近年來(lái),各種牛奶安全問(wèn)題,尤其是黃曲霉毒素M1(af l atoxinM1,AFM1)污染問(wèn)題的不斷出現(xiàn),給消費(fèi)者健康帶來(lái)危害。AFM1主要存在于牛乳中,這主要是由于奶牛攝取了被黃曲霉毒素B1(af l atoxinB1,AFB1)污染的飼料而產(chǎn)生的。AFM1性質(zhì)穩(wěn)定,常見(jiàn)的3種牛奶加工方式——巴氏殺菌(LTLT,63℃保持30min)、高溫快速巴氏殺菌(HTST,72℃保持15s)和超高溫滅菌(UHT,135℃保持1~2s)均無(wú)法破壞其結(jié)構(gòu),因此控制飼料及原奶中AFB1的含量顯得尤其重要。
液AFM1檢測(cè)技術(shù)。目前,對(duì)牛奶中AFM1的檢測(cè)方法分為兩大類(lèi),一類(lèi)是以色譜技術(shù)為基礎(chǔ)的物理化學(xué)分析方法,包括薄層層析色譜(TLC)法、高效液相色譜(HPLC)法、氣相色譜(GC)法等;另一類(lèi)是可快速檢測(cè)的免疫化學(xué)方法,包括FL法、ELISA法、膠體金免疫層析(GICT)法。
酶聯(lián)免疫吸附法。酶聯(lián)免疫吸附法(ELASA法)是高樣品量的篩查方法,目前黃曲霉毒素檢測(cè)已經(jīng)有成熟的商品化試劑盒。主要原理是抗原、抗體反應(yīng)與酶和底物反應(yīng)進(jìn)行顯色,將顯色的微孔板通過(guò)酶標(biāo)儀進(jìn)行定量分析。ELASA法主要有間接法、競(jìng)爭(zhēng)法和生物酶標(biāo)親合素法。目前競(jìng)爭(zhēng)法是ELASA常用的方法,原理是與黃曲霉毒素M1高親和力的抗體預(yù)先包被于固定相的聚苯乙烯微孔中。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入相應(yīng)的微孔中,如果有黃曲霉毒素M1存在,會(huì)與包被的抗體結(jié)合。然后加入的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素會(huì)與沒(méi)有跟標(biāo)準(zhǔn)品或樣品結(jié)合的抗體結(jié)合。經(jīng)過(guò)溫育和洗板后,加入辣根過(guò)氧化物酶催化的底物,在酶的作用下微孔顯藍(lán)色。標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的黃曲霉毒素M1的含量與微孔顏色成反比。加入終止液后微孔顏色由藍(lán)色變成黃色。在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和對(duì)應(yīng)的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而確定樣品中黃曲霉毒素的含量。
我國(guó)黃曲霉毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)。我國(guó)于2017年發(fā)布《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限量》(GB2761),該標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中黃曲霉毒素B1的限量為0.5μg/kg(以粉狀產(chǎn)品計(jì));乳與乳制品中黃曲霉毒素M1的限量為0.5μg/kg,嬰兒配方食品、較大嬰兒及幼兒配方食品、特殊A醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品中黃曲霉毒素M1的限量為0.5μg/kg(以粉狀產(chǎn)品計(jì))。
國(guó)際食品法典委員會(huì)黃曲霉毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)際食品法典委員會(huì)(CAC)發(fā)布的《食品和飼料中污染物及毒素限量標(biāo)準(zhǔn)》(CODEXSTAN193-1995)中規(guī)定牛奶中黃曲霉M1的最大殘留量為0.5μg/kg,食品中黃曲霉毒素(B1+B2+G1+G2)總量為15μg/kg。
我國(guó)的限量標(biāo)準(zhǔn)是以保護(hù)消費(fèi)者健康作為首要目標(biāo),根據(jù)世界衛(wèi)生組織規(guī)定的黃曲霉毒素最大允許攝入量,分析大量而廣泛的食品黃曲霉毒素?cái)?shù)據(jù),以及在我國(guó)居民食品攝入量評(píng)估等基礎(chǔ)上制定,與CAC和美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)水平基本保持一致,尤其是涉及嬰幼兒的食品和乳制品,我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)有明確的限量規(guī)定。為與國(guó)際接軌我國(guó)于2011年10月成立國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心,負(fù)責(zé)食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和監(jiān)測(cè),以及制定食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。但由于我國(guó)食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估處于發(fā)展的階段,與國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家相比仍有一定的差距。近年來(lái)全球各國(guó)對(duì)于黃曲霉毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)要求趨于嚴(yán)格,我們應(yīng)關(guān)注黃曲霉毒素限量標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)態(tài),進(jìn)行科學(xué)的評(píng)估。