李可成

[摘要] 血小板檢測是研究凝血與止血功能的重要指標之一，也是手術(shù)前必要檢查項目，因此血小板檢測結(jié)果是否準確，不僅會對出血性疾病患者、血栓性疾病患者的診斷結(jié)果產(chǎn)生影響外，還會決定其治療結(jié)果。當前，臨床在對血小板組織進行計數(shù)時，通常會對多種血液分析設(shè)備聯(lián)合應(yīng)用，并以電阻抗法為主要計數(shù)原理，然而該方案往往會受多種因素影響，其中又以血小板組織、大血小板組織、小血小板組織以及小紅細胞組織的體積方面表現(xiàn)出差異大的特征，針對此情況，為了保證血小板計數(shù)結(jié)果的準確性，近年來光學法血小板計數(shù)被逐漸應(yīng)用到檢測活動當中去，效果突出。

[關(guān)鍵詞] 全自動血液分析儀;血小板;檢測;影響因素

[中圖分類號] R446.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2019）01（a）-0173-02

全自動生化分析儀及醫(yī)療設(shè)備在我國各級醫(yī)院被廣泛使用，并在臨床診斷中提供了快捷準確的結(jié)果，使得常規(guī)檢測更加方便、快捷。然而在儀器的操作過程中，由于醫(yī)務(wù)人員沒有深入了解儀器的原理，也沒有熟練掌握儀器的性能，導致全自動生化分析儀的檢測結(jié)果存在一定誤差[1]。全自動生化分析儀是應(yīng)用吸引探針來抽取適量的樣品進行準確的檢驗后送入混勻腔，再混同稀釋液共同流入轉(zhuǎn)換器，再利用轉(zhuǎn)換器根據(jù)流程檢驗白細胞、血紅蛋白和抗體和血小板的所有參數(shù)，對于前兩種指標的分析，將前兩者的溶血劑放入測量室，首先進行稀釋和溶解紅細胞，然后溶血劑會出現(xiàn)10 s的化學反應(yīng)，在此過程中紅細胞被溶解生成血紅蛋白，并形成紅色甲基血紅蛋白，血細胞沒有任何變化。另外，運用dc細胞流式檢測器檢可以檢驗白細胞的數(shù)量及大小，在血紅蛋白的檢驗過程中，可使用光度計分析血蛋白濃度。在后兩者指標的檢測中，將檢驗后的成分從測量室轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)換器中，且大小和數(shù)量紅血球為主計算，運用流式細胞儀法可對血小板進行分析[2]。全自動生化分析儀主要應(yīng)用電容法和光電比色法的原理，而且輕易受多種因素的影響[3]。筆者就自身研究結(jié)果作如下綜述。

1? 不同計數(shù)標準對血小板指數(shù)產(chǎn)生的影響

近年來，血小板專業(yè)計數(shù)工作中，以全自動血液分析設(shè)備進行計數(shù)時，其計數(shù)方法有電阻抗法和光學法。

1.1? 電阻抗法

當體積大小不等的血細胞通過儀器計數(shù)小孔時，引起小孔內(nèi)、外電流和電壓的變化，形成與血細胞數(shù)量相當，體積大小相應(yīng)的脈沖變化，從而間接地區(qū)分出血細胞。但由于其檢測原理的局限性，結(jié)果易受多種因素影響，使血小板結(jié)果假性增高[4]。

申巖梅[1]對血液分析儀RT-7600血小板計數(shù)的準確性研究認為設(shè)備能夠?qū)κ軝z對象身體中的血小板組織以及紅細胞組織等進行明確劃分，然而如果紅細胞組織的計數(shù)尚未達到55fl，而以電阻抗法對其展開專業(yè)計數(shù)，其計數(shù)結(jié)果通常會異常上升，表明機體紅細胞組織體積不足55fl時，設(shè)備會對其計數(shù)結(jié)果形成干擾因素，而且如果血小板組織直方圖出現(xiàn)不規(guī)則性特征，電阻抗法產(chǎn)生的計數(shù)值也會呈現(xiàn)出升高跡象[5-7]。而CD-1700血細胞分析設(shè)備則強調(diào)采用電子阻抗原理，血小板和紅細胞是在同一個檢測系統(tǒng)中通過顆粒大小來加以識別的，血小板與紅細胞測量的信號常有交叉，小紅細胞的脈沖信號可能視為血小板信號造成實驗誤差，而致血小板計數(shù)的假性增高[8]。

所以目前使用的血液分析儀，只要是用電阻抗法檢測血小板，都會存在血小板假性增高的問題。

1.2? 光學法

其應(yīng)用原理是：當激光對紅細胞組織、血小板組織進行充分照射時，紅細胞組織中血紅蛋白成分的濃度偏高，所以對于激光產(chǎn)生的折射指數(shù)也會相對偏高，一旦有紅細胞組織的殘骸、大血小板組織、紅細胞組織碎片等出現(xiàn)，盡管其體積表現(xiàn)出相似性特征，然而由于內(nèi)容物方面存在差異，所以對于激光產(chǎn)的折射指數(shù)也會存在巨大差異[9]。

ADVIAl20全自動六分類血細胞分析儀，由于采用了血細胞等滲球形化和兩維激光掃描等檢測原理，基本上排除了對血小板檢測的各種影響因素，從而也達到了血小板檢測快速，王德春[5]對該儀器檢測血小板的性能特點作了系統(tǒng)探討，認為其檢測的重復性及相關(guān)性非常好;具有較寬的和很好的線性范圍;攜帶污染僅為0.25%，是目前檢測血小板最為理想的儀器之一。巫小莉[6]利用德國拜耳ADVIA2120二維激光法和美國雅培CD3700電阻法血小板計數(shù)進行比較研究認為，在病理情況下的大血小板、小紅細胞，特別是臨界值的血小板計數(shù)，電阻法結(jié)果差異較大，而二維激光法更接近手工法所檢測結(jié)果，計數(shù)結(jié)果比較準確、可靠。同樣，王曉賢[7]等利用Sysmex XT-4000i對電阻法和光學法檢測血小板進行評估，也認為光學法在對小紅細胞、紅細胞碎片和大血小板各組檢測中，血小板組織的計數(shù)結(jié)果也會比電阻法更為精確[10-16]。

光學法盡管能降低小紅細胞組織、紅細胞組織碎片和大血小板等因素對血小板計數(shù)的影響，但是也存在一定的局限性，當血小板聚集時卻無法消除其對血小板計數(shù)的影響[17]。

2? 異常形態(tài)血液細胞對血小板計數(shù)的影響

2.1? 紅細胞對血小板的影響

如果全自動血細胞分析儀采用電阻抗法檢測時，它根據(jù)顆粒的大小來區(qū)別細胞，紅細胞和血小板同在一個檢測通道，儀器把2～30 fl范圍的細胞判定為血小板，而將25～250 fl范圍的細胞判定為紅細胞，因而紅細胞與血小板之間存在計數(shù)的交叉區(qū)域。有研究認為當MCV<70 fl 時或 MCV為70～81.9 fl而RDW>14.5%巨大血小板，小紅細胞可干擾血小板計數(shù)[8]。葉長欽[9]等報道實驗MCV<70 fl的紅細胞會引起血小板計數(shù)假性增高;而MCV為70～81.9 fl的組中，紅細胞分布寬度（RDW）大于正常者血小板計數(shù)假性增高，RDW正常者對結(jié)果影響不大。當MCV在65～70 fl之間時，血細胞分析儀與鏡檢法之間血小板計數(shù)結(jié)果無照著性差異，但當MCV<65 fl時，因有多量的小紅細胞存在，大部份體積很小的紅細胞被計入血小板內(nèi)，而導致血小板數(shù)量假性增高，兩種方法之間具有明顯差異性[18-19]。

地中海貧血是遺傳性血紅蛋白病，屬于是小細胞低色素貧血。張?zhí)炖实萚11]認為攜帶地貧基因時，紅細胞體積要顯著低于正常對照組。與對照組相比，采前和采后手工計數(shù)血小板均要高于自動計數(shù)，平均相差達19.3%。這是由于小體積的紅細胞在自動計數(shù)時會被誤判為血小板，造成血小板計數(shù)假性增高。說明紅細胞的大小與分布度對血小板計數(shù)有直接的影響[20-21]。

紅細胞碎裂如果用電阻抗法同樣也會引起血小板的假性增高[22]。

2.2? 血小板聚集

臨床所用抗凝劑以EDTA鹽為主，但是卻可能會有PLT聚集情況出現(xiàn)，以至于對EDTA-K2進行應(yīng)用時，PLT值假性偏低情況十分普遍，表明對于血小板聚集時，無論是電阻法還是光學法血小板計數(shù)都無法得到可靠準確的結(jié)果，此時就得依靠傳統(tǒng)的手工復檢來糾正血小板的數(shù)量[23-24]。

2.3? 對血小板計數(shù)的異常糾正

由于諸多因素對血小板計數(shù)的準確性有影響，所以各個不同廠商都在擾儀器上的有不同的改進。日本東亞Sysmex-9000該儀器中含有專業(yè)浮動界標裝置，利用機內(nèi)計算機在血小板的計數(shù)范圍內(nèi)尋找直方圖的最低點，以此定為紅細胞與血小板的量限。同時，通過對血細胞分析設(shè)備充分利用，在對機體紅細胞組織以及血小板組織等進行準確計數(shù)時，往往要在相同通道條件下，對機體體內(nèi)顆粒組織的整體體積準確計算、鑒別，以此形式即可獲取到檢測值，雖然還會有小紅細胞組織始終存在，但不會對血小板組織計數(shù)結(jié)果的測定結(jié)果帶來影響[25]。

3? 結(jié)語

在全自動血液分析儀飛速發(fā)展的今天，傳統(tǒng)的手工法正逐漸容易被檢驗人員淡忘，儀器計數(shù)只是一種過篩手段，對于異常標本，必須進行光學法或者手工法復核。

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（收稿日期：2018-09-25）