數(shù)排卵效果的影響
在對體重和體尺指標(biāo)方面的探究可知,體重與體斜長、胸圍及體高等數(shù)據(jù)的相關(guān)關(guān)系都十分顯著,體斜長、體高和胸圍等體尺數(shù)據(jù)對體重的綜合作用比較大。在體高、體斜長和胸圍等自變量里,每兩個自變量之間的相關(guān)性表現(xiàn)都為極顯著。這跟白俊艷等[5]對大尾寒羊,高志英等[6]對多浪羊,高曄等[7]對陜北白絨山羊,顧亞玲等[8]對白薩??搜?李少斌等[9]對高山細(xì)毛羊雜交一代,喇永富等[10]對湖羊等,在體重體尺指標(biāo)進行研究的結(jié)果有類似的地方。這表明薩??搜蚋黧w尺指標(biāo)和體重有著一定的聯(lián)系,選擇時要對各個性狀相應(yīng)的情況都加以考慮,以便得到最優(yōu)效果。
張鎖林等的探研表明,在35~70 kg之間,不同體重的羊的超排效果沒有明顯的不同[11]。代相鵬[12]的試驗結(jié)果也大致相同,用在超排方案和激素劑量一直的情況下,對供體羊超排,50~70 kg的結(jié)果差距不顯著。李太坤[13]的實驗對象則是30~50 kg的山羊,實驗結(jié)果顯示,雖然體重對超排效果的影響不顯著,但隨著供體母羊的體重增加,沖胚所得胚胎數(shù)有略微的增長。但是在楊昇[14]的實驗中,體重大于55 kg的波爾山羊超排后的可用胚數(shù)極顯著的高于體重在50~55 kg之間以及小于50 kg的兩組供體羊,并且這兩組體重在55 kg以下的供體羊之間的胚胎數(shù)差異不顯著。
有研究報道[15],在超排注射的激素完全相同的情況下,體重略輕的供體卵巢發(fā)育比較健全,排卵或未排卵的卵泡顯著增多,并且體重在一定范圍內(nèi),排卵數(shù)與體重成正相關(guān)。但是體重過重的供體排卵或未排卵的卵泡不但不會增多,而是減少,所以當(dāng)供體的體重過重或者過輕時,超排效果都不會很理想。張鎖林等表示,體重是供體體況的一個重要參數(shù),而體況則影響了垂體對GnRH的反應(yīng)性,體況太差時,供體會減少分泌促性腺激素,導(dǎo)致卵巢發(fā)育不良,影響到排卵的數(shù)量。
而本實驗從體重分組方面看,60~79 kg組與39~59 kg組的供體羊可用胚數(shù)及回收胚數(shù)有著明顯的差距,后者可用胚及可用胚率為最低。雖然80 kg以上組回收胚數(shù)相對較多,但比60~79 kg組可用胚率相對較低,說明作為肉用供體綿羊體重在60~79 kg之間進行超數(shù)排卵效果較好。因此,在薩??斯w羊的選擇上,體重的選擇范圍也是一個主要參考因素。
試驗表明,體重為影響薩??搜虺判Ч囊蛩刂?。在本次試驗中,薩??搜虻某判Ч^理想的體重范圍在60~79 kg之間。