何秋瑜 陳志青 鄒勇文

病毒性腹瀉(viral diarrhea)又稱病毒性胃腸炎，由一組多種病毒感染引起的急性胃腸道疾病，廣泛存在并流行于世界各地，發(fā)展中國家尤為嚴重[1]。腹瀉病已成為一個重要的公共衛(wèi)生問題，據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全球每年約有17億例兒童期腹瀉病，每年共有52.5萬名兒童死于此病，腹瀉病是五歲以下兒童的第二大死因[2]。輪狀病毒(rotavirus，RV)和諾如病毒(norovirus，NV)是引起病毒性腹瀉最主要的病原[3]。為了解梅州市腹瀉患者中NV和RV感染情況和流行趨勢，掌握其發(fā)病的重點人群、高發(fā)季節(jié)等，以便采取有針對性的防控措施?，F(xiàn)對梅州市2012-2017年腹瀉患者進行NV和RV分型檢測，為梅州市病毒性腹瀉的預防控制提供參考。

1 材料與方法

1.1樣本來源 采集監(jiān)測門診(包括消化內(nèi)科、腸道門診、兒科和急診科)中符合“腹瀉病例”監(jiān)測定義的病人糞便標本和/或嘔吐物標本，開展諾如病毒(GI、GII)核酸檢測與輪狀病毒抗原檢測。兩家監(jiān)測哨點分別是梅州市婦幼保健院(今稱“梅州市婦女兒童醫(yī)院”)和梅縣人民醫(yī)院(今稱“中山大學附屬第三醫(yī)院粵東醫(yī)院”)。

1.2儀器與試劑 儀器：ABI 7500 fast PCR儀。試劑：諾如病毒核酸檢測采用試劑為核酸提取試劑盒為QIAGEN/西安天隆公司產(chǎn)品，貨號52904/52906；Real-time -PCR試劑為TAKARA公司產(chǎn)品，貨號204443；輪狀病毒抗原ELISA檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)為德國R-biopharm AG公司產(chǎn)品，產(chǎn)品編號KIB0901。嚴格按照試劑說明書操作，檢測試劑盒均在有效期內(nèi)使用。

1.3方法

1.3.1樣本采集方法與保存： 哨點醫(yī)院采集糞便和/或嘔吐物標本，成型便采3～5 g(“成人拇指頭”體積)，水樣便采集3～5 mL，采集的標本應置冷凍保存，并于每周一將冷藏標本運送至市級疾控中心開展病毒性腹瀉病原(諾如病毒、輪狀病毒)檢測。

1.3.2檢測方法： NV檢測采用Real-time PCR方法，以感染性腹瀉診斷標準(WS271-2007)為檢測依據(jù)。RV檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法。實驗過程中嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.4統(tǒng)計學方法 匯總廣東省急性傳染病監(jiān)測信息平臺系統(tǒng)2012年1月-2017年12月梅州市重點感染性腹瀉監(jiān)測登記的所有數(shù)據(jù)，建立Excel數(shù)據(jù)庫。將一年劃分為4個季節(jié)(1-3月為春季，4-6月為夏季，7-9月為秋季，10-12月為冬季)。用SPSS 24.0軟件進行χ2檢驗處理，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。采用描述流行病學方法進行分析。

2 結(jié)果

2.1流行概況 2012年1月-2017年12月，因腹瀉在梅州市兩家腹瀉監(jiān)測哨點醫(yī)院門診就診或住院的患者糞便樣本共3 066份，總陽性率為26.84%，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=288.96,P< 0.05)。共檢出NV陽性406份，陽性率為13.24%，包含GⅠ型7份，GⅡ型399份(占98.27%)，NV陽性率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=168.85,P<0.05)；RV陽性417份，陽性率為13.60%，RV陽性率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=173.77,P<0.05)。RV陽性率自2013年起呈逐年下降趨勢，NV陽性率則呈波動趨勢，RV陽性率略高于NV(表1和圖1)。

表1 2012-2017年梅州市腹瀉病毒監(jiān)測情況

圖1 2012-2017年梅州市諾如病毒和輪狀病毒監(jiān)測情況

2.2流行特征

2.2.1人群分布： 3 066份病例中男性1 816份，女性1 250份，男女性別比為1.45∶1。其中陽性患者的男女性別比NV為1.31∶1，RV為1.45∶1，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.75,P>0.05，表2)。

表2 不同性別腹瀉病毒監(jiān)測情況

2.2.2年齡分布： 按照年齡不同將病例分為<1歲、1～3歲、4～5歲以及>5歲4組，各年齡組人群均可檢出NV和RV陽性，不同年齡組陽性率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=28.96,P=0.00)，且以5歲及以下年齡組為主要感染對象，其陽性數(shù)占總陽性數(shù)的84.81%(表3)。

表3 不同年齡組腹瀉病毒監(jiān)測情況

2.2.3時間分布： 經(jīng)6年連續(xù)監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，各月份均能檢出NV和RV陽性，NV檢出高峰為10月和11月；RV則為1月和2月。與其他各月份比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=144.24,P=0.00)。按季節(jié)計算，NV和RV檢出情況呈現(xiàn)明顯的季節(jié)分布特征，以冬春季檢出陽性數(shù)較多，合計占全年檢出陽性數(shù)的73%。不同季節(jié)陽性率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=119.06,P=0.00，圖2)。

圖2 不同月份腹瀉病毒監(jiān)測情況

3 討論

3.1監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，2012-2017年，梅州市每年檢出NV和RV總陽性率呈逐年下降趨勢，這可能與輪狀病毒疫苗的研制成功并逐步推廣有關(guān)[4]。近年來，GⅡ型株一直是我國NV引起散發(fā)和暴發(fā)急性胃腸炎的病原流行優(yōu)勢株[5]。檢測顯示，NV在梅州市全年各月份均可檢出，且以GⅡ型感染為主，達98%，尤其是10月和11月檢出率最高。值得注意的是，不同地區(qū)時間分布存在差異。有研究報道歐洲和印度等地區(qū)夏季為諾如病毒流行高峰[6,7]。

3.22011年全國的檢測報告顯示，廣東省輪狀病毒腹瀉報告發(fā)病數(shù)占全國報告總數(shù)的50.4%[8]。RV主要通過糞口途徑傳播，輪狀病毒性腹瀉患者、隱形感染者以及帶病毒者、急性期患者都是輪狀病毒的傳染源，水樣腹瀉是主要特征，診斷時需注意與霍亂等鑒別[9]。此次研究發(fā)現(xiàn)，梅州市RV 陽性率高于NV，尤其以1-3月份檢出率最高，達25.30%。疫情以散發(fā)為主，全人群均能感染，但以5歲及以下年齡組為主要感染對象[10]。

綜上所述，梅州市2012-2017年腹瀉患者中NV發(fā)病率呈波動趨勢，而RV發(fā)病率則呈逐年下降趨勢，但仍高于NV發(fā)病率。同時由于NV腹瀉目前尚無特異性預防措施，今后仍需加大衛(wèi)生投入，繼續(xù)加強梅州市NV和RV腹瀉監(jiān)測，以制定有效的綜合防治模式，進一步降低NV和RV腹瀉發(fā)病率。