許亞茹，李孟芝，尉廣飛,李 剛，董林林＊＊

（1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 北京 100700；2.盛實(shí)百草藥業(yè)有限公司 北京 100062）

羅漢果為葫蘆科植物羅漢果（Siraitia grosvenorii）的干燥果實(shí)，又名光果木鱉、金不換、拉汗果、羅漢表、假苦瓜、裸龜巴等，為雌雄異株[1,2]。羅漢果具有清熱去火，潤(rùn)肺滑腸，利咽開音的功效，在治療咳嗽、咽喉腫痛、便秘方面有廣泛的應(yīng)用，除此之外，經(jīng)研究者發(fā)現(xiàn)在治療癌癥方面也有顯著療效，可作為配方藥和中成藥[3,4]。羅漢果具有熱量低但甜度高的特點(diǎn)，糖尿病、高血壓等患者可以食用，被廣泛開發(fā)為飲料、保健食品[5]。羅漢果具有數(shù)百年野生到人工栽培的歷史，人工栽培規(guī)模不斷擴(kuò)大，主要栽植在我國(guó)的廣西、廣東、湖南、江西和貴州等地域，其中廣西永福、臨桂為我國(guó)羅漢果種植中心的起源，占全世界羅漢果產(chǎn)業(yè)產(chǎn)量的98%[6]。

羅漢果的生長(zhǎng)正值高溫多雨的季節(jié)，易發(fā)生病蟲害，長(zhǎng)期使用高效、快速的化學(xué)農(nóng)藥，易使病蟲害產(chǎn)生抗藥性，藥農(nóng)不科學(xué)的使用農(nóng)藥導(dǎo)致羅漢果農(nóng)藥殘留量超標(biāo)[7,8]。農(nóng)殘超標(biāo)使中藥材及其制劑的質(zhì)量安全得不到保障，食用后極大危害人體健康，可導(dǎo)致急性中毒，長(zhǎng)期蓄積還會(huì)引起多種慢性疾病[9]。因此改進(jìn)栽培措施，推廣無公害栽培體系，成為確保生產(chǎn)高品質(zhì)、安全藥材的主要途徑[10]。無公害中藥材是指產(chǎn)地環(huán)境、生產(chǎn)過程和藥材質(zhì)量均符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范的要求，并經(jīng)有資格的認(rèn)證機(jī)構(gòu)認(rèn)證獲得認(rèn)證證書的未加工或者初加工的中藥材產(chǎn)品[11]。本文綜述了羅漢果無公害種植過程中產(chǎn)地環(huán)境的選擇、優(yōu)質(zhì)抗逆新品種的選育、田間綜合農(nóng)藝管理措施、及安全、低毒的病蟲害綜合防治技術(shù)，為羅漢果的無公害生產(chǎn)提供根據(jù)，確保羅漢果產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1 無公害羅漢果的產(chǎn)地環(huán)境

無公害羅漢果生產(chǎn)的產(chǎn)地環(huán)境應(yīng)符合國(guó)家《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(試行)》[12]、NY/T 2798.3-2015 無公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量安全控制技術(shù)規(guī)范[13]、GB15618-2008土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[14]、GB5084-2005農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)[15]、GB/T3095-2012環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[16]及GB3838-2002國(guó)家地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[17]等要求。無公害羅漢果生產(chǎn)選擇生態(tài)環(huán)境條件較好的區(qū)域，而且產(chǎn)地區(qū)域和灌溉上游無或不直接受工業(yè)“三廢”、醫(yī)療廢棄物、城鎮(zhèn)生活等污染，避開公路的主干線、土壤重金屬含量高等地區(qū)[11]。不能選擇冶煉工業(yè)（工廠）下風(fēng)向3 km內(nèi)，且空氣環(huán)境質(zhì)量應(yīng)達(dá)到GB3095-2012環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一、二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)值要求[16]。

生態(tài)環(huán)境與中藥資源可持續(xù)發(fā)展的關(guān)系密切，作為道地藥材形成的重要要素之一，對(duì)藥材的生長(zhǎng)、發(fā)育及有效成分的產(chǎn)生及累積直接產(chǎn)生影響[18]。根據(jù)地域性原則及其生物學(xué)特征選擇無公害中藥材的生產(chǎn)基地，開展并分析中藥材適宜生態(tài)區(qū)域選址，確定中藥材生產(chǎn)基地，是無公害中藥材規(guī)模生產(chǎn)的重要途徑。依據(jù)《中國(guó)藥材產(chǎn)地宜性區(qū)劃（第二版）》[19],運(yùn)用GMPGIS對(duì)當(dāng)前主產(chǎn)區(qū)廣西一帶樣點(diǎn)進(jìn)行分析，得到羅漢果主要生長(zhǎng)區(qū)域生態(tài)因子值范圍，其年生長(zhǎng)均溫：16.1-26.5℃；最冷季均溫：1.7-14.1℃；最熱季均溫：19.3-28.7℃；年均溫：10.9-28.7℃；年均相對(duì)濕度71.0%-74.2%、年均降水量1316-1891 mm、年均日照125.2-136.9 W/m2[11,19]。

2 優(yōu)質(zhì)抗逆新品種選育

羅漢果栽培品種的品質(zhì)、產(chǎn)量以及抗病性等都存在差異，選育性狀優(yōu)良、抗逆性強(qiáng)等優(yōu)良群體可減少農(nóng)藥的使用量，保障無公害羅漢果的生產(chǎn)[10,20]。隨種植面積擴(kuò)大，羅漢果品種選育成為種植產(chǎn)業(yè)發(fā)展關(guān)鍵,目前也選育出不同特性的優(yōu)質(zhì)羅漢果品種（表1）。羅漢果品種選擇以早熟品種及抗性強(qiáng)的品種為主[6]。羅漢果栽培品種主要包括長(zhǎng)灘果、青皮果、紅毛果、拉江果、冬瓜果、白毛果、山茶果等[21]。青皮果早熟，果大，抗性強(qiáng)，果性好，產(chǎn)量高，適應(yīng)性廣，成為目前種植的主要栽培品種，白毛果具有早熟優(yōu)質(zhì)的特性，成為栽培的首選品種[7,22]。

羅漢果品種主要用常規(guī)雜交技術(shù)、染色體工程技術(shù)、基因工程技術(shù)進(jìn)行創(chuàng)新選育[2]。羅漢果是雌雄異株的植物，現(xiàn)有品種均為不是純合體。常規(guī)雜交技術(shù)是將性狀優(yōu)良的父母本雜交，得到雜種F1，篩選得到優(yōu)良植株，獲得優(yōu)良植株后用莖段組織培養(yǎng)便可得到羅漢果優(yōu)良品種[23]。龍江青皮果母本與父本冬瓜果進(jìn)行雜交，在F1群體中篩選得到果大、結(jié)果率高的植株，將此植株的種子以組織培養(yǎng)的方法得到實(shí)生苗，將具有坐果率高、大果率高、果型好以及耐干早特性的實(shí)生苗取莖尖，組織培養(yǎng)培育得到羅漢果無性系新品種，不裂果是其特性，定名為永青1號(hào)[24]。青皮3號(hào)母本與冬瓜果父本進(jìn)行雜交，從F1選擇到大中果數(shù)量多、座果率高、開花結(jié)果穩(wěn)定、豐產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的優(yōu)良植株，該植株甜苷含量比親本品種青皮3號(hào)高33%，且受高溫和陰雨不良天氣影響小，以該植株現(xiàn)蕾開花莖段作外植體以組織培養(yǎng)的方式繁殖為無性系，得到普豐青皮品種[25]。羅漢果新品系“伯林二號(hào)”從青皮果中單株優(yōu)選，以定向培養(yǎng)方法選育的品種，該品種大果率可達(dá)85%以上，甜苷含量比土種羅漢果高5%-10%，具有成熟一致、耐旱耐肥及適應(yīng)性強(qiáng)和性狀穩(wěn)定的優(yōu)良特性[26]。染色體工程技術(shù)通過不同倍體之間雜交可獲得多倍體品種，母本“農(nóng)院B6號(hào)”與父本“藥園敗雄1號(hào)”進(jìn)行雜交，F(xiàn)1植株組織培養(yǎng)選擇繁育出羅漢果新品種“藥園無籽1號(hào)”，該品種無籽，果實(shí)率達(dá)到90%，果實(shí)果肉重達(dá)到62.3%，坐果近15個(gè)/m2[2,27]。

3 綜合農(nóng)藝管理措施

無公害羅漢果綜合農(nóng)藝管理措施包括種植前的土壤改良措施、水光溫度及施肥的管理。土壤改良可從根本上減少病蟲害的發(fā)生，水、光、溫度及施肥的管理對(duì)羅漢果的產(chǎn)量和品質(zhì)尤為重要。

3.1 無公害羅漢果土壤改良

羅漢果種植過的土地中微生物形成競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，導(dǎo)致大量有益微生物死亡，有機(jī)質(zhì)無法分解形成腐殖物質(zhì)，土壤肥力下降[3]；殘留農(nóng)藥過多，導(dǎo)致羅漢果藥材的污染，因此土壤改良成為增加土壤肥力及控制羅漢果藥材農(nóng)藥污染的主要途徑[8]。土壤改良措施包括合理輪作和土壤消毒。

3.1.1 合理輪作

羅漢果連作容易造成土壤中大量的致病微生物、害蟲的積累[10]。綜合考慮種植無公害中藥材應(yīng)當(dāng)采用合理輪作來改良土壤，減少對(duì)中藥材生長(zhǎng)不利的致病微生物[30]。針對(duì)中藥材不同種植情況，采用合理的輪作制度，可以提高中藥材的復(fù)種指數(shù)及土壤利用率，豐富土壤有機(jī)質(zhì)及養(yǎng)分含量，消除土壤有害物質(zhì)，防治病蟲害，提高中藥材的品質(zhì)和數(shù)量及額外增加種植戶的收入[31,32]。合理輪作既對(duì)羅漢果生長(zhǎng)有利，又提高了生態(tài)環(huán)境效應(yīng)，羅漢果與水稻、蔥、蒜、韭菜、林木輪作對(duì)根結(jié)線蟲病害表現(xiàn)顯著防治效果[33]。傳統(tǒng)的羅漢果栽培模式對(duì)土地資源而言是一種浪費(fèi)，利用輪作的栽培方式可以提升土地使用率，還可以培肥土壤，行間控草，增加種植者的經(jīng)濟(jì)收入[34]。

表1 羅漢果主要優(yōu)良品種

3.1.2 土壤消毒

土壤中存在一定數(shù)量的病蟲害，土壤消毒成為殺死致病微生物、害蟲的有效措施，主要分為物理消毒、化學(xué)消毒和生物熏蒸[35]。日光消毒、蒸汽消毒等方式對(duì)環(huán)境生態(tài)友好，避免造成環(huán)境污染，但存在消毒不徹底、受環(huán)境等因素影響的缺點(diǎn)[36,37]?；瘜W(xué)消毒是利用化學(xué)藥劑將土壤中的病原菌和蟲卵進(jìn)行殺滅的消毒方式[38]；生物熏蒸抑制或殺死土壤中有害生物的方式是利用植物的有機(jī)質(zhì)分解過程中釋放揮發(fā)性物質(zhì)[39]。化學(xué)消毒和生物熏蒸均可利用熏蒸劑對(duì)土壤進(jìn)行消毒，具有消毒徹底、時(shí)間短、不受環(huán)境影響等優(yōu)點(diǎn)[10]。生防制劑的活性高且用量少，一般使用劑量為化學(xué)農(nóng)藥用量的10%-20%左右，可通過生防制劑拌苗集合土壤熏蒸技術(shù)配套使用[40]。土壤消毒影響有益菌，可通過及時(shí)補(bǔ)施生物菌肥的方法調(diào)控微生物群落，生物菌肥不但解決土壤中農(nóng)藥殘留問題，而且能培肥地力、活化土壤、為作物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等功效[41]。

種植羅漢果前，經(jīng)翻耕曬田后，用生石灰粉撒入穴內(nèi)進(jìn)行消毒，預(yù)防枯萎病及根結(jié)線蟲病和病毒等病菌[7]。整地時(shí)每畝撒施25-50 kg熟石灰，通過穴施漚制腐熟的農(nóng)家肥3-5 kg并施加適量比例鈣鎂磷肥，拌勻后作基肥，禁止使用內(nèi)吸型、毒性大、藥效長(zhǎng)、殘留時(shí)間長(zhǎng)的化學(xué)農(nóng)藥[6,7,42]。

3.2 水、光、溫度的管理

羅漢果喜潮濕，忌漬水，根系及塊莖漬水易腐爛，栽培土壤排水系統(tǒng)良好。羅漢果枝葉繁茂，生長(zhǎng)期間植株所需營(yíng)養(yǎng)多，植株體內(nèi)的水分蒸騰較快，花期和果實(shí)的生長(zhǎng)期較長(zhǎng)，整個(gè)生育期需水量較多，需要足夠的水分進(jìn)行生長(zhǎng)，空氣相對(duì)濕度為70%-85%，土壤相對(duì)濕度要求70%左右[1,43]。羅漢果不同生育期對(duì)水的需求量不同，根據(jù)生長(zhǎng)情況合理控制水分，利于植株生長(zhǎng)及減少病蟲害發(fā)生。羅漢果種植前澆足定根水；苗期避免多淋水，以免引起病蟲害的發(fā)生；藤蔓生長(zhǎng)期旺盛，需要水量多，以開花為主的時(shí)期需水量不大，果實(shí)生長(zhǎng)快且不易裂果；果實(shí)膨大期田間應(yīng)保持60%-80%持水量以滿足生長(zhǎng)，當(dāng)高溫干旱時(shí)，可進(jìn)行透水保濕，維持適宜的土壤濕度和空氣濕度，透水時(shí)水深至畦高1/3便要進(jìn)行排水，否則易引起爛根感病[44,46]。

羅漢果是短日照植物，喜光忌強(qiáng)光，每天的日照時(shí)間為6-8 h為宜，光以散射光照射最好。羅漢果幼苗期喜弱光，在半蔭條件下適宜生長(zhǎng)，可通過遮棚網(wǎng)遮擋陽光[47]。羅漢果開花結(jié)果盛期的有機(jī)物質(zhì)累積是通過增大光合作用及提高晝夜溫差的途徑[48]。在羅漢果生長(zhǎng)期間溫度是其生長(zhǎng)好壞的主要因素，對(duì)種植地區(qū)的溫度要做到合理改善及處理。溫度影響羅漢果生長(zhǎng)，低溫新梢會(huì)受到寒害而變枯發(fā)黑；高溫也會(huì)阻礙羅漢果的生長(zhǎng)發(fā)育，氣溫達(dá)到35℃以上時(shí)，萌發(fā)的花粉數(shù)量減少，不利于授粉受精，幼果數(shù)量明顯減少，導(dǎo)致果實(shí)發(fā)育延遲或停止[47]。羅漢果基本生育期（3-10月），月均溫的變化以前期低、中期高、后期略低為宜[48]。羅漢果有利的溫度特征是：冬季溫度低于5.0℃時(shí)需要進(jìn)行防寒；當(dāng)月均溫達(dá)到15.0℃時(shí)植物開始生長(zhǎng)；出苗與藤蔓抽生期平均溫度為18.0-25.0℃為宜；羅漢果的開花與果實(shí)膨大充實(shí)期，溫度25.0-28.0℃為宜，日較差溫度在7.0-9.0℃為宜[4,45,47,49]。

3.3 施肥管理

種植優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的羅漢果需在生長(zhǎng)期間進(jìn)行科學(xué)、高效、安全、合理的施肥。無公害羅漢果種植施肥多以農(nóng)家肥為主并減少化肥使用，可使土壤疏松防治板結(jié)并透氣[7]。根據(jù)羅漢果不同生長(zhǎng)期對(duì)養(yǎng)分需要量進(jìn)行適時(shí)、適量及適度施用。種植羅漢果前施基肥，過磷酸鈣100 kg左右、麩肥80-100 kg、有機(jī)肥1500-4000 kg充分混勻并堆漚，發(fā)酵腐熟后與回填的土拌勻，每穴施3-5 kg，而后覆土13 cm左右[1,6,21]。苗長(zhǎng)至30 cm時(shí)，施稀少量的速效磷鉀肥，用來促進(jìn)幼苗早生及快發(fā)；當(dāng)主蔓為50 cm左右可以施適量氮肥，確保植株攝入所需氮磷鉀等的含量；當(dāng)主蔓距頂棚為30 cm時(shí)，施促花肥，通過控制氮肥增施磷鉀肥來促進(jìn)各級(jí)側(cè)蔓形成以及花芽的分化；當(dāng)主蔓爬上棚，追施適量有機(jī)肥及磷鉀肥，可以促進(jìn)側(cè)蔓生長(zhǎng)并提高結(jié)果率[6,22]。羅漢果的現(xiàn)蕾盛期要強(qiáng)壯花蕾避免落花可用漚制腐熟的有機(jī)肥。盛花期，通過淋施稀糞水加少量硫酸鉀，并采用活性鈣兌水來淋施根部及葉面，用來加速果實(shí)的膨大，進(jìn)而提高座果率、防止生理性裂果[1]。

4 安全、低毒的病蟲害綜合防治

羅漢果生長(zhǎng)期間易受病蟲害的影響，進(jìn)行病蟲害防治，應(yīng)采取綜合的防治方法，充分發(fā)揮各種因素的自然控制、應(yīng)用耕作、田間管理等農(nóng)業(yè)措施、生物防治、物理防治、化學(xué)防治技術(shù)[50]。羅漢果主要病害有根結(jié)線蟲病、炭疽病、病毒?。ɑㄈ~病毒病和皰葉叢枝?。?、青枯病、白粉病、芽枯病、根腐?。ū?）。無公害羅漢果病害防治以農(nóng)業(yè)防治、物理防治、生物防治為主，化學(xué)防治為適當(dāng)?shù)妮o助[51,52]。農(nóng)業(yè)防治可以提高羅漢果的抗病性；生物防治安全高效[53]；物理防治對(duì)羅漢果和環(huán)境本身均無不良影響；農(nóng)藥使用不合理將會(huì)對(duì)環(huán)境及人體健康造成危害，合理使用會(huì)促進(jìn)羅漢果生長(zhǎng)[54]。安全、低毒防治病害的方法對(duì)羅漢果無公害栽培具有重要意義。

無公害羅漢果蟲害防治中應(yīng)以“預(yù)防為主，綜合防治”為原則，加強(qiáng)土水肥的管理，可減少蟲害發(fā)生率[52]。羅漢果主要蟲害有家白蟻、黃守瓜、果實(shí)蠅、愈斑天牛、瓜藤天牛、南瓜石蠅、紅蜘蛛[58]。無公害防治主要從羅漢果種植的土壤條件、環(huán)境條件、良種挑選等方面入手，通過選育羅漢果的抗性品種，培育其壯苗，通過增強(qiáng)栽培管理及合理施肥，改善并優(yōu)化田間生態(tài)系統(tǒng)，在病害防治方面優(yōu)先采用農(nóng)業(yè)防治、生物防治、物理防治，多采用高效低殘的化學(xué)防治方法[62-63]。蟲害的農(nóng)業(yè)防治主要采用清潔園田、間作、輪作等；物理防治主要有誘集法、燈光誘殺等（表3）。

5 討論

中藥產(chǎn)業(yè)迅速增長(zhǎng)，而野生藥材資源不斷減少，人工種植成為解決中藥材資源短缺的主要方式，但由于農(nóng)藥、化肥等不合理使用及種植過程中不規(guī)范操作，導(dǎo)致中藥材品質(zhì)低劣，嚴(yán)重危害人體的健康安全[9,11,18]。針對(duì)中藥材無規(guī)范的生產(chǎn)及農(nóng)藥殘留量、重金屬含量超標(biāo)的問題，中藥材無公害精細(xì)栽培體系成為打破無公害中藥材產(chǎn)業(yè)瓶頸的新方法，保障中藥材生產(chǎn)的規(guī)范化及精細(xì)化[65]。研究團(tuán)隊(duì)經(jīng)過多年的科研攻關(guān)結(jié)合田間地頭的生產(chǎn)實(shí)踐，制定中藥材無公害生產(chǎn)通用規(guī)程并建立150種常用大宗中藥材無公害生產(chǎn)操作規(guī)程，保障了無公害藥材安全的有效穩(wěn)定和可控，使我國(guó)中藥材生產(chǎn)進(jìn)入“無公害時(shí)代”[66]。羅漢果無公害栽培體系包含產(chǎn)地選擇、土壤改良、新品種選育、綜合農(nóng)藝管理、病蟲害綜合防治等關(guān)鍵技術(shù)，為無公害羅漢果的生產(chǎn)提供技術(shù)依據(jù)。

表2 無公害羅漢果主要病害類型及防治方法

表3 無公害羅漢果主要蟲害類型及防治方法

本草基因組學(xué)輔助中藥材的現(xiàn)在研究，推動(dòng)中藥材無公害生產(chǎn)的進(jìn)展。利用結(jié)構(gòu)基因組、功能基因組的研究解析藥用植物的遺傳機(jī)制，輔助新品種的選育，加速選育的進(jìn)程[67,68];基于遺傳信息的解析，通過光、肥等措施的調(diào)控，篩選與環(huán)境因子關(guān)聯(lián)的調(diào)控基因，為高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)中藥材新品種的選育提供依據(jù)[69,70]。采用土壤宏基因組技術(shù)，解析中藥材種植對(duì)土壤環(huán)境微生物群落的調(diào)控機(jī)制，結(jié)合純培養(yǎng)技術(shù)，為中藥材土壤改良、病害防治提供策略及生防材料[71-73]。同時(shí)，代謝組結(jié)合轉(zhuǎn)錄組技術(shù)解析不同生育期皂苷分布規(guī)律及調(diào)控皂苷合成的關(guān)鍵基因，為三七合理采收、品種改良與選育提供依據(jù)[74,75]。因此，隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，本草基因組學(xué)的研究取得顯著成果，將加快中藥材進(jìn)入“無公害時(shí)代”。

農(nóng)藥殘留及重金屬含量超標(biāo)等問題影響中藥材的安全及療效，然而無公害中藥材標(biāo)準(zhǔn)缺失，制約中藥材可持續(xù)發(fā)展。無公害中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立有利于中藥材產(chǎn)業(yè)的升級(jí)。如T/CATCM003-2017《無公害三七藥材及飲片農(nóng)藥與重金屬及有害元素的最大殘留限量》標(biāo)準(zhǔn)基于187個(gè)批次，近4萬數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)測(cè)算，規(guī)定了206項(xiàng)農(nóng)藥殘留、5項(xiàng)重金屬及有害元素的限量指標(biāo)[76]，為三七藥材及飲片的高品質(zhì)樹立了典范。T/CATCM001-2018《無公害人參藥材及飲片農(nóng)藥與重金屬及有害元素的最大殘留限量》規(guī)定了168種農(nóng)藥殘留限量及5種重金屬及有害元素限量，該標(biāo)準(zhǔn)的建立與發(fā)布提高了中國(guó)人參的品質(zhì)及在世界人參市場(chǎng)上的影響力及美譽(yù)度[77,78]。因此，應(yīng)加快無公害羅漢果質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立，將利于羅漢果生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化、產(chǎn)業(yè)化，并增加其食用的安全性。