梁 威,凌 博,陳柏冰,趙秋華,張忠偉?

(1.右江民族醫(yī)學(xué)院,廣西 百色533000；2.廣西大學(xué),廣西 南寧530004)

四數(shù)九里香Murraya tetrameraHuang為蕓香科九里香屬植物[1],全株有特殊芳香氣味,全年可采收葉或帶葉嫩枝入藥。歷版《中國藥典》均未收載四數(shù)九里香,但其在民族地區(qū)和民間被廣泛使用。據(jù)記載,其味辛微苦,性微溫,有祛風(fēng)解表、行氣止痛、活血散瘀等功效,可用于治療感冒發(fā)熱、胃痛、風(fēng)濕痹痛、跌打腫痛等癥[2-3]。四數(shù)九里香莖葉香氣濃郁,味辛辣清涼,用于泡茶可提神醒腦,而將其泡水洗澡有涼爽舒適之感。目前,研究者對四數(shù)九里香的化學(xué)成分、藥理作用、馴化栽培等方面進(jìn)行了探討。為準(zhǔn)確鑒別四數(shù)九里香的基源,有效研究開發(fā)其藥物資源,本文就其相關(guān)研究報道進(jìn)行梳理分析。

1 基源特征

四數(shù)九里香為小喬木,當(dāng)年生枝和新葉的葉軸及花梗被稀疏微柔毛,其后變無毛。小葉5～11片,狹長披針形,兩側(cè)稍不對稱或?qū)ΨQ,干后暗褐黑色,油點微凸。傘房狀聚傘花序,多花；萼片基部合生,4片；花瓣4片,白色有油點；雄蕊8枚；子房橢圓形。果圓球形,淡紅色,油點甚多,種子1～3粒?；ㄆ?－4月,果期7－8月。主產(chǎn)于廣西西部、云南東南部,常見生于光照充足的海拔400～700 m的石灰?guī)r山地的山頂部,模式標(biāo)本采自云南硯山[1]。

2 化學(xué)成分

目前,多采用硅膠柱層析、重結(jié)晶、TLC、HPLC、GCMS、MS和NMR等法研究四數(shù)九里香水提物、醇提物和揮發(fā)油的化學(xué)成分。

牙啟康等[4]研究了四數(shù)九里香的非揮發(fā)油成分,首次從該植物中分離鑒定出補骨脂素等5個化合物。張柯媛等[5]以補骨脂素為指標(biāo)成分建立了定性定量分析方法,測得廣西德保、武鳴和河池產(chǎn)四數(shù)九里香的補骨脂素含量依次為0.23mg/g、0.21mg/g、0.20mg/g,為制定其藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了數(shù)據(jù)參考。

周穎等[6]從四數(shù)九里香中分離鑒定出β-谷甾醇、間甲基苯甲醚等9個化合物,其中有4個為首次從九里香屬植物中分得,有8個為首次從該植物中分得。You等[7]從四數(shù)九里香中分離鑒定出8個化合物(2個倍半萜類和6個香豆素類),其中有1個新化合物。周永福等[8-9]前期從四數(shù)九里香葉的醇提物中分離鑒定出1-甲基-3-丙?；沁?、β-谷甾醇等8個化合物(7個咔唑類生物堿和1個甾體化合物)；后期又從中分離鑒定出紫蘇醛、7-羥基香豆素等14個化合物(6個黃酮類、5個香豆素類、2個甾體化合物、1個不飽和脂肪酸酯),有12個為首次從該植物中分得。

研究者從多產(chǎn)地的四數(shù)九里香揮發(fā)油中分離鑒定出多個成分,含量較高的主要為薄荷酮、異薄荷酮、薄荷醇、檸檬烯和胡椒酮等[10-12]。陳家源等[12]從廣西德保產(chǎn)四數(shù)九里香的揮發(fā)油中分離鑒定了37個化學(xué)成分,有15個為首次從該植物中分得。龔志強等[13]研究發(fā)現(xiàn),3種提取方法所得揮發(fā)油均含薄荷酮、異薄荷酮、胡椒酮等主要成分。超臨界CO2流體萃取法可得38種成分,水蒸氣蒸餾法為33種,超聲提取法為12種,且均以薄荷酮的含量最高(分別為38.17%、20.51%、43.45%)。不同提取方法對四數(shù)九里香揮發(fā)油的提取效率不同。超臨界CO2流體萃取法得到揮發(fā)性成分最多,可能與其萃取溫度低、低沸點的易揮發(fā)性組分損失較少有關(guān)。

3 藥理活性作用

3.1 抗炎鎮(zhèn)痛作用

四數(shù)九里香的醇提物、水提物和揮發(fā)油對角叉菜膠致大鼠足趾腫脹法引起的急性炎癥、棉球致大鼠肉芽腫法引起的慢性炎癥,以及小鼠熱板法和小鼠醋酸扭體法引起的急性外周疼痛均有顯著的抑制作用。四數(shù)九里香不同提取物的不同劑量與其抗炎鎮(zhèn)痛作用密切相關(guān)。與空白對照組相比,揮發(fā)油0.4 g/kg、水提物40 g生藥/kg、醇提物40 g生藥/kg劑量組的效果最明顯,其余劑量組也有不同程度的抑制作用[14-16]。有研究者從電生理角度初步探討了四數(shù)九里香鎮(zhèn)痛作用的可能機(jī)制。相同的藥物作用時間內(nèi),離體蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位振幅和動作電位傳導(dǎo)速度的變化值基本呈同步狀態(tài),均隨其水提液藥物濃度的增加而增大。隨藥物作用時間的延長,其水提液和揮發(fā)油均導(dǎo)致神經(jīng)復(fù)合動作電位的振幅變小、傳導(dǎo)速度變慢,最后使神經(jīng)動作電位消失。該研究結(jié)果提示了阻滯神經(jīng)動作電位的傳導(dǎo)可能是四數(shù)九里香鎮(zhèn)痛作用的機(jī)制之一[17-18]。

3.2 急性毒性作用

黃小秋等[19]研究發(fā)現(xiàn),四數(shù)九里香水提液和75%醇提液的LD50值分別為69.18g/kg、183.44g/kg,說明水提液對小鼠的急性毒性相對更大。將兩種提取液經(jīng)口灌胃小鼠后,顯示小鼠死亡率均隨給藥劑量增加而升高,即兩者存在正比關(guān)系。水提液和75%乙醇提液的給藥劑量分別為49.70g/(kg·h)、132.07 g/(kg·h),小鼠死亡率最低。作者認(rèn)為四數(shù)九里香雖為民間常用藥,但應(yīng)合理使用劑量,避免發(fā)生毒性反應(yīng),而不同提取液的毒性作用部位和作用機(jī)制尚需深入研究。因2種提取方法的原理不同,則四數(shù)九里香提取液中非揮發(fā)性與揮發(fā)性成分的含量存在差異,可推測其提取液的組成成分與藥理毒性必然有一定的量效關(guān)系。

3.3 細(xì)胞毒活性作用

有學(xué)者以腫瘤細(xì)胞為研究模型研究了四數(shù)九里香多種化學(xué)成分對腫瘤細(xì)胞的體外生長抑制作用。You等[7]將四數(shù)九里香的2個倍半萜類和6個香豆素類對肺腺癌A549、宮頸癌HeLa、肝細(xì)胞癌SMMC-7721、膀胱腫瘤EJ、急性淋巴細(xì)胞白血病BALL-1細(xì)胞進(jìn)行了細(xì)胞毒活性評價,發(fā)現(xiàn)不同化合物有不同的細(xì)胞毒活性。2個倍半萜類化合物對5種細(xì)胞均有明顯的細(xì)胞毒活性。對于香豆素類化合物,有3個未檢測到任何細(xì)胞毒活性,而其余3個均有不同的細(xì)胞毒活性。作者認(rèn)為,結(jié)構(gòu)相似的化合物有不同程度的細(xì)胞毒活性,可能與化學(xué)物結(jié)構(gòu)中不同的取代模式有關(guān)：有長烷基取代基的化合物對腫瘤細(xì)胞有明顯的細(xì)胞毒活性,而在烷基取代基上有羰基的化合物顯示弱細(xì)胞毒活性。四數(shù)九里香的活性化合物可能是治療癌癥的潛在先導(dǎo)化合物。

周永福等[8]發(fā)現(xiàn)用于實驗的四數(shù)九里香8個化合物中,有5個對肝癌SMMC7721表現(xiàn)顯著的細(xì)胞毒活性；其后期又研究了四數(shù)九里香的14個化合物對結(jié)腸癌SW480、白血病HL60、肺腺癌A549、肝癌SMMC7721、乳腺癌 MCF7細(xì)胞的體外生長抑制作用[9],結(jié)果顯示,14個化合物對結(jié)腸癌SW480的細(xì)胞毒活性均低于陽性對照組,而對于其余4種腫瘤細(xì)胞,多個化合物均表現(xiàn)出不同程度的細(xì)胞毒活性。因此,2項研究結(jié)果為四數(shù)九里香抗腫瘤細(xì)胞活性提供了實驗數(shù)據(jù),有利于進(jìn)一步研究開發(fā)四數(shù)九里香和相關(guān)的抗腫瘤新藥。

3.4 對血脂水平和血液流變學(xué)的影響

九里香屬植物中的九里香葉總黃酮對糖尿病大鼠的血脂水平有調(diào)節(jié)作用,而其影響高脂血癥的相關(guān)研究較少。楊其波等[20]探討了四數(shù)九里香對高脂血癥小鼠血脂調(diào)節(jié)作用及血液流變學(xué)的影響。與模型對照組相比,其水提物和醇提物均可不同程度抑制高脂血癥小鼠的體重增加量,且以醇提物的作用更強。血脂水平測定結(jié)果顯示,其水提物和醇提物均能明顯降低小鼠的血清總膽固醇、甘油三酯和血清低密度脂蛋白水平,提高血清高密度脂蛋白水平。血液流變學(xué)測定結(jié)果表明,其水提物和醇提物均可有效降低小鼠高切全血黏度、中切全血黏度、低切全血黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積和紅細(xì)胞聚集指數(shù)水平。這說明適當(dāng)劑量的四數(shù)九里香提取物在一定程度上可調(diào)節(jié)血脂、有效降低血液黏度、防止紅細(xì)胞聚集形成血栓。

4 四數(shù)九里香的馴化栽培研究

四數(shù)九里香野生資源有限,多生于石灰?guī)r山地,生長較緩慢,故對其進(jìn)行栽培育種研究尤為必要。閉志強等[21]對原產(chǎn)于廣西西南石山區(qū)的野生山茶鑒定為四數(shù)九里香,并進(jìn)行馴化栽培研究。四數(shù)九里香莖段經(jīng)不同類型和濃度的生根劑處理后,僅GGR組有極少莖段長出新芽,但后期全部停止生長并枯蔫,發(fā)現(xiàn)其未長出新根。四數(shù)九里香的扦插成活率極低,可能與其生長緩慢、韌皮部薄而難誘導(dǎo)出根的特性有關(guān)。移栽實驗表明,用50ppm的GGR對帶根植株進(jìn)行拌泥漿根有助于誘發(fā)新根和長出新芽,提高植株成活率。與偏酸性的紅壤相比,以pH中性或略偏堿性的黑色石灰土作為栽培基質(zhì)或基肥,成活率高達(dá)78.3%,更有利于四數(shù)九里香生長。

5 結(jié)語

民族民間藥物療效顯著,具有悠久的應(yīng)用歷史,是一座醫(yī)藥寶庫,還有賴于研究者進(jìn)行發(fā)掘和研究。作為一種民族民間草藥,四數(shù)九里香的使用地區(qū)具有典型的地域性。廣西龍州用其作為治風(fēng)濕病的主藥,廣西德保用其葉作冬季飲用茶葉以防寒,說明四數(shù)九里香還可用于保健茶飲。目前,對四數(shù)九里香的研究尚處于基礎(chǔ)階段,僅在化學(xué)成分、藥理作用、馴化栽培等方面有較少報道,因此,建議進(jìn)一步加強對四數(shù)九里香的人工栽培高產(chǎn)技術(shù)、藥材采收加工、藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、新藥制劑開發(fā)、藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用的分子機(jī)制等方面的深層次研究。