1 培養(yǎng)基的制作

取干燥無霉變豌豆粒大小的玉米砂粒，最好經(jīng)粉碎機加工，用篩子去除面粉和玉米皮，淘洗干凈后置于石灰水清液（pH8左右）中浸泡2～3 h，再淘洗至無渾濁，瀝水3～5 min，放入蒸鍋蒸10～20 min至八成熟，盛入容器內(nèi)，按每千克干粒加入磷酸二氫鉀3 g，白糖20 g，復(fù)合肥8 g，攪拌溶化冷卻呈砂粒狀顆粒，如果不呈砂粒狀說明蒸的時間太長，應(yīng)重新置備，所以掌握好蒸玉米砂很關(guān)鍵。將制作好的玉米砂分別裝入試管（干粒重10 g，用于轉(zhuǎn)管生產(chǎn)和母種分離），用木棒輕壓實，用濕棉塞（使用時捏擠至無水珠滴落為宜）封口，以手提棉塞頭試管不掉下為宜，每7支扎成一捆，即可滅菌。用家用壓力鍋滅菌，先向鍋內(nèi)注水1.5 kg，試管直立于鍋底，用繩將鍋內(nèi)小捆扎成一體。調(diào)大火至水開后蓋上鍋蓋，排氣孔排氣5 min，限壓閥噴蒸汽時開始計時，維持40～50 min，冷卻后取出備用。也可用大鍋常壓滅菌，方法是鍋蓋四周排汽開始計時，維持2.5 h，同樣能達到滅菌效果。無論用哪種方法滅菌，要注意試管棉塞不要挨著鍋壁，以防冷凝水浸濕棉塞。?；鸷罄鋮s至30℃以下開蓋取出，這也是滅菌的關(guān)鍵。

2 母種轉(zhuǎn)接

用甲醛和高錳酸鉀熏蒸接種箱10～15 min，試管用75%酒精擦拭消毒。按常規(guī)接種方法進行操作。

3 母種簡易保藏

當繼代或傳代母種試管內(nèi)的菌絲萌發(fā)長至1～2 cm時，試管口棉塞剪齊與管口齊平，取白色蠟燭2支放入直徑約5～6 cm的空罐內(nèi)熔化形成蠟液并煮沸，迅速將剪好棉塞試管倒立，入溶沸的蠟液浸泡10 s，待蠟液不產(chǎn)生氣泡時，自然冷卻直至蠟燭的溶液與棉塞融合凝固（起隔絕空氣作用），置室內(nèi)陰涼黑暗處，可保存1～2年。