鄧艷，羅輯，蔣學(xué)建，常明山，吳耀軍，李德偉

（1.廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院 南寧市 530002；2.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院甘蔗研究所 南寧市 530007）

赤眼蜂（Trichogrammaspp.） 屬膜翅目小蜂總科赤眼蜂科赤眼蜂屬，是一種寄生在昆蟲卵內(nèi)的寄生蜂。其成蟲將卵產(chǎn)在寄主卵內(nèi)，使寄主卵不能孵化，從而達(dá)到消滅害蟲的目的[1,2]。因此，赤眼蜂是許多農(nóng)林害蟲的重要天敵，也是世界范圍內(nèi)害蟲生物防治中研究最多、應(yīng)用最廣的一類卵寄蜂[3]。赤眼蜂的發(fā)現(xiàn)距今已有100多年，我國(guó)從20世紀(jì)30年代開始便對(duì)赤眼蜂進(jìn)行應(yīng)用研究，從1934年祝汝佐、胡永錫在浙江省湯溪縣從松毛蟲卵內(nèi)發(fā)現(xiàn)了赤眼蜂[4]到70年代止，蒲蟄龍等對(duì)赤眼蜂的寄主、人工大量繁殖及田間散放效果等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究[5]。80年代后，我國(guó)赤眼蜂研究和應(yīng)用技術(shù)得到了進(jìn)一步加強(qiáng)，赤眼蜂分類、行為、生理生態(tài)以及人工寄主卵的應(yīng)用方面進(jìn)行了大量的工作[6-12]。隨著可持續(xù)農(nóng)業(yè)的發(fā)展及無公害綠色食品業(yè)的要求的不斷提高，這種以天敵為主的生物防治技術(shù)越來越被廣大農(nóng)民所接受。

暗黑赤眼蜂（Trichogramma pintoi）是一種很有利用價(jià)值的天敵，可用于棉鈴蟲、草地螟、地老虎、小卷蛾等多種農(nóng)林害蟲進(jìn)行生物防治[13-17]。山西省運(yùn)城地區(qū)農(nóng)科所對(duì)暗黑赤眼蜂生物學(xué)特征和寄生棉鈴蟲情況進(jìn)行了調(diào)查觀察[18]；王輔成、張梳儀對(duì)孤雌生殖產(chǎn)兩性子代的暗黑赤眼蜂進(jìn)行了研究[19]；馬德英等對(duì)暗黑赤眼蜂防治新疆棉鈴蟲進(jìn)行了試驗(yàn)初報(bào)，并對(duì)短期冷藏對(duì)不同品系暗黑赤眼蜂的影響進(jìn)行了研究[15,20]；田曉霞等在我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)暗黑赤眼蜂寄生草地螟卵[16]；沈健，許建軍等進(jìn)行了紫外處理梨小食心蟲卵對(duì)暗黑赤眼蜂寄生和羽化的影響觀察及暗黑赤眼蜂對(duì)梨小食心蟲卵的寄生作用研究[14,17]。2008年，我們?cè)诩t樹林桐花樹上采集到一種寄生于桐花樹主要害蟲桐花樹毛顎小卷蛾的卵上的卵寄生蜂，經(jīng)專家鑒定為暗黑赤眼蜂。然而對(duì)于暗黑赤眼蜂的人工繁殖技術(shù)除仵均祥等介紹了一種利用梨小食心蟲卵室內(nèi)繁殖暗黑赤眼蜂的方法外沒有見其他報(bào)道，而且該方法難以規(guī)?；a(chǎn)并應(yīng)用于害蟲生物防治。本文將陳述以米蛾（Corcyra cephalonica）卵作為中間寄主的方法對(duì)暗黑赤眼蜂的室內(nèi)繁殖技術(shù)。

1 種蜂的采集與純化

1.1 種蜂的采集

在紅樹林桐花樹毛顎小卷蛾成蟲產(chǎn)卵高峰期，大量采集帶有其卵粒的紅樹林葉片，帶回實(shí)驗(yàn)室內(nèi)室溫放置，7 d內(nèi)變黑的卵粒判定為被寄生的卵粒。將被寄生的卵粒置于直徑30 mm、長(zhǎng)20 cm的大試管中，用棉花塞塞住管口。

1.2 種蜂的擴(kuò)繁

在收集蜂種的大試管中有暗黑赤眼蜂時(shí)接入1張米蛾卵卡，同時(shí)放入掃有10%蜂蜜水的濾紙條給種蜂補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。接種完成后，將所有已接入卵卡的繁蜂管用托盤裝著并用黑布覆蓋遮光，然后移入繁蜂室內(nèi)產(chǎn)卵，繁蜂室室內(nèi)控制溫度為25～28℃，相對(duì)濕度為70%～85%。寄生擴(kuò)繁后作為繁育暗黑赤眼蜂的繁殖種蜂。飼養(yǎng)期間每年更新一次蜂種最佳。

1.3 保存技術(shù)

接種后的米蛾卵卡立放于小盒內(nèi)并移入繁蜂室內(nèi)繼續(xù)繁育4～5 d，待米蛾卵轉(zhuǎn)黑后放入3～5℃的冰箱中進(jìn)行短期保存，用蜂時(shí)提前4～7 d從冰箱拿出置于繁蜂室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)后的蜂卡可用于擴(kuò)繁或用于害蟲生物防治。

2 中間寄主的準(zhǔn)備

2.1 中間寄主飼料的準(zhǔn)備

A飼料的原料成份及重量份數(shù)：粗麥麩50份、玉米粉40份、面粉10份和水5份；

A飼料的制備：先將粗麥麩、玉米粉、面粉放入消毒柜中加熱，溫度保持60～90℃消毒4～5 h，以殺死飼料中的病菌、害蟲、害螨及其卵，再將粗麥麩和水充分拌勻，然后加入玉米粉和面粉再充分拌勻得到A飼料；

B飼料的原料成份及重量份數(shù)：粗麥麩50份、玉米粉40份、面粉5份、魚粉3份、酵母粉2份和水5份。

B飼料的制備：先將粗麥麩、玉米粉、面粉、魚粉放入消毒柜中加熱，溫度保持60～90℃消毒4～5h，以殺死飼料中的病菌、害蟲、害螨及其卵，再將粗麥麩和水充分拌勻，然后加入玉米粉、面粉、魚粉和酵母粉一起再充分拌勻得到B飼料。

2.2 中間寄主的飼養(yǎng)條件和方法

2.2.1 中間寄主幼蟲的管理

在塑料筐（615 mm×400 mm×125 mm）中先鋪一層約1 cm的A飼料，在飼料上均勻?yàn)⑸厦锥攴N卵，然后再飄灑一層剛好覆蓋卵粒的面粉層，置于米蛾飼養(yǎng)室內(nèi)飼養(yǎng)，米蛾飼養(yǎng)室控制室內(nèi)溫度為25～28℃，相對(duì)濕度為60%～85%。待孵化后的幼蟲食出密密麻麻的小孔后開始投食，在接種前15 d投放A飼料，之后投放B飼料，每3～5 d投1次料，直至幼蟲化蛹。2.2.2 中間寄主成蟲的收集

米蛾幼蟲在飼養(yǎng)框內(nèi)飼養(yǎng)，米蛾成蟲在蓋有框蓋的飼養(yǎng)框內(nèi)羽化后有大量攀附于框蓋上的特點(diǎn)，收集時(shí)可以將攀附有大量米蛾成蟲的集蛾框蓋輕緩移至支架上方，將集蛾框蓋對(duì)準(zhǔn)集蛾漏斗，然后用集蛾框蓋邊框輕敲壓框，攀附于集蛾框蓋上的米蛾成蟲墜落到集蛾漏斗內(nèi)，并通過連管滑入到產(chǎn)卵籠內(nèi)。收集完一個(gè)飼養(yǎng)框集蛾框蓋上的成蟲后再進(jìn)行下一集蛾框蓋的操作。產(chǎn)卵籠內(nèi)成蟲達(dá)到一定數(shù)量時(shí)拔出連管，蓋上籠蓋板，放入收集卵粒的容器內(nèi)產(chǎn)卵。

2.2.3 寄主卵的收集

蛹羽化后每天收集成蟲置于產(chǎn)卵籠中產(chǎn)卵，產(chǎn)卵籠置于塑料筐中，待成蟲交配產(chǎn)卵后收集產(chǎn)卵籠及塑料筐中的米蛾卵，收集到的米蛾卵部分直接用于米蛾的繁殖，剩余部分做好標(biāo)記放入3～5℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2.4 寄主卵的殺胚消毒

將收集去雜的米蛾卵平鋪于塑料托盤內(nèi)，保證所有的卵均為單層。將其置于30 w紫外燈下照射50～60 min。照射期間用遮光布覆蓋燈管與托盤，減少紫外線及臭氧外漏。

3 蜂卡的生產(chǎn)技術(shù)

在繁蜂室內(nèi)將1張赤眼蜂繁殖種蜂卡放入繁蜂管中，繁蜂管為直徑30 mm、長(zhǎng)20 cm的大試管，用棉花塞塞住管口，待種蜂卡上60%～70%的蜂羽化時(shí)根據(jù)種蜂數(shù)量接入4張米蛾卵卡到繁蜂管內(nèi)讓赤眼蜂寄生，同時(shí)放入掃有10%蜂蜜水的濾紙條給種蜂補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。接入卵卡時(shí)管口的另一端對(duì)光，以防種蜂逃出。接種完成后，將所有已接入卵卡的繁蜂管用托盤裝著并用黑布覆蓋遮光，然后移入繁蜂室內(nèi)產(chǎn)卵，繁蜂室室內(nèi)控制溫度為25～28℃，相對(duì)濕度為70%～85%。接種8～14 h后在接種室內(nèi)以同樣的接種方法換入4張新的米蛾卵卡，這樣每張繁殖種蜂卡可擴(kuò)繁8張蜂卡。

4 效果測(cè)定

4.1 米蛾繁殖效果測(cè)定

使用上述方法飼養(yǎng)2批次米蛾，記錄米蛾卵主要收集天數(shù)以及米蛾卵總收集量，根據(jù)米蛾接種量和產(chǎn)卵量計(jì)算繁殖倍數(shù)。

通過對(duì)2個(gè)批次每批次30筐的米蛾飼養(yǎng)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)（見表1）表明：在大批量生產(chǎn)的條件下，每筐接種米蛾卵1.2 ml進(jìn)行飼養(yǎng)。在批量生產(chǎn)中由于人力成本等原因，成蟲大量羽化的前期和后期每筐出蛾量少，沒有收蛾。在主要收集時(shí)間中，2批次30筐米蛾分別收集到1 625 ml和1 680 ml卵，繁殖倍數(shù)分別為45.1倍和46.7倍。

表1 米蛾卵收集效果

4.2 暗黑赤眼蜂寄生率測(cè)定

取已寄生的蜂卡，將其按長(zhǎng)度平均分成4份，隨機(jī)挑選其中1份，在體視鏡下統(tǒng)計(jì)寄生及未被寄生卵粒數(shù)。黑色卵粒判定為已寄生卵粒，黃色卵粒判定為未被寄生卵粒。寄生率=已寄生卵粒數(shù)／總卵粒數(shù)。隨機(jī)選取5張蜂卡進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算平均寄生率。

5張蜂卡卵粒數(shù)相近，均為3 200粒左右。寄生率均在89%以上，最高達(dá)93.48%。平均寄生率為91.20%（見表2）。寄生率指標(biāo)達(dá)到了一級(jí)產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)[21]。

表2 以米蛾卵繁殖暗黑赤眼蜂的寄生情況

5 結(jié)論與討論

赤眼蜂的繁殖主要過程是中間寄主米蛾的規(guī)模化飼養(yǎng)，這是一套系統(tǒng)化操作過程，包括飼料的原料選擇、消毒、配制，米蛾飼養(yǎng)環(huán)境溫、濕度的控制，飼養(yǎng)環(huán)境的消毒，米蛾天敵的預(yù)防，米蛾成蟲的收集，交配產(chǎn)卵的環(huán)境控制等。在其中間寄主米蛾繁殖中在幼蟲飼料中添加魚粉、酵母粉可使米蛾成蟲羽化更整齊，產(chǎn)卵量更高。在前期的研究中，飼養(yǎng)米蛾的飼料中未添加魚粉和酵母粉，發(fā)現(xiàn)其收卵時(shí)間明顯比較長(zhǎng)（表3），這說明其發(fā)育不如用新配方飼料飼養(yǎng)的整齊，成蟲羽化高峰期更長(zhǎng)。另外，成蟲產(chǎn)卵量也較低（表3），繁殖倍數(shù)只有40倍左右，比新配方飼料飼養(yǎng)的米蛾繁殖倍數(shù)低11.9%。

表3 未添加魚粉和酵母粉飼料飼養(yǎng)米蛾卵收集效果

然而在滿足營(yíng)養(yǎng)需要的情況下，相對(duì)于飼料的因素，飼養(yǎng)的環(huán)境管理與方法可能對(duì)米蛾的繁殖更重要。在同樣以100%米糠作為飼料，張俊杰等以多次投料飼養(yǎng)米蛾的繁殖倍數(shù)高達(dá)156.92倍[22]；而朱滌芳等用小瓶飼養(yǎng)的繁殖倍數(shù)為60.02倍[23]；張玉琢等人飼養(yǎng)的米蛾繁殖倍數(shù)為94.7倍[24]；陳新以100%米糠作為飼料，以1次投料的養(yǎng)殖方法飼養(yǎng)繁殖倍數(shù)為53.7倍，以2次投料的養(yǎng)殖方法飼養(yǎng)繁殖倍數(shù)為53.4倍，以多次投料的養(yǎng)殖方法飼養(yǎng)繁殖倍數(shù)為29.6倍[25]。這些實(shí)驗(yàn)在相同的飼料配方下繁殖倍數(shù)差異明顯，可見飼養(yǎng)過程對(duì)米蛾繁殖倍數(shù)的影響很重要。邱式邦等曾研究和改進(jìn)米蛾的飼養(yǎng)技術(shù)，用麥麩加10%的玉米面作飼料飼養(yǎng)米蛾繁殖倍數(shù)為49.8倍，以麥麩為主的配方明顯比以米糖為主的配方繁殖倍數(shù)高[26]，然而張玉琢等人試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)用米糠作飼料，可以獲得比麥麩更多的卵量[24]。從以上的文獻(xiàn)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，各研究人員獲得的結(jié)果不盡相同，這可能是由于米蛾飼養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，過程中室外的大氣候變化會(huì)影響到室內(nèi)的氣候變化，飼養(yǎng)條件不同都會(huì)產(chǎn)生不同的結(jié)果。本文的配方及飼養(yǎng)技術(shù)下規(guī)?；曫B(yǎng)米蛾的觀察結(jié)果與邱式邦等報(bào)道的結(jié)果相似，繁殖倍數(shù)為40～50多倍。達(dá)到了規(guī)模化飼養(yǎng)米蛾的要求。

暗黑赤眼蜂是一類寄主廣泛的寄生性天敵昆蟲，可利用于多種農(nóng)林害蟲的生物防治。本技術(shù)在擴(kuò)繁時(shí)用大試管繁蜂使暗黑赤眼蜂的平均寄生率達(dá)90%以上，寄生率指標(biāo)達(dá)到了一級(jí)產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)。本方法以米蛾為中間寄主繁殖暗黑赤眼蜂不需用大型儀器，管理要求不高，所用的繁殖材料也容易取得，操作簡(jiǎn)單，實(shí)用性強(qiáng)，適于應(yīng)用和推廣，具有較好的社會(huì)效益。