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寵物犬貓賈第鞭毛蟲(chóng)病診治

2019-02-14 21:44李守杰
飼料博覽 2019年1期
關(guān)鍵詞:包囊蟲(chóng)體驅(qū)蟲(chóng)

李守杰

(渭南職業(yè)技術(shù)學(xué)院,陜西 渭南 714000)

賈第鞭毛蟲(chóng)是可感染人、寵物犬貓等的重要人獸共患致病性寄生蟲(chóng)[1]。在分類學(xué)上賈第蟲(chóng)屬于原生動(dòng)物門、鞭毛蟲(chóng)總綱、動(dòng)物鞭毛蟲(chóng)綱、雙滴目、六鞭科、賈第屬。根據(jù)顯微鏡下形態(tài)學(xué)差異、超微結(jié)構(gòu)和宿主來(lái)源,目前將賈第蟲(chóng)分為6種:敏捷賈第蟲(chóng)、蒼鷺賈第蟲(chóng)、鸚鵡賈第蟲(chóng)、微小賈第蟲(chóng)、鼠賈第蟲(chóng)和藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)[2]。近年來(lái),黑龍江省、四川省、河南省和上海市等地都有犬貓賈第蟲(chóng)流行情況及感染的報(bào)道[3]。犬賈第蟲(chóng)感染率比貓高,部分地區(qū)可高達(dá)25.20%,嚴(yán)重影響犬的生長(zhǎng)發(fā)育[4]。臨床上貓的發(fā)病報(bào)道較少,但群飼的貓易感染賈第蟲(chóng)。貓由于群居環(huán)境不衛(wèi)生,特別是糞便、水的污染等是導(dǎo)致貓感染賈第鞭毛蟲(chóng)病逐漸增多的主要原因[5]。

1 感染癥狀

犬作為家養(yǎng)動(dòng)物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物,與人類關(guān)系密切,可作為賈第蟲(chóng)感染的儲(chǔ)蓄宿主,具有傳播感染的潛力[6-7]。絕大多數(shù)犬和貓感染后,糞便中雖有卵囊排出,但無(wú)特別明顯的臨床癥狀。少數(shù)成年犬感染后,呈短暫的間歇性腹瀉或慢性腹瀉,排出含大量泡沫樣的稀便,且糞便惡臭,顏色暗淡或呈脂肪痢,精神沉郁,食欲減退,漸進(jìn)性消瘦以及貧血、嘔吐,體溫一般不高。剖檢時(shí)可見(jiàn)腸道不同程度的潰瘍、出血,小腸、大腸中亦可見(jiàn)蟲(chóng)體。仔犬窩內(nèi)的交叉感染率較高,可達(dá)100%,癥狀也較重,表現(xiàn)為精神沉郁,并有先急后重及間歇性腹瀉,糞便呈現(xiàn)灰色,并帶有黏液和血液,且腹瀉2 d后開(kāi)始出現(xiàn)脫水、消瘦等癥狀。貓感染后幼貓可見(jiàn)腹壁脹氣,大便黃色糊狀,肛門松弛,被毛粗糙,偶有帶血或果凍樣稀便。成年貓幾乎不呈現(xiàn)腹瀉癥狀,但會(huì)成為潛在的帶毒者。感染后糞便中往往會(huì)有蟲(chóng)體排出,如有其他貓或別的寵物食入糞便,或污染了食物或飲水,則食入者就有可能感染賈第鞭毛蟲(chóng)。

2 流行特點(diǎn)

在國(guó)外寵物犬貓賈第蟲(chóng)病研究中,發(fā)現(xiàn)歐洲犬樣品8 000多只和貓樣品4 000多只,其中分別有24.8%和20.3%的樣品呈賈第蟲(chóng)陽(yáng)性,<6月齡的犬和貓感染率高[8]。在德國(guó),犬和貓感染此病的幾率差不多是英國(guó)、西班牙、荷蘭和意大利的2倍,比利時(shí)感染率更高。我國(guó)調(diào)查顯示,犬賈第蟲(chóng)陽(yáng)性率為4.5%~25.2%。幼齡犬更容易感染賈第蟲(chóng)的原因,可能與其免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善有關(guān)[9-10]。雌性犬和雄性犬賈第蟲(chóng)陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)[11]。這一流行性的原因可能與貓個(gè)體免疫力、臨床診斷手段和診斷技術(shù)的提升、貓的壽命增加等多種原因有關(guān)。因此,在對(duì)犬貓進(jìn)行臨診時(shí),發(fā)現(xiàn)急慢性腹瀉,都應(yīng)對(duì)其進(jìn)行合理懷疑及檢查,以免錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)間,增加感染其他動(dòng)物的機(jī)會(huì)。

賈第鞭毛蟲(chóng)屬于兼性厭氧真核生物,賈第蟲(chóng)缺乏線粒體、過(guò)氧化物酶體、高爾基復(fù)合體等細(xì)胞器,但有細(xì)胞骨架[12]。生活史中包括滋養(yǎng)體和包囊兩個(gè)階段。滋養(yǎng)體為營(yíng)養(yǎng)繁殖階段,包囊為傳播階段[13]。賈第蟲(chóng)的傳播以包囊為主,包囊隨糞便排出體外后,會(huì)污染食物和水,在被犬貓食入后而感染。目前,牡蠣等貝類水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)已發(fā)現(xiàn)有賈第蟲(chóng)的感染,犬貓生食或半生食這些水產(chǎn)動(dòng)物也會(huì)感染。包囊在十二指腸內(nèi)脫囊變成滋養(yǎng)體,在腸壁和膽囊中寄生并繁殖。犬的滋養(yǎng)體一般在小腸上段,貓則在小腸下段。滋養(yǎng)體在寄生和繁殖時(shí),會(huì)引發(fā)腸炎。滋養(yǎng)體到達(dá)腸后端,形成包囊,隨后隨糞便排出體外。賈第蟲(chóng)的致病機(jī)制尚不完全清楚,一般認(rèn)為,患病犬貓發(fā)病情況與自身的免疫力和抵抗力、蟲(chóng)株毒力、飼養(yǎng)環(huán)境等多種影響因素有關(guān)。一旦出現(xiàn)嚴(yán)重感染,蟲(chóng)體寄生在腸道內(nèi),容易形成機(jī)械性阻塞。蟲(chóng)體滋養(yǎng)體通過(guò)吸盤吸附于腸黏膜上又會(huì)形成機(jī)械性刺激,出現(xiàn)炎性反應(yīng),對(duì)腸黏膜造成一定程度的損傷;蟲(chóng)體分泌物和代謝產(chǎn)物對(duì)腸黏膜、微絨毛也會(huì)產(chǎn)生不同的刺激,導(dǎo)致腸功能出現(xiàn)紊亂。賈第蟲(chóng)宿主的感染具有一定的特異性。溫少芳等認(rèn)為賈第蟲(chóng)可分為聚集體A、B、C、D、E 5種,且賈第蟲(chóng)株聚集體D為犬科動(dòng)物特有的基因型,不會(huì)感染人和其他動(dòng)物[14]。齊萌等認(rèn)為,A和B群主要感染人,C和D群主要感染犬,E群主要感染牛、羊、豬、馬等,F(xiàn)群主要感染描,G群主要感染鼠,A群有時(shí)也會(huì)感染貓[15]。

3 診斷

目前,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中并未列出藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)的檢測(cè)方法。近些年,犬貓賈第鞭毛蟲(chóng)的診斷主要采用病原學(xué)診斷、免疫學(xué)診斷、分子生物學(xué)等診斷方法。其中,直接鏡檢法、快速姬姆薩染色法和多重PCR方法在臨床上均能快速檢出賈第鞭毛蟲(chóng),可用于賈第鞭毛蟲(chóng)病的快速診斷。

3.1 病原學(xué)診斷

賈第鞭毛蟲(chóng)的形態(tài)學(xué)研究起步較晚。最初,研究者為了研究藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)的結(jié)構(gòu),采用直接鏡檢法或者快速姬姆薩染色法進(jìn)行診斷。實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)顯微視頻攝錄技術(shù)也在跟蹤和監(jiān)測(cè)寄生蟲(chóng)方面能起到很大作用,可觀察到滋養(yǎng)體和包囊的典型形態(tài)及運(yùn)動(dòng)方式。陳陽(yáng)等用改良TYI-S-33培養(yǎng)基對(duì)滋養(yǎng)體進(jìn)行培養(yǎng),用透射電鏡觀察蟲(chóng)體的超微結(jié)構(gòu),結(jié)果觀察到蟲(chóng)體的質(zhì)膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核膜、核質(zhì)、核仁以及二聯(lián)微管結(jié)構(gòu)[16]。

3.1.1 直接鏡檢法診斷

糞便鏡檢是臨床常用的簡(jiǎn)單可靠的診斷方法,通常是采集寵物犬貓的腹瀉糞便,采用直接涂片法可以觀察到滋養(yǎng)體。在犬貓患病急性或間斷腹瀉期間,糞便多呈水樣或糊狀,檢查時(shí)為避免滋養(yǎng)體死亡應(yīng)采集新鮮標(biāo)本。送檢的標(biāo)本應(yīng)注意保溫,以確保滋養(yǎng)體保持一定的活力。在疾病的后期,假如糞便已基本成形,為了檢測(cè)包囊,一般可采用2%的碘液直接涂片法即可確診。為了提高檢出率,亦可采用相對(duì)密度1∶18的硫酸鋅浮聚或醛-醚濃集等方法,但在蔗糖或其他漂浮液中包囊會(huì)收縮變形影響鑒別。因?yàn)榘沂情g斷排出的,檢查時(shí)可增加檢查頻率來(lái)提高檢出率。相差顯微鏡有助于鑒別賈第蟲(chóng)滋養(yǎng)體和包囊。如果沒(méi)有相差顯微鏡的話,在蓋玻片邊緣加盧戈氏碘液1滴,使滋養(yǎng)體和包囊著色,增加蟲(chóng)體內(nèi)細(xì)胞核的反差,使之更容易鑒定。賈第蟲(chóng)包囊在無(wú)癥狀宿主的正常糞便中同樣能夠觀察到。但也有少數(shù)病例雖然出現(xiàn)了臨床癥狀,但容易造成漏檢,在糞便中既找不到包囊,也找不到滋養(yǎng)體,所以需要多次采集進(jìn)行鑒定為宜。

3.1.2 快速姬姆薩染色法診斷

采用此方法檢查時(shí),取待測(cè)糞便樣本,置潔凈離心管中,加入磷酸鹽緩沖液稀釋,混勻,室溫靜置5 min,取中上層液體做滴片,姬姆薩快速染色,動(dòng)態(tài)顯微鏡觀察結(jié)果[17]。也可利用內(nèi)窺鏡摘取黏膜組織,制作壓片,固定,姬姆薩染色觀察,可見(jiàn)鞭毛蟲(chóng)著紫色,腸上皮細(xì)胞呈粉紅色。如果是剖檢的寵物腸樣本,可用新鮮配制的姬姆薩液,對(duì)樣本中鮮活蟲(chóng)體進(jìn)行快速染色,利用動(dòng)態(tài)顯微攝錄,觀察、記載蟲(chóng)體特征,隨后進(jìn)行鑒定。

3.2 免疫學(xué)診斷方法

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。既可以檢測(cè)抗體,也可以檢測(cè)抗原,診斷陽(yáng)性率高,但操作過(guò)程較為煩瑣,且對(duì)熒光顯微鏡要求高。間接熒光抗體試驗(yàn)(IFA)是用熒光標(biāo)記抗體方法進(jìn)行檢驗(yàn)[18]。對(duì)流免疫電泳(CIE)法是通過(guò)檢測(cè)糞內(nèi)抗原進(jìn)行確定,診斷可靠性較高。

3.3 分子生物學(xué)診斷

生物素標(biāo)記賈第蟲(chóng)滋養(yǎng)體全基因組DNA近年來(lái)已獲得較大突破。鄧國(guó)超等研究了貓?jiān)促Z第蟲(chóng)EF1α和GDH基因的擴(kuò)增與分析,首次采用兩組引物EF1-F、EF1-R和GDHeF、GDHiF、GDHiR通過(guò)普通PCR及套式PCR方法對(duì)兩基因片段進(jìn)行特異性擴(kuò)增,為賈第蟲(chóng)分子學(xué)研究奠定了基礎(chǔ)[19]。張萍等針對(duì)犬源賈第蟲(chóng)16S rRNA基因片段設(shè)計(jì)一對(duì)引物,建立了賈第蟲(chóng)DNA的SYBR GreenⅠreal-time PCR檢測(cè)方法[20]。顧有方等首先對(duì)糞樣基因組DNA提取。按糞便DNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。所得DNA溶于50 μL洗脫緩沖液(TB)中,并于20℃保存?zhèn)溆?。然后采用基因的巢式PCR方法對(duì)所有糞樣進(jìn)擴(kuò)增,并對(duì)獲得的陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序和生物信息學(xué)分析,最后確定藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)的聚集體。李雅文等應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)廣州市某寵物寄養(yǎng)所采集的一株D型犬源賈第蟲(chóng)和一株F型貓?jiān)促Z第蟲(chóng)的核糖體IGS序列進(jìn)行了擴(kuò)增、克隆、測(cè)序,并建立了PCR檢測(cè)方法[21]。結(jié)果顯示D型犬源賈第蟲(chóng)和F型貓?jiān)促Z第蟲(chóng)的IGS序列存在多態(tài)性現(xiàn)象,種間差異明顯。

4 治 療

4.1 治療原則以驅(qū)蟲(chóng)、消炎、對(duì)癥治療為主

犬感染賈第蟲(chóng)病使用甲硝唑是臨床首選的治療藥物,然而有效率在50%~60%,比較低。同時(shí)在狗貓身上應(yīng)用也有一定安全顧慮,甲硝唑?qū)Z第蟲(chóng)有直接殺滅作用,也能干擾白胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附作用、抑制炎癥細(xì)胞的移行,起到免疫調(diào)節(jié)、增強(qiáng)免疫功能[22]。另外,甲硝唑的硝基還原中間代謝產(chǎn)物,對(duì)病變黏膜尚有修復(fù)作用。但甲硝唑胃腸道反應(yīng)較強(qiáng),所以要謹(jǐn)慎使用。甲氰咪胍可減少胃酸分泌,對(duì)抑制甲硝唑的消化道不良反應(yīng)有效。甲氰咪胍還可阻滯腸上皮肥大細(xì)胞、嗜鉻細(xì)胞釋放組胺和5-羥色胺,而使胃腸蠕動(dòng)減慢,有利于腸道黏膜損傷修復(fù)。阿苯達(dá)唑治療賈第鞭毛蟲(chóng)也有效,但是對(duì)于貓狗并不安全。歐洲批準(zhǔn)了芬苯達(dá)唑用于狗的賈第鞭毛蟲(chóng)感染治療,治療時(shí),可按照50 mg·kg-1,1次·d-1,連用3~5 d,能夠有效驅(qū)除狗的賈第鞭毛蟲(chóng)感染[23]。雙羥萘酸噻嘧啶和吡喹酮的復(fù)方制劑,可以用于狗的賈第鞭毛蟲(chóng)治療,1次·d-1,連用3 d。羅硝唑既有驅(qū)蟲(chóng)作用,也有抗菌作用,對(duì)賈第鞭毛蟲(chóng)病的治療效果也明顯。呋喃唑酮(使用5 d)的療效與甲硝唑相近,臨床多用混懸劑,這樣更易于治療感染幼貓。丙硫咪唑(貓連續(xù)用5 d)和芬苯達(dá)唑(貓均使用5 d)治療本病同樣有效。口服替硝唑?qū)θ堎Z第蟲(chóng)感染治療效果也較好,療程為6~7 d,臨床應(yīng)注意個(gè)別犬貓容易出現(xiàn)胃腸道反應(yīng)。

4.2 注意糾正脫水和調(diào)節(jié)電解質(zhì)失衡

脫水是患病犬貓的普遍并發(fā)癥,嘔吐、腹瀉都可能導(dǎo)致脫水。患病犬貓脫水后可出現(xiàn)厭食、昏睡、虛脫。脫水的治療主要是采用靜脈輸液來(lái)糾正脫水狀態(tài),并解決電解質(zhì)和酸堿紊亂問(wèn)題。臨床往往根據(jù)脫水的程度進(jìn)行補(bǔ)液,并隨時(shí)調(diào)整補(bǔ)液量。

4.3 嘔吐和食欲不振的治療

食欲對(duì)犬貓的恢復(fù)起著很關(guān)鍵的作用,且影響到患病犬貓的生存質(zhì)量。食欲減退會(huì)降低犬貓對(duì)疾病的抵抗力。嘔吐要注意積極治療,因?yàn)閲I吐會(huì)導(dǎo)致脫水、低血鉀癥、酸中毒等。食欲不振時(shí),應(yīng)減少飲食中蛋白質(zhì)的攝入量。惡心和嘔吐的治療可使用H2抗組胺藥抑制胃酸、使用愛(ài)茂爾等止吐藥抑制惡心和嘔吐、使用硫糖鋁保護(hù)黏膜等。

5 預(yù)防

5.1 疫苗預(yù)防

美國(guó)富道動(dòng)物保健公司生產(chǎn)的犬的Giardia Vax和貓的Fel-O-VaxGiardiat已批準(zhǔn)用來(lái)預(yù)防犬的賈第蟲(chóng)病,并且已向美國(guó)農(nóng)業(yè)部提交了使用效果的數(shù)據(jù)作為獲準(zhǔn)的部分材料。然而,多數(shù)獸醫(yī)認(rèn)為這些疫苗使用價(jià)值不大,只有少數(shù)人認(rèn)為有效。所以,疫苗預(yù)防賈第蟲(chóng)病還存在很多爭(zhēng)議。

5.2 定期驅(qū)蟲(chóng)

定期進(jìn)行體內(nèi)外驅(qū)蟲(chóng),對(duì)控制賈第鞭毛蟲(chóng)病的發(fā)病效果良好。犬的常規(guī)體內(nèi)驅(qū)蟲(chóng)推薦選擇拜寵清(1次·90 d-1)或者犬心寶(驅(qū)蟲(chóng)種類最多,除腸道寄生蟲(chóng)還可驅(qū)心臟寄生蟲(chóng),要求1次·30 d-1),體外驅(qū)蟲(chóng)推薦福萊恩,夏秋季1次·30 d-1,冬春季1次·90 d-1;貓的常規(guī)體內(nèi)驅(qū)蟲(chóng)推薦選擇貓寵清(1次·90 d-1)。體外驅(qū)蟲(chóng)推薦福萊恩或者大寵愛(ài),如果散養(yǎng),建議體外驅(qū)蟲(chóng)1次·30 d-1。如果家養(yǎng),則1次·90 d-1進(jìn)行體外驅(qū)蟲(chóng)。群養(yǎng)犬貓爆發(fā)賈第鞭毛蟲(chóng)感染時(shí),必須要對(duì)全群一起投放抗賈第鞭毛蟲(chóng)的藥物,如僅對(duì)發(fā)病的犬貓作治療處理,其糞便中排泄出的滋養(yǎng)體或包囊又會(huì)感染群內(nèi)其他犬貓,造成疾病繼續(xù)傳播。

5.3 排泄物處理,特別要注意糞便的消毒處理

賈第鞭毛蟲(chóng)屬于人畜共患傳染病,在人類及犬貓之間是會(huì)互相傳染的,尤其對(duì)于抵抗力差的兒童及老人或免疫不全患者而言,要謹(jǐn)慎預(yù)防賈第鞭毛蟲(chóng)感染。所以在處理犬貓的糞便時(shí),應(yīng)該注意到衛(wèi)生防護(hù)的問(wèn)題,如果犬貓被確認(rèn)感染,應(yīng)避免讓小孩、老人及免疫功能差的人來(lái)處理貓咪的排泄物。

5.4 隔離病原攜帶的犬貓

新購(gòu)入的犬貓應(yīng)先進(jìn)行隔離及檢驗(yàn),確認(rèn)無(wú)賈第鞭毛蟲(chóng)病原攜帶后才能和其他犬貓混養(yǎng)。尤其犬貓感染賈第鞭毛蟲(chóng)后,可能沒(méi)有任何的臨床癥狀,但在抗病能力下降及年老、虛弱的時(shí)候,賈第鞭毛蟲(chóng)就會(huì)大量增殖,并造成胃腸道癥狀,亦會(huì)危害其他健康犬貓。

6 小結(jié)

賈第鞭毛蟲(chóng)作為一種人獸共患寄生蟲(chóng)病,越來(lái)越得到人們的重視,犬貓作為中間宿主,在其感染后積極治療,對(duì)于犬貓自身或者人類的健康都有積極意義。特別是隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,診斷手段和治療方法也將越來(lái)越多。在賈第鞭毛蟲(chóng)病的診治過(guò)程中,要注意以下幾點(diǎn)。要對(duì)可疑患病犬貓作積極診斷,盡早確診。使用驅(qū)蟲(chóng)藥物時(shí),建議兩種藥物作交替使用或聯(lián)合使用,以防賈第鞭毛蟲(chóng)可能會(huì)對(duì)某些藥物產(chǎn)生抵抗力。盡量選用優(yōu)質(zhì)日糧,增加寵物犬貓的抗病能力,尤其要注意在患有其他疾病或存在免疫缺陷時(shí),會(huì)增加感染賈第鞭毛蟲(chóng)病的機(jī)會(huì),或者在感染后增加治療難度。日常飼養(yǎng)中,要注意環(huán)境的定期消毒,不要忽視賈第鞭毛蟲(chóng)卵對(duì)外界環(huán)境較強(qiáng)的抵抗力,這會(huì)增加犬貓重復(fù)感染的幾率。總之,一旦確診本病,應(yīng)盡早制定科學(xué)的治療方案,在用藥的同時(shí),盡量保持足夠的營(yíng)養(yǎng)攝入,積極治療并發(fā)癥,增加犬貓抗病能力。當(dāng)然,這些問(wèn)題的實(shí)現(xiàn)需要其主人的積極配合,真正完全治愈,還要依靠實(shí)驗(yàn)室的定期監(jiān)測(cè)。

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