楊鳳琴 王耀榮 呂如

【摘要】目的 對熒光定量PCR法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙型肝炎病毒的應(yīng)用價值進(jìn)行研究。方法 選取于2013年1月～2017年2月在獻(xiàn)血中發(fā)現(xiàn)的100例乙型肝炎病毒攜帶者作為研究對象，使用熒光定量PCR法和ELISA 法檢測研究對象血漿標(biāo)本的HBV DNA 和血清學(xué)標(biāo)志物，然后對結(jié)果進(jìn)行比較分析。結(jié)果 在乙肝標(biāo)志物為陽性的各組患者中均發(fā)現(xiàn)不同程度的病毒DNA復(fù)制。大三陽的陽性率為96%、HBV DNA 拷貝數(shù)平均值為3.13×108；小三陽的陽性率為86.6%，HBV DNA拷貝數(shù)平均值為5.87×105；HBeAg與HB-sAb的陽性率為51.0%，HBV DNA拷貝數(shù)平均值是2.31×104，除此之外的血清標(biāo)志物陽性組合的陽性率比較低，HBV DNA拷貝數(shù)平均值也不高。可見，大三陽的陽性率與HBV DNA含量是最高的，同其余各組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 熒光定量PCR法檢測乙型肝炎病毒具有更高的可靠性和敏感度，能夠?qū)BV感染和復(fù)制狀態(tài)進(jìn)行真實反映，對乙型肝炎早期診治、傳染性判斷，及預(yù)后監(jiān)測質(zhì)量具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】熒光定量PCR法；酶聯(lián)免疫吸附法；乙型肝炎

【中圖分類號】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2019.13..01

乙肝病毒是我國重要的傳染性疾病，具有較高的發(fā)病率，是不容忽視的公共衛(wèi)生問題。若長期攜帶乙肝病毒，極易誘發(fā)肝硬化和肝衰竭等疾病，對患者生命健康帶來嚴(yán)重威脅。隨著抗病毒藥物的不斷推出，HBV變異株數(shù)量增加，使得血清學(xué)檢測更加困難，準(zhǔn)確性和敏感性都受到影響[1]。近幾年，生物技術(shù)發(fā)展使得HBV檢測克服了傳統(tǒng)PCR技術(shù)的缺陷。本次研究對熒光定量PCR法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙型肝炎病毒的應(yīng)用價值進(jìn)行研究，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年1月～2017年2月在獻(xiàn)血中發(fā)現(xiàn)的100例乙型肝炎病毒攜帶者作為研究對象，所有研究對象年齡18～56歲，其中有女32例，男68例。

1.2 方法

確保無菌條件下對獻(xiàn)血者血液進(jìn)行采集，采集靜脈血

5 mL，在溫度為4攝氏度的冰箱中放置2小時后將血清分離進(jìn)行檢測。將S/CO超過15且HBsAg篩查為有反應(yīng)性的獻(xiàn)血者血漿挑出，運用ELISA檢測方法對血清標(biāo)志物表面抗體和抗原、e抗體和e抗原、核心抗體進(jìn)行檢測；使用熒光定量PCR法檢測乙型肝炎病毒的DNA。上述操作均按照說明書要求嚴(yán)格執(zhí)行，并按試劑說明書標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

使用統(tǒng)計學(xué)軟件15.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。用%表示不同方法測得的陽性率，用平均值表示拷貝數(shù)，數(shù)值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行表示，對兩組間數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗，P<0.05，表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 熒光定量PCR檢測乙型肝炎DNA和ELISA的檢查結(jié)果

在乙肝標(biāo)志物為陽性的各組患者中均發(fā)現(xiàn)不同程度的病毒DNA復(fù)制。其中，HBsAg陽性血清有69例，其中

HBV DNA呈陽性的有56例，所得到的陽性檢測率為81.2%；對67例HBV DNA陽性血清運用ELISA法進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有39例呈陽性，所得到的結(jié)果是熒光定量PCR的58.2%。本次研究大三陽的陽性率達(dá)到96%、乙肝病毒DNA拷貝數(shù)的平均值為3.12×108；小三陽的陽性率為86.6%，

H乙肝病毒DNA拷貝數(shù)的平均值是5.88×105，除此之外的血清標(biāo)志物陽性組合的陽性率比較低，HBV DNA拷貝數(shù)平均值也不高[2]?？梢?，大三陽的陽性率與HBV DNA含量是最高的，同其余各組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

3 討 論

HBeAg是反應(yīng)人們血液傳染性與否的重要指標(biāo)，HBsAg是檢測乙肝攜帶者的主要指標(biāo)。大三陽包括HBcAb、HBsAg和HBeAg （三項呈陽性），是對患者體內(nèi)乙肝病毒高傳染性和復(fù)制率的反映。本次研究顯示：大三陽的陽性率為96%、HBV DNA拷貝數(shù)平均值為3.13×108，這就說明熒光定量PCV法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙肝病毒復(fù)制方面具有較好的效果，能夠準(zhǔn)確判斷出患者是否處于乙肝病毒感染時期（這一結(jié)果同胡慶宏等人的研究結(jié)果相一致）；小三陽的陽性率為86.6%，HBV DNA 拷貝數(shù)平均值為5.87×105，小三陽的乙肝病毒DNA含量低于大三陽組，HBeAb轉(zhuǎn)陽與HBeAg轉(zhuǎn)陰就代表小三陽患者處于恢復(fù)期，但是患者體內(nèi)仍有乙型肝炎病毒的DNA復(fù)制；HBeAg與HB-sAb的陽性率為51.0%，HBV DNA拷貝數(shù)平均值是2.31×104，除此之外的血清標(biāo)志物陽性組合的陽性率比較低，HBV DNA拷貝數(shù)平均值也不高?？梢?，大三陽的陽性率與HBV DNA含量是最高的，

同其余各組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，熒光定量PCR法檢測乙型肝炎病毒具有更高的可靠性和敏感度，能夠?qū)BV感染和復(fù)制狀態(tài)進(jìn)行真實反映，對乙型肝炎早期診治、傳染性判斷，及預(yù)后監(jiān)測質(zhì)量具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 高東旗，喬 楊，趙景平，等.某部乙型病毒性肝炎病例調(diào)查及感染危險因素[J].解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2016，（06）：795.

[2] 朱明巖，葉 英.不同熒光定量PCR技術(shù)在乙型肝炎病毒檢測中的應(yīng)用評價[J].安徽醫(yī)藥，2016，（09）.

本文編輯：趙小龍