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(吉林化工學(xué)院 資源與環(huán)境工程學(xué)院，吉林 吉林 132022)

糠椴(Tilia mandschurica Rupr .)是椴樹(shù)科(Tiliaceae)椴樹(shù)屬(Tilia)高大落闊葉喬木,廣泛分布于以長(zhǎng)白山脈為中心的我國(guó)東北地區(qū)。糠椴樹(shù)冠大，形態(tài)優(yōu)美，生長(zhǎng)快，耐修剪，是重要的綠化樹(shù)種?？烽材静募y理通直，結(jié)構(gòu)致密均勻，重量輕，易加工，適用于建筑、家具、雕刻等行業(yè)，是重要的用材經(jīng)濟(jì)樹(shù)種，也是重要的蜜源樹(shù)種[1-3]。關(guān)于糠椴的研究，多集中在糠椴形態(tài)及分類學(xué)、生態(tài)及地理學(xué)以及育種造林學(xué)等方面[4-9]。

糠椴花有令人愉悅的甜香氣息，是優(yōu)質(zhì)的蜜源。與糠椴花相關(guān)的研究主要在流蜜情況及蜂蜜的高產(chǎn)技術(shù)上[10]，也有關(guān)于紫椴花藥理作用及化學(xué)成分的研究，多集中在多糖，黃酮及提取物等方面[11-12]?？烽膊煌鞴倩瘜W(xué)成分的研究已有報(bào)道[13]，但關(guān)于糠椴花揮發(fā)性有機(jī)成分的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)以吉林南樓山糠椴鮮花為試樣，采用頂空-固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HS-SPME-GC-MS)分析其揮發(fā)性有機(jī)成分，為糠椴資源的深度利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

糠椴花，2018年7月15日采自吉林省吉林市南樓山(東經(jīng)126°61＇，北緯43°39＇)，為糠椴的新鮮開(kāi)放花朵。將采集到的新鮮糠椴花朵儲(chǔ)存于大口具塞玻璃采樣瓶中，當(dāng)日完成分析測(cè)試。

1.2 儀器與設(shè)備

GC-MS-2010-plus型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有EI源，四級(jí)桿質(zhì)量分析器；GC-MS Solution，日本島津公司；NIST05版質(zhì)譜圖庫(kù)；DHG-9070A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；57330U型手動(dòng)SPME萃取手柄及65μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯(PDMS/DVB)萃取探頭；20 mL精密螺紋口透明玻璃頂空進(jìn)樣瓶，美國(guó)Supelco公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 頂空固相微萃取

在頂空萃取樣本之前，先將65 μm PDMS/DVB固相微萃取探頭安裝于手動(dòng)SPME進(jìn)樣手柄上，于氣相色譜進(jìn)樣口250 ℃老化30 min。選取新鮮完好的糠椴花朵5.0 g，置于20 mL 配有聚四氟乙烯膠墊的樣品瓶中，擰緊瓶蓋。將含有糠椴花朵樣本的密封頂空瓶置于恒溫箱內(nèi)，控制60 ℃恒溫平衡30 min，然后將老化后的固相微萃取探頭插過(guò)隔膜墊，進(jìn)入密封樣品瓶中，推出萃取探頭，60 ℃頂空萃取30 min，萃取完成后，將固相微萃取裝置迅速插入GC進(jìn)樣器，250 ℃條件下熱解析2.0 min。

1.3.2 色譜-質(zhì)譜條件

氣相色譜儀熱解析溫度250 ℃；色譜柱：RTX-5MS 石英毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)；色譜柱箱升溫程序：50 ℃保持3 min，以3℃/min升至100 ℃，然后以6 ℃/min升至200 ℃，再以8 ℃/min升至280 ℃保持10 min；氦氣(99.999%)為載氣，流量1.94 mL/min，壓力88.3 kPa；熱解析進(jìn)樣，分流比10∶1。

離子源溫度200 ℃；傳輸線溫度230 ℃；EI電子轟擊離子源，電子能量70 eV，燈絲3.5 min后開(kāi)啟；四極桿質(zhì)量分離器，質(zhì)量掃描范圍m/z 30～500；檢測(cè)電壓0.85 kV，記錄4.0～45 min信號(hào)。

1.4 測(cè)定方法

試樣分析測(cè)定采用GC-MS-2010-plus型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。按1.3.2項(xiàng)色譜-質(zhì)譜條件準(zhǔn)備好氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；按1.3.1項(xiàng)頂空-固相微萃取制備樣本熱解析進(jìn)樣分析，同時(shí)啟動(dòng)色譜工作站GC-MS Solution記錄數(shù)據(jù)，通GC-MS Solution色譜工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)檢索NIST05譜圖庫(kù)，進(jìn)行譜圖解析，確認(rèn)其各個(gè)揮發(fā)性成分結(jié)構(gòu)；定性分析后通過(guò)色譜工作站GC-MS Solution數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)按面積歸一化法進(jìn)行定量分析，分別求出各揮發(fā)性成分的相對(duì)百分含量。

2 結(jié)果與分析

樣本按1.3項(xiàng)試驗(yàn)條件進(jìn)行氣相色譜質(zhì)譜分析，對(duì)應(yīng)總離子流色譜圖如圖1所示。

圖1 糠椴花揮發(fā)性成分總離子流色譜圖Fig.1 Total ion chromatogram of volatile compounds from Tilia mandschurica flowers表1 糠椴花揮發(fā)性成分及相對(duì)含量Table 1 The main compounds and relative contents of Tilia mandschurica flowers

從圖1可以看出，試驗(yàn)用氣相色譜條件滿足糠椴鮮花揮發(fā)性成分的分離要求。經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析，用NIST05數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索，分離出52個(gè)色譜峰，最終鑒定39種成分，占總面積的96.10 %。揮發(fā)性成分分析及面積歸一化法定量結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 數(shù)據(jù)說(shuō)明，糠椴花主要揮發(fā)性有機(jī)成分有香茅醇 (1.90 %)，苯乙醇 (4.83%)，β-順式-羅勒烯 (67.26 %)，

2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯(3.49 %)，α-法尼烯(2.75 %)等，占揮發(fā)性物質(zhì)總量的80.23 %。

對(duì)分離鑒定出的39種揮發(fā)性有機(jī)成分進(jìn)行歸類分析，其中醇類物質(zhì)6種(7.96 %)，萜烯類16種(82.09 %)，烷烴類物質(zhì)10種(3.03 %)，其它含氧化合物化合物7種(3.02 %)。糠椴鮮花揮發(fā)性有機(jī)物中烯萜類物質(zhì)含量最多，占總含量的82.09 %，含量較高是β-順式-羅勒烯 (67.26 %)，2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯(3.49 %)，β-反式-羅勒烯(1.43 %)，它們同為無(wú)環(huán)單萜類化合物,屬于同分異構(gòu)體。β-順式-羅勒烯具有溫暖甜香、花香氣息，是糠椴鮮花的主要揮發(fā)性物質(zhì)；2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯即(E,E)-2,6-別羅勒烯有新鮮的甜香、花香氣息；β-反式-羅勒烯具有溫暖的青香，木香味，它們共同作用使糠椴花散發(fā)溫暖的甜香韻味。此外(E)-β-羅勒烯植物生理研究表明[14-15],在眾多調(diào)控植物防御反應(yīng)的信號(hào)分子中，(E)-β-羅勒烯是一種與植物防御啟動(dòng)密切相關(guān)的信號(hào)分子。蜜蜂生理研究發(fā)現(xiàn)，(E)-β-羅勒烯也是蜜蜂幼蟲(chóng)信息素的一種組分，它不僅能夠抑制蜜蜂工蜂的卵巢成熟，還參與調(diào)節(jié)工蜂的采粉行為，提高了采粉蜂的比例，增加了哺育蜂回返巢房的頻率，在蜜蜂養(yǎng)殖業(yè)具有一定科學(xué)價(jià)值。苯乙醇[16-17]是一種簡(jiǎn)單的芳香族伯醇，具有細(xì)膩、淡雅而持久的玫瑰花香味。苯乙醇對(duì)其他香氣成分有增效作用，可用作香料底香，是食品、化妝品、煙草和日化用品中重要香料成分，在醫(yī)藥上也常用作抑菌劑。香茅醇學(xué)名3,7-二甲基- 6-辛烯-1-醇,具有甜的花香氣味,類似于玫瑰花的氣味是一種重要的香料原料[18]。也有研究表明香茅醇對(duì)致病性念珠菌等真菌有抑制作用[19]。羅勒烯，苯乙醇，香茅醇共同賦予糠椴花溫暖、令人愉悅的甜香香氣。羅勒烯作為植物防御啟動(dòng)信號(hào)分子及蜜蜂信息激素，對(duì)研究糠椴花為蜜源植物及其作用機(jī)制有重要價(jià)值。苯乙醇，香茅醇的抑菌作用為探討糠椴花的藥用功效指明方向。

3 結(jié)論

采用RTX-5MS 石英毛細(xì)管柱對(duì)糠椴鮮花中揮發(fā)性有機(jī)成分進(jìn)行分離，經(jīng)MS鑒定，主要成分為香茅醇 (1.90 %)，苯乙醇 (4.83%)，β-順式-羅勒烯 (67.26 %)，2,6-二甲基-2,4,6-辛三烯(3.49 %)，α-法尼烯(2.75 %)等。

吉林省長(zhǎng)白山脈森林資源豐富，糠椴分布廣泛?？烽不ê喾N活性物質(zhì)，對(duì)其揮發(fā)性有機(jī)成分的研究，為集蜜源和藥用為一身的這一植物資源的深度開(kāi)發(fā)提供了理論依據(jù)。