祝俠麗 李玲華 黃河清

[摘要]溫敏脂質(zhì)體是一種新型靶向藥物載體。以溫敏脂質(zhì)體為載體包裹抗腫瘤藥物，可利用腫瘤組織的滯留增強（EPR）效應將抗腫瘤藥物載體靶向分布于腫瘤組織，然后結(jié)合局部外加熱觸發(fā)載體中的藥物在腫瘤組織釋放，可提高藥物的靶向性，降低全身毒副作用，并可實現(xiàn)腫瘤的熱化療聯(lián)合治療。本研究通過查閱近年來國內(nèi)外的相關(guān)文獻，對溫敏脂質(zhì)體作為腫瘤靶向遞藥載體的研究進行綜述。作為一種腫瘤靶向藥物載體，溫敏脂質(zhì)體具有良好的應用前景。

[關(guān)鍵詞]溫敏脂質(zhì)體；腫瘤靶向；遞藥載體

[中圖分類號] R73-362 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）9（a）-0031-04

[Abstract] Thermosensitive liposome is a new targeted drug carrier. The thermosensitive liposome is used as a carrier to encapsulate an anti-tumor drug， which can be distributed to tumor tissues on targeting by utilizing an enhanced permeability and retention effect of the tumor tissue. After that， the drugs in the carrier will be released into tumor tissues once triggered by local external heating， which can improve the drug targeting， reduce systemic side effects， and achieve combined therapy of tumor thermochemotherapy. In this research， the related literature at home and abroad in recent years and the studies of thermosensitive liposomes as tumor-targeted drug delivery carriers were reviewed. As a tumor-targeted drug carrier， thermosensitive liposome has a good prospect.

[Key words] Thermosensitive liposome； Tumor targeting； Drug delivery carrier

脂質(zhì)體（liposomes）作為一種抗腫瘤藥物載體，具有制備簡單、安全性高、靶向性強等優(yōu)點，在臨床上已逐漸開展應用。如何進一步提高脂質(zhì)體的靶向性，并促進藥物在靶組織的快速釋藥，是近年來該載體研究的熱點。采用溫敏脂質(zhì)體（thermosensitive liposomes，TSL）包裹抗腫瘤藥物并結(jié)合腫瘤組織的局部升溫，實現(xiàn)藥物的靶向傳遞以及在靶快速釋藥已經(jīng)成為一種嶄新的研究策略[1-2]。本研究就溫敏脂質(zhì)體作為腫瘤靶向遞藥載體的研究進展進行綜述。

1溫敏脂質(zhì)體與腫瘤治療

溫敏脂質(zhì)體介導的腫瘤靶向熱化療是近年腫瘤熱化療的一個新方向。溫敏脂質(zhì)體可在高于生理體溫的條件下迅速、有效地釋放藥物，又稱熱敏脂質(zhì)體。構(gòu)建脂質(zhì)體的磷脂都有特定的相變溫度（Tm），在低于Tm時，脂質(zhì)保持穩(wěn)定，達到Tm時，脂質(zhì)體膜的流動性、通透性增加，促使包封的藥物快速釋放。腫瘤熱療是將腫瘤組織加熱到稍高于體溫（如41℃～43℃），利用細胞的熱敏性治療腫瘤，同時熱療和化療具有協(xié)同增效的作用[3]。因而，把包封抗腫瘤藥物的溫敏脂質(zhì)體和腫瘤熱療聯(lián)合可能使腫瘤治療的效果顯著增強。Li等[4]制備阿霉素熱敏脂質(zhì)體并結(jié)合局部高溫進行抗腫瘤研究，發(fā)現(xiàn)42℃溫度下比37℃釋藥速度快、細胞攝取率高。Koning等[5]提出高溫可增加血管的通透性，因而局部高溫有利于脂質(zhì)體向?qū)嶓w瘤的傳遞。由此可見，溫敏脂質(zhì)體在腫瘤靶向熱化療領域具有較大的潛在應用價值。

2溫敏脂質(zhì)體常用材料

磷脂是制備溫敏脂質(zhì)體的主要材料，由于人體組織不能夠長時間地承受45℃以上的高溫，具體應根據(jù)溫敏脂質(zhì)體的釋藥溫度和腫瘤熱療的實際可操作溫度選擇適宜的磷脂。

2.1合成磷脂

藥用合成材料大多具有明確的化學結(jié)構(gòu)和相對分子量，來源穩(wěn)定，性能優(yōu)良，可供選擇腫瘤的品種及規(guī)格較多[6]。目前合成溫敏磷脂中以二棕櫚酰磷脂酰膽堿（DPPC）、二棕櫚酰磷脂酰甘油（DPPG）以及二棕櫚酰神經(jīng)鞘磷脂（DPSP）較為常用，其Tm均為41℃。還可以選用復合磷脂材料用以提高溫敏脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，并調(diào)節(jié)至適宜的Tm。二硬脂酰磷脂酰膽堿（DSPC）的Tm較高，為56℃，如將磷脂組成設計成DPPC/DSPC/膽固醇/DSPE-PEG2000=67∶15∶13∶5的溫敏脂質(zhì)體，其Tm測定結(jié)果是41.5℃[7]。此外，也可將DPPC與Tm較低的天然磷脂混合使用制備溫敏脂質(zhì)體[8]。

2.2天然磷脂

由于合成磷脂的工藝要求嚴格、產(chǎn)量有限、價格較高、不易保存，因而用合成磷脂制備溫敏脂質(zhì)體很難進行臨床研究和大規(guī)模生產(chǎn)。藥用天然材料廣泛存在于自然界，絕大部分天然材料安全無毒、性能穩(wěn)定、價格低廉[9]。如果能以天然磷脂為主要材料研發(fā)溫敏脂質(zhì)體將具有重要的科學意義和生產(chǎn)利用價值。天然磷脂雖成分較為復雜，相變范圍也比較寬，但如果固定原材料和提取方法，其也可能具有相對穩(wěn)定的相變溫度。如Chelvi等[10]以天然卵磷脂為主要材料制備溫敏脂質(zhì)體，其Tm為43℃。

2.3高分子材料

國內(nèi)外研究者曾嘗試利用合成的高分子材料代替合成磷脂，制備具有溫敏性的類脂泡囊，以降低成本、增加其實用性。Hossann等[11]合成了一種新型且具有隱形修飾功能的溫敏材料DPPGOG，實驗結(jié)果證明，該類脂小囊具有良好的溫敏性，但生物相容性欠佳且不具備生物可降解性。

3溫敏脂質(zhì)體的制備及表征

普通脂質(zhì)體的制備方法如薄膜法、逆相蒸發(fā)法等均適用于溫敏脂質(zhì)體的制備，但應同時注意不同制備方法可能影響脂質(zhì)體的粒徑、溫敏性及包封率等[12]。脂質(zhì)體的評價指標主要包括外觀形態(tài)、粒徑、Zeta電位、包封率與載藥量、體外釋藥、體內(nèi)藥物動力學和體內(nèi)分布，藥效學試驗等[13]。目前多采用透射電子顯微鏡（TEM）或掃描電子顯微鏡（SEM）對其外觀形態(tài)進行表征。粒徑及其分布對評價脂質(zhì)體具有重要意義，目前多采用激光納米粒度儀進行測定。Zeta電位可以預測脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，常用測定方法為電泳法和Zetamaster儀器法。包封率和載藥量的測定常采用離心法、葡聚糖凝膠柱法和超濾法等[14]。

溫敏脂質(zhì)體的溫敏性如何評價是研究的關(guān)鍵問題之一，目前常采用差示掃描量熱法（DSC）或熱敏釋放百分率等方法進行評價[15]。DSC法即通過分析各樣品的DSC曲線分析溫敏脂質(zhì)體被加熱時相轉(zhuǎn)變的情況，該結(jié)果還可用于解釋溫敏脂質(zhì)體中藥物的釋放隨溫度升高而增加的現(xiàn)象。而熱敏釋放百分率法則是采用透析法或超濾法等測定37℃和Tm以上如43℃時溫敏脂質(zhì)體中藥物的釋放情況。

4適合制成溫敏脂質(zhì)體的藥物

溫敏脂質(zhì)體主要利用不同溫度下脂質(zhì)體膜結(jié)構(gòu)的變化，控制或調(diào)節(jié)其中藥物的釋放[16]。脂溶性藥物的跨膜擴散受脂質(zhì)體膜結(jié)構(gòu)變化的影響較大，而水溶性藥物和磷脂膜的親和力小，脂質(zhì)體發(fā)生相變時能迅速釋放。因而水溶性或者兩親性的藥物更適合制成溫敏脂質(zhì)體，如水溶性的氨甲喋呤、順鉑，以及兩親性的阿霉素。另外，與熱療有協(xié)同作用的抗腫瘤藥物制成溫敏脂質(zhì)體，可能獲得更加理想的治療效果。

5溫敏脂質(zhì)體在腫瘤治療中的藥物控釋方法

5.1恒溫水浴系統(tǒng)

溫敏脂質(zhì)體的體外藥物釋放度研究中，通常需要考察溫敏脂質(zhì)體在不同溫度，尤其Tm附近的溫度下不同時間的釋放度[17]。釋放介質(zhì)常采用生理鹽水、緩沖液、細胞培養(yǎng)液或血清等。實驗前需要將水浴加熱到指定溫度，為保證測定時間的準確性，取樣后應立即將樣液置于冰浴中冷卻終止藥物的釋放。因而，在測定特定溫度下短時間內(nèi)藥物的釋放情況時，為保證測定的準確性，往往需要采用自帶恒溫與攪拌功能，并能實現(xiàn)在線檢測的裝置。

5.2射頻消融

射頻消融（RFA）利用高頻電流使生物組織中帶電粒子摩擦產(chǎn)熱，進而引起組織細胞發(fā)生凝固性壞死而達到治療目的，是一種治療惡性腫瘤的有效熱消融手段[18]。RFA具有操作簡單、安全性高、療效確切等優(yōu)點，目前已在臨床廣泛應用于肝臟、腎臟、肺臟及骨腫瘤的治療，且取得良好的療效。近幾年，射頻熱療技術(shù)以靶向、微創(chuàng)、效果好、副作用少等特點，在臨床治療，尤其惡性腫瘤的治療方面，取得了巨大的發(fā)展。隨著研究的逐步深入，射頻熱療技術(shù)將會越來越受到人們的重視。

5.3高強度聚焦超聲

高強度聚焦超聲（HIFU）利用超聲傳播的可匯聚性，在組織中形成高強度聲場與生物組織作用產(chǎn)生熱效應和機械效應，進而可能引起細胞壞死、凋亡、溶解等一系列的生物效應[19]。HIFU技術(shù)本身已應用于臨床腫瘤的消融治療，技術(shù)成熟、可靠。如將其用作溫敏脂質(zhì)體的熱源，不僅可以實現(xiàn)對腫瘤的熱療，并且具有組織定位精確和溫度可控性的特點[20]。尤其對于深部腫瘤不用穿刺，是一種真正的無創(chuàng)治療技術(shù)。更重要的是，HIFU作為溫敏脂質(zhì)體的靶向熱源，相比于目前消融治療的溫度≥54℃，其溫度在42℃左右就可以產(chǎn)生治療效果。因此，HIFU聯(lián)合溫敏脂質(zhì)體可提高惡性腫瘤的治療效果，同時大幅減少患者治療過程中的灼熱痛感和并發(fā)癥。

5.4激光器的光熱效應

近年來，一些無機光敏劑的研究取得了很大的進展，比如納米金銀顆粒、短棒或者碳納米管，在穿透能力較強的近紅外區(qū)具有較強的吸收峰，可以轉(zhuǎn)化為熱能，這為光熱療的應用帶來廣闊的前景[21]。如碳納米管，當外界施加波長為808 nm的紅外光且強度達到2 W/cm2時，碳納米管能將光能轉(zhuǎn)化為熱能，使周圍溫度上升[22]。目前近紅外激光器的技術(shù)已相當成熟，內(nèi)窺鏡技術(shù)等醫(yī)療手段也越來越廣泛。激光具有生物穿透性，可為深層次腫瘤組織的熱療提供可能。因此利用無機光敏劑制備溫敏藥物載體在腫瘤熱化療領域中具有相當?shù)臐摿蛢?yōu)勢。

6新型溫敏脂質(zhì)體的開發(fā)

6.1磁性溫敏脂質(zhì)體

磁性溫敏脂質(zhì)體將磁性物質(zhì)Fe3O4、右旋糖苷鐵等包裹于溫敏脂質(zhì)體，給藥后結(jié)合局部外加磁場增加溫敏脂質(zhì)體在局部的滯留時間，同時進行外加熱控制藥物釋放，以進一步增加溫敏脂質(zhì)體的靶向性。Nguyen等[23]制備磁性溫敏脂質(zhì)體，通過在體外外加磁場，定向誘導脂質(zhì)體在靶部位的聚集，另結(jié)合局部升溫促進藥物的定位釋放?？梢?，磁性溫敏脂質(zhì)體可進一步增加脂質(zhì)體的靶向性。

6.2免疫溫敏脂質(zhì)體

免疫溫敏脂質(zhì)體將單克隆抗體連接到溫敏脂質(zhì)體表面，同時結(jié)合體外加熱控釋。免疫溫敏質(zhì)體可因抗原抗體反應的特異性而增加腫瘤細胞對藥物的攝取[24]。Smith等[25]將修飾后的HER2+特異性抗體連接到溫敏脂質(zhì)體的表面，數(shù)據(jù)表明HER2+免疫溫敏脂質(zhì)體具有高度靶向性，具有可作為乳腺癌靶向治療納米遞藥載體的潛力。

6.3共聚物溫敏脂質(zhì)體

當共聚物所處溫度≤其低臨界溶液溫度（LCST）時，能與水分子形成氫鍵，具有親水性；當溫度升高到LCST時，氫鍵遭到破壞，具有疏水性[26]?？赏ㄟ^調(diào)節(jié)溫度高于LCST破壞共聚物溫敏脂質(zhì)體的雙層膜，形成高度疏水區(qū)，致使其中包封的藥物迅速釋放。Kono[27]將共聚物EOEOVE-嵌段-十八烷基乙烯基醚連接到溫敏脂質(zhì)體膜結(jié)構(gòu)上，實驗結(jié)果表明，藥物從40℃時開始釋放明顯增加，當溫度升高至45℃時，藥物在1 min內(nèi)釋放完全。

6.4長循環(huán)溫敏脂質(zhì)體

長循環(huán)溫敏脂質(zhì)體將親水性大分子如PEG2000等包裹于溫敏脂質(zhì)體當中，以增加脂質(zhì)體的親水性和柔韌性[28]，減少單核巨噬細胞系統(tǒng)RES的識別和吞噬，進而提高脂質(zhì)體的靶向性。另外，長循環(huán)溫敏脂質(zhì)體可明顯延長體內(nèi)滯留時間，達到緩釋長效的作用。但同時應注意大分子的加入可能會降低脂質(zhì)體的溫敏性。

7存在問題及展望

溫敏脂質(zhì)體作為一種抗腫瘤藥物載體，已得到廣泛而深入研究，但同時也存在一些局限，如：溫敏脂質(zhì)體的材料目前多為合成磷脂、價格較高；制備工藝、修飾分子可能會影響其溫敏性；熱療過程中溫度難以準確測量，且局部高溫也可能對正常組織造成損傷等。

綜上所述，溫敏脂質(zhì)體下一步研究的重點和難點應是繼續(xù)尋找理想的溫敏材料和熱療手段，尋求和多領域新技術(shù)的聯(lián)合，以進一步提高惡性腫瘤的治療效率和安全性。

[參考文獻]

[1]鄭靜，陳琳，張歡，等.磁性有序介孔納米碳靶向藥物載體的制備與控釋性能[J].中國材料進展，2018，37（1）：43-50.

[2]展佳愔，宋祥福.非病毒靶向納米藥物運載系統(tǒng)的研究進展[J].中國實驗診斷學，2018，22（1）：150-152.

[3]Pradhan P，Giri J，Rieken F，et al.Targeted temperature sensitive magnetic liposomes for thermo-chemotherapy[J].J Control Release，2010，142（1）：108-121.

[4]Li L，ten Hagen TL，Hossann M，et al.Mild hyperthermia triggered doxorubicin release from optimized stealth thermosensitive liposomes improves intratumoral drug delivery and efficacy[J].J Control Release，2013，168（2）：142-150.

[5]Koning G，Eggermont A，Lindner L，et al.Hyperthermia and thermosensitive liposomes for improved delivery of chemotherapeutic drugs to solid tumors [J].Pharm Res，2010，27（8）：1750-1754.

[6]鄭俊民.藥用高分子材料學[M].第3版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2009，181-182.

[7]Djanashvili K，ten Hagen TLM，Blangé R，et al.Development of a liposomal delivery system for temperature-triggered release of a tumor targeting agent，Ln（Ⅲ）-DOTA-phenylboronate[J].Bioorgani Med Chem，2011，19（3）：1123-1130.

[8]Morita K，Zywietz F，Kakinuma K，et al.Efficacy of doxorubicin thermosensitive liposomes and local hyperthermia on rat rhabdomyosarcoma[J].Oncol Rep，2008，20（2）：365-372.

[9]劉文主.藥用高分子材料學[M].第2版.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2017，58-59.

[10]Chelvi TP， Ralhan R.Designing of thermosensitive liposomes from natural lipids for multimodality cancer therapy[J].Int J Hypert，1995，11（5）：685-695.

[11]Hossann M，Wiggenhorn M，Schwerdt A，et al.In vitro stability and content release properties of phosphatidylglyceroglycerol containing thermosensitive liposomes[J].BBA-Biomembranes，2007，1768（10）：2491-2499.

[12]方亮.藥劑學[M].第8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2016， 333-336.

[13]李葉闊，段琬璐，唐家偉，等.載IR-780與多柔比星溫敏脂質(zhì)體的制備與表征[J].第二軍醫(yī)大學學報，2017，38（10）：1336-1339.

[14]Nkanga CI，Krause RW，Noundou XS，et al.Preparation and characterization of isoniazid-loaded crude soybean lecithin liposomes[J].Int J Pharm，2017，526（2）：466-473.

[15]Zhu X，Xie Y，Zhang Y，et al.Thermo-sensitive liposomes loaded with doxorubicin and lysine modified single-walled carbon nanotubes as tumor-targeting drug delivery system[J].J Biomater Appl，2014，29（5）：769.

[16]張越，瞿葉清，陳軍，等.阿魏酸脂質(zhì)體的體外釋放度考察[J].中國實驗方劑學雜志，2016，22（19）：1-5.

[17]陸媛媛，符旭東，鄧艾平，等.K237修飾的紫杉醇熱敏脂質(zhì)體的制備、處方優(yōu)化和體外釋放度研究[J].中國醫(yī)院藥學雜志，2017，37（8）：722-726.

[18]鄒旭公，李曉群.肺惡性腫瘤射頻消融治療現(xiàn)狀[J].介入放射學雜志，2016，25（7）：646-650.

[19]葉欣，費興波，何申戌.高強度聚焦超聲治療腫瘤[J].國際腫瘤學雜志，2010，37（8）：38-40.

[20]Meaney PM，Cahill MD，ter Haar GR.The intensity dependence of lesion position shift during focused ultrasound surgery[J].Ultrasound Med Biol，2000，26（3）：441-450.

[21]Crawford BM，Shammas RL，F(xiàn)ales AM，et al.Photothermal ablation of inflammatory breast cancer tumor emboli using plasmonic gold nanostars[J].Int J Nanomed，2017，12：6259-6272.

[22]Sobhani Z，Behnam MA，Emami F，et al.Photothermal therapy of melanoma tumor using multiwalled carbon nanotubes[J].Int J Nanomed，2017，12：4509-4517.

[23]Nguyen VD，Zheng S，Han J，et al.Nanohybrid magnetic liposome functionalized with hyaluronic acid for enhanced cellular uptake and near-infrared-triggered drug release[J].Colloid Surface B，2017，154：104-114.

[24]Tran TH，Nguyen H T，Le NV，et al.Engineering of multifunctional temperature-sensitive liposomes for synergistic photothermal，photodynamic，and chemotherapeutic effects[J].Int J Pharm，2017，528（1）：692-704.

[25]Smith B，Lyakhov I，Loomis K，et al.Hyperthermia-triggered intracellular delivery of anticancer agent to HER2+，cells by HER2-specific affibody（ZHER2-GS-Cys）-conjugated thermosensitive liposomes（HER2+，affisomes）[J].J Control Release，2011，153（2）：187-194.

[26]邱瑜，雷華，徐濤，等.紫外光引發(fā)低密度聚乙烯接枝聚N-異丙基丙烯酰胺的溫敏改性[J].高分子材料科學與工程，2017，33（2）：22-27.

[27]Kono K.Thermosensitive polymer-modified liposomes[J].Adv Drug Deliv Rev，2001，53（3）：307-319.

[28]Yan F，Duan W，Li Y，et al.NIR-laser-controlled drug release from DOX/IR-780-Loaded temperature-sensitive-liposomes for chemo-photothermal synergistic tumor therapy[J].Theranostics，2016，6（13）：2337-2351.

（收稿日期：2018-05-07 本文編輯：孟慶卿）