劉英，江霞，趙立峰，韓寶玲，王健，崔姍姍，劉冠英，劉笑蘭

(天津市第一中心醫(yī)院，天津300192)

研究[1～4]顯示，女性圍絕經(jīng)期代謝紊亂的發(fā)病率為8%～18%，絕經(jīng)后女性可以達(dá)27%～46%，因此圍絕經(jīng)期女性維持葡萄糖和脂質(zhì)代謝的穩(wěn)態(tài)對代謝疾病的預(yù)防和治療至關(guān)重要。研究[5～7]發(fā)現(xiàn)，女性雌激素減少與腹型肥胖、胰島素抵抗及相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，雌激素可通過特異性受體參與糖脂代謝，并影響脂肪的分布及胰島素的敏感性。激素替代曾是治療更年期綜合征的最常見且有效的治療方法，然而，長期使用雌激素與乳腺癌和子宮內(nèi)膜癌風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。因此，非激素療法是目前臨床探究的方向，既減輕癥狀，不良反應(yīng)又小。黑升麻提取物是從黑蛇根草的根莖提取出來的一種異丙醇植物性藥物，已被臨床用作更年期癥狀的替代治療，如夜間出汗、潮熱、陰道萎縮和干燥等。然而，黑升麻提取物在維持葡萄糖和脂質(zhì)代謝中的作用卻鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)以11～15月齡雌鼠作為研究對象，模擬圍絕經(jīng)期女性的代謝內(nèi)環(huán)境，應(yīng)用雌激素、黑升麻提取物進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn)，觀察口服黑升麻提取物對圍絕經(jīng)期雌鼠糖脂代謝的調(diào)節(jié)作用，探討黑升麻提取物在治療女性圍絕經(jīng)期代謝紊亂中的意義。

1 材料與方法

1.1 圍絕經(jīng)期雌鼠選取及分組 選取11～15月齡的SD雌鼠35只，體質(zhì)量為(200±20)g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，背位固定雌鼠，將含有0.1～0.2 mL生理鹽水的吸管輕輕插入大鼠陰道內(nèi)0.5～1 cm，抽吸2～3次，然后取1滴吸液于載玻片上，加入1滴95%乙醇溶液，待液體揮發(fā)后以1%美蘭染色10 min，吹干后置于顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查，連續(xù)5天細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果提示動情周期紊亂、動情間期延長，表明雌鼠處于圍絕經(jīng)期。選取30只處于圍絕經(jīng)期的雌鼠隨機(jī)分為3組，每組10只，分別記為黑升麻組、雌激素組和對照組；同時，另選取6月齡SD雌鼠10只，體質(zhì)量為(200±20)g，記為青年對照組。黑升麻組雌鼠每日口服黑升麻提取物60 mg/kg(天津中醫(yī)藥大學(xué)研究所提供)，雌激素組雌鼠每日口服雌激素0.8 mg/kg(1 mg/片，中國拜耳醫(yī)藥保健有限公司)，對照組和青年對照組雌鼠每日口服5%生理鹽水10 mL/kg。4組雌鼠均飼養(yǎng)在21～22 ℃室溫下，給予55%～65%的空氣濕度，維持晝夜節(jié)律，規(guī)律飼養(yǎng)非豆類食物及水。

1.2 各組雌鼠糖脂代謝指標(biāo)檢測 各組雌鼠在入組時(T0)及2個月后(T1)進(jìn)行檢測：①稱量大鼠體質(zhì)量；②采集鼠尾靜脈血，分離血清，應(yīng)用全自動生化分析儀檢測血清空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)，采用ELISA法檢測血清空腹胰島素(FINS)、8點(diǎn)皮質(zhì)醇、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，計(jì)算胰島素敏感性指數(shù)(ISI，ISI=1/[Log(FINS)+Log(FBG)])及胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR，HOMA-IR=FBG×FINS/22.5)。

2 結(jié)果

2.1 對照組、青年對照組雌鼠糖脂代謝指標(biāo)比較 對照組、青年對照組雌鼠糖脂代謝指標(biāo)比較見表1。由表1可知，與青年對照組相比，對照組雌鼠在T1時體質(zhì)量、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、8點(diǎn)皮質(zhì)醇、hs-CRP均升高(P均<0.05)，ISI降低(P<0.05)，表明圍絕經(jīng)期雌鼠的糖脂代謝指標(biāo)與青年雌鼠存在顯著差異。

表1 對照組、青年對照組雌鼠糖脂代謝指標(biāo)比較

注：與青年對照組T1時的變化相比，﹡P<0.05。

2.2 黑升麻組、雌激素組、對照組雌鼠糖脂代謝指標(biāo)比較 黑升麻組、雌激素組、對照組雌鼠糖脂代謝指標(biāo)比較見表2。由表2可知，黑升麻組、雌激素組、對照組雌鼠在T0時體質(zhì)量、FBG、FINS、ISI、HOMA-IR、TC、TG、8點(diǎn)皮質(zhì)醇、hs-CRP相比，P均>0.05。與對照組相比，黑升麻組雌鼠在T1時體質(zhì)量、FBG、FINS、HOMA-IR、TG、8點(diǎn)皮質(zhì)醇、hs-CRP均降低(P均<0.05)，ISI升高(P<0.05)；雌激素組雌鼠在T1時體質(zhì)量、FBG、TG、hs-CRP均降低(P均<0.05)。與雌激素組相比，黑升麻組雌鼠在T1時FINS、HOMA-IR、8點(diǎn)皮質(zhì)醇均降低(P均<0.05)，ISI升高(P<0.05)。

表2 黑升麻組、雌激素組、對照組雌鼠糖脂代謝指標(biāo)比較

注：與對照組T1時相比，﹟P<0.05；與雌激素組T1時相比，△P<0.05。

3 討論

絕經(jīng)是女性卵巢功能衰竭的表現(xiàn)，流行病學(xué)調(diào)查顯示，40%～50%的絕經(jīng)后女性會出現(xiàn)胰島素敏感性降低，而胰島素敏感性降低可能是導(dǎo)致絕經(jīng)后女性代謝紊亂風(fēng)險(xiǎn)增加的中心環(huán)節(jié)，且與雌激素減少互相影響，導(dǎo)致代謝水平的不斷惡化。大量臨床試驗(yàn)[8～10]證實(shí)，給予雌激素治療后可有效改善代謝紊亂患者出現(xiàn)的體質(zhì)量增加、糖脂代謝紊亂、骨密度減低及胰島素抵抗、氧化應(yīng)激反應(yīng)等。2013年發(fā)布了絕經(jīng)期雌激素治療的全球共識，而針對廣義的圍絕經(jīng)期治療還存在廣泛爭議[11]?；诖?，越來越多的學(xué)者將目光集中到植物雌激素或有類雌激素效應(yīng)的中草藥上。

黑蛇根草為毛莨科升麻屬多年生草本植物，幼苗可食，根莖入藥。黑升麻提取物在我國作為傳統(tǒng)中藥使用，目前認(rèn)為黑升麻提取物主要活性成分是三萜皂苷以及苯丙烯酸類化合物。許多藥理學(xué)和臨床研究[12，13]闡明了黑升麻提取物的作用機(jī)理、給藥方式及療效，并進(jìn)一步證實(shí)黑升麻提取物既具有天然雌激素效果，可調(diào)節(jié)內(nèi)分泌平衡，又能直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，參與調(diào)節(jié)5-羥色胺受體活性。近期，大量的臨床觀察[14]證實(shí)，黑升麻提取物能有效緩解更年期婦女出現(xiàn)的潮熱、盜汗、情緒失常等植物神經(jīng)紊亂癥狀，而且具有較好的臨床有效性及短期應(yīng)用安全性。2014年，Moser等[14]利用黑升麻中提取的Ze450成分對ob/ob小鼠的肝細(xì)胞進(jìn)行離體動物試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其能改善糖尿病模型小鼠的胰島素高峰后延和HOMA-IR，具有抗糖尿病的作用。隨著臨床研究[15]的不斷開展，還發(fā)現(xiàn)其可能具有神經(jīng)保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤等生物活性。

本研究選用自然老化的SD雌性大鼠，其生殖內(nèi)分泌功能衰退的表現(xiàn)與圍絕經(jīng)期婦女極為相似，可以更好地反映循序漸進(jìn)的代謝規(guī)律。本研究采用了11～15月齡的SD雌鼠[16]，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，進(jìn)行陰道細(xì)胞學(xué)檢查，連續(xù)5天提示動情周期紊亂、動情間期延長，表明雌鼠處于圍絕經(jīng)期。通過T1時對照組與青年對照組的比較，揭示了圍絕經(jīng)期雌鼠在體質(zhì)量及糖脂代謝紊亂上存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)變化，我們認(rèn)為這與雌激素分泌減少密切有關(guān)。圍絕經(jīng)期雌鼠經(jīng)雌激素治療2月后，大鼠可以有效改善體質(zhì)量、FBG、TG、hs-CRP水平，提示雌激素在改善圍絕經(jīng)期的糖脂代謝中起著積極的作用。在黑升麻組和雌激素組的組間對比中我們可以看出，黑升麻提取物除了具有雌激素的優(yōu)勢外，還能有效緩解實(shí)驗(yàn)大鼠的8點(diǎn)皮質(zhì)醇水平及HOMA-IR，并提升了ISI，上述結(jié)果與孫宇等[17]在去勢雌鼠造模上的實(shí)驗(yàn)結(jié)論基本相同。近年來，有研究[17]表明，黑升麻提取物在改善胰島素抵抗方面的作用可能與調(diào)節(jié)肝臟及脂肪組織中的蛋白激酶B通路相關(guān)。既往研究[18～20]證明，皮質(zhì)醇可以直接作用于胰島B細(xì)胞，通過減少胰島素受體數(shù)目或降低效力，而導(dǎo)致胰島素分泌功能下降和胰島素抵抗，減弱皮質(zhì)醇升高將對患者減輕胰島素抵抗和控制血糖具有一定的臨床的意義。hs-CRP是肝臟合成的一種全身性炎癥反應(yīng)急性期的非特異性標(biāo)志物，是心血管事件危險(xiǎn)最強(qiáng)有力的預(yù)測因子之一[21～23]。本研究中，通過對8點(diǎn)皮質(zhì)醇及hs-CRP的測定，初探了黑升麻提取物在緩解機(jī)體皮質(zhì)醇功能及炎性反應(yīng)中的作用。

綜上所述，圍絕經(jīng)期雌鼠糖脂代謝指標(biāo)紊亂；黑升麻提取物具有調(diào)節(jié)圍絕經(jīng)期雌鼠糖脂代謝指標(biāo)的作用，是雌激素治療的有效替代藥物；與雌激素治療相比，黑升麻提取物還可有效緩解圍絕經(jīng)期雌鼠的8點(diǎn)皮質(zhì)醇水平及HOMA-IR，為臨床特定高危人群在預(yù)防代謝系統(tǒng)疾患方面提供支持。