彭琳，顏敏，黃海萍，劉園園，羅潔

湖南省醫(yī)療器械檢驗(yàn)檢測所 （湖南長沙 410014）

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）是 一種參與人體蛋白質(zhì)新陳代謝的酶，可加快蛋白質(zhì)和氨基酸在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化，廣泛存在于人體各組織、器官、肌肉和骨骼中，以肝細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中最多。當(dāng)人體內(nèi)各組織器官損傷或病變時(shí)，ALT被釋放到血液中，使血液中ALT水平增加。僅少量的肝細(xì)胞損傷，即可使ALT水平增高，因此，ALT被世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）推薦為肝功能損傷最敏感的檢測指標(biāo)之一。

通過查詢國家食品藥品監(jiān)督管理總局?jǐn)?shù)據(jù)庫獲悉，ALT檢測試劑盒的有證生產(chǎn)企業(yè)有446家，但各企業(yè)生產(chǎn)規(guī)模、技術(shù)水平和產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊。經(jīng)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，部分生產(chǎn)企業(yè)將未取得醫(yī)療器械注冊(cè)證的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品，以診斷試劑盒打包贈(zèng)送的形式，贈(zèng)送給醫(yī)院，用于醫(yī)院診斷試劑質(zhì)控和診斷設(shè)備校準(zhǔn)。為了了解市場上ALT試劑盒的質(zhì)量情況，探討不同企業(yè)ALT試劑盒測得結(jié)果之間的可比性，為檢測結(jié)果的互認(rèn)提供數(shù)據(jù)支持，并初步探討校準(zhǔn)與溯源在臨床生化檢驗(yàn)質(zhì)量中的重要作用，我們?cè)跂|芝TBA-120FR全自動(dòng)生化分析儀上，利用國家及國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)不同檢測系統(tǒng)試劑盒測定結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行驗(yàn)證，并對(duì)不同檢測系統(tǒng)結(jié)果的溯源性和可比性進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

采用東芝TBA-120FR全自動(dòng)生化分析儀。

1.1.2 檢測系統(tǒng)組成

目標(biāo)檢測系統(tǒng)采用北京、廣州、湖南、四川等省市的12家企業(yè)生產(chǎn)的ALT試劑盒及其配套校準(zhǔn)品，將12家企業(yè)試劑盒分別用A～L表示，將各試劑盒提供的校準(zhǔn)品相應(yīng)用a～l表示，從而組成相應(yīng)的檢測系統(tǒng)Aa～Ll。自建檢測系統(tǒng)[1]是將以上12家企業(yè)生產(chǎn)的ALT試劑盒分別采用國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)[定值結(jié)果：103.8 IU/L（1 ml/支）；來源：ERM]校準(zhǔn)組成相應(yīng)檢測系統(tǒng)，國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)時(shí)統(tǒng)一用j表示，組成相應(yīng)的檢測系統(tǒng) Aj～Lj。

1.1.3 國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

采用人血清基質(zhì)ALT活性濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)[證書編號(hào)：GBW（E）090352；定值日期：2017年12月；定值結(jié)果：52.3 IU/L（1 ml/支）；生產(chǎn)單位：嘉興博泰生物科技發(fā)展有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 目標(biāo)檢測系統(tǒng)準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

將12家企業(yè)的試劑盒均按其說明書設(shè)定分析參數(shù)，并用各自配套的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，分別檢測國家及國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，批內(nèi)連續(xù)測定10次，計(jì)算批內(nèi)變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）及相對(duì)偏差（relative deviation，RD）。

1.2.2 自建檢測系統(tǒng)準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

將12家企業(yè)的試劑盒均按其說明書設(shè)定分析參數(shù)，并用國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)，分別檢測國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，批內(nèi)連續(xù)測定10次，計(jì)算批內(nèi)CV及RD。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

準(zhǔn)確度：取已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按試劑盒說明書的規(guī)定進(jìn)行測定，重復(fù)10次。計(jì)算樣本測定結(jié)果均值（X），用RD表示測定結(jié)果的準(zhǔn)確度（見公式1）。重復(fù)性：取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢測，用同一試劑盒重復(fù)測定10次，計(jì)算測定值的CV，CV表示測定結(jié)果的重復(fù)性。見公式2。

（公式1，T為參考值，X為Xi的平均值）

（公式2，Xi為10次測定結(jié)果， X為Xi的平均值）

2 結(jié)果與分析

2.1 目標(biāo)檢測系統(tǒng)測定結(jié)果

對(duì)12家企業(yè)的ALT試劑盒采用配套校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)后，分別測定國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，結(jié)果顯示：12家企業(yè)試劑盒的CV介于0.35%～2.74%，其中國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的CV介于0.61%～2.74%，國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的CV介于0.35%～2.22%。RD介于1.30%～8.96%，其中國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的RD介于1.30%～8.35%，國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的RD介于1.32%～8.96%。見表1。

表1 目標(biāo)檢測系統(tǒng)CV及RD統(tǒng)計(jì)結(jié)果（%）

2.2 自建檢測系統(tǒng)測定結(jié)果

對(duì)12家企業(yè)的ALT試劑盒采用國際校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)后，分別測定國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，結(jié)果顯示：12種試劑盒的CV介于0.49%～4.32%，RD介于8.93%～20.07%，見表2。

表2 自建檢測系統(tǒng)CV及RD統(tǒng)計(jì)結(jié)果（%）

2.3 統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析

目標(biāo)檢測系統(tǒng)檢測樣本的重復(fù)性（＜5%）及準(zhǔn)確度（＜10%）均較小，用國際校準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)后自建檢測系統(tǒng)檢測樣本的重復(fù)性仍較?。ǎ?%），但準(zhǔn)確度（8.93%～20.07%）明顯增高，其中約83%的試劑盒準(zhǔn)確度偏差＞10%。

3 討論

檢測系統(tǒng)是指完成一個(gè)檢測項(xiàng)目涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序等的組合[2-3]。標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化及溯源規(guī)范性對(duì)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理及提高臨床檢驗(yàn)質(zhì)量具有重要意義[4-5]。在目前國內(nèi)檢測系統(tǒng)質(zhì)量參差不齊的情況下，應(yīng)對(duì)自建系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)估，以保障臨床檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度及各實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的可比性。

本研究結(jié)果顯示，自建檢測系統(tǒng)準(zhǔn)確度偏差較目標(biāo)檢測系統(tǒng)明顯增高，原因可能是一方面試劑盒配套校準(zhǔn)品與國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的基質(zhì)不同而產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)，另一方面兩者溯源鏈不統(tǒng)一而導(dǎo)致的產(chǎn)品差異。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和參考物質(zhì)均為處理過的樣本，但由于其來源、生產(chǎn)工藝的不同，檢測中產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)也不同。為避免校準(zhǔn)過程中引入系統(tǒng)偏倚，在進(jìn)行任何一種項(xiàng)目檢測前均需進(jìn)行比較，按要求配套使用儀器、試劑、校準(zhǔn)品。目前我國各企業(yè)校準(zhǔn)品溯源不統(tǒng)一，各試劑企業(yè)校準(zhǔn)品可比性不強(qiáng)，還未能實(shí)現(xiàn)通用或互換使用，在血清ALT檢測時(shí)仍需要使用各自配套的校準(zhǔn)品。

市場上存在未經(jīng)注冊(cè)的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，不確定其量值是否能溯源，賦值是否準(zhǔn)確，其測定結(jié)果準(zhǔn)確度可能存在問題，給臨床使用帶來風(fēng)險(xiǎn)。因此建議監(jiān)管部門嚴(yán)格要求校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的注冊(cè)審批，并嚴(yán)格監(jiān)管生產(chǎn)和經(jīng)營。國家應(yīng)加快參考物質(zhì)的研制，以便企業(yè)在研制和生產(chǎn)產(chǎn)品過程中規(guī)范產(chǎn)品溯源，并引導(dǎo)不同企業(yè)產(chǎn)品溯源統(tǒng)一，為實(shí)現(xiàn)試劑盒結(jié)果互通互換奠定基礎(chǔ)。