熊春賢，姚 毅，姜青龍，嚴(yán)寶華，曾柳根，許亮清，金方喻

（南昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，江西 南昌 330008）

鄱陽(yáng)湖土鯰（Silirus asotus Linnaeus）俗稱(chēng)鯰魚(yú)、鲇魚(yú)和塘角魚(yú)等，分類(lèi)上隸屬于鯰形目，鯰科，鯰屬，肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩，肌間刺少，脂肪多，富含人體所需的多種必需氨基酸和不飽和脂肪酸，營(yíng)養(yǎng)豐富，對(duì)身體虛弱者、術(shù)后病人傷口愈合及恢復(fù)體質(zhì)有較好的滋補(bǔ)作用，產(chǎn)婦食用可起到催乳、增乳的功效，是各大江河水系優(yōu)質(zhì)經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)，也是各地傳統(tǒng)的名優(yōu)水產(chǎn)品種之一。土鯰個(gè)體大小適中，具有生長(zhǎng)速度快，群體產(chǎn)量高，適應(yīng)性廣和抗病力強(qiáng)等優(yōu)良性狀，適宜于池塘主養(yǎng)、大水面混（套）養(yǎng)和集約化養(yǎng)殖。20世紀(jì)90年代末以來(lái)，國(guó)內(nèi)學(xué)者相繼開(kāi)展了土鯰的繁殖生物學(xué)研究，還進(jìn)行了人工繁殖、苗種培育和成魚(yú)養(yǎng)殖試驗(yàn)，但規(guī)?；潭炔桓?。而作為歷史上魚(yú)米之鄉(xiāng)的贛江、鄱陽(yáng)湖流域，基本依靠捕撈野生土鯰供應(yīng)市場(chǎng)，是冬季捕撈的主要漁獲之一。江西省內(nèi)土鯰繁養(yǎng)殖技術(shù)研究還是空白，僅在濱湖地區(qū)有零星網(wǎng)箱養(yǎng)殖或池塘套養(yǎng)少量野生土鯰。為保護(hù)自然水域野生土鯰資源，開(kāi)發(fā)提供高效養(yǎng)殖新品種，作者承擔(dān)了江西省科技支撐計(jì)劃“鄱陽(yáng)湖土鯰繁養(yǎng)殖關(guān)鍵技術(shù)研究”，現(xiàn)將近年來(lái)開(kāi)展的相關(guān)試驗(yàn)研究綜述如下。

1 鄱陽(yáng)湖土鯰人工繁殖試驗(yàn)

1.1 親本采集和培育

課題組分別于2011年11月和2012年12月，在鄱陽(yáng)湖南磯鄉(xiāng)水域采集了1冬齡野生土鯰后備親本156 kg和260 kg，體質(zhì)量150～600 g，在南昌市農(nóng)科院向塘良種基地一口面積2×667 m2的魚(yú)池專(zhuān)塘強(qiáng)化培育，間隔投喂麥穗魚(yú)、土鯽魚(yú)等低值魚(yú)530 kg，催產(chǎn)前15 d補(bǔ)充投喂泥鰍和青蝦80 kg，雌雄比約為3：1。到次年4月中上旬的繁殖季節(jié)，二批野生親本均性腺發(fā)育成熟（表1）。

表1 土鯰性腺成熟情況

1.2 人工催產(chǎn)孵化

2012年4月21日在向塘基地，首次對(duì)49組土鯰親魚(yú)進(jìn)行人工催產(chǎn)。激素配伍：每千克雌魚(yú)用HCG 460IU＋LRH－A26 μg，雄魚(yú)劑量減半。背部肌肉一次性注射，自然產(chǎn)卵，水泥池微流水曝氣孵化。水溫19～21℃，效應(yīng)時(shí)間18 h 20 min；水溫20.0～24.5℃，受精卵經(jīng)53 h孵化脫膜；水溫17.5～26.0℃，初孵苗經(jīng)87 h卵黃囊消失，稚魚(yú)體色變成灰黑色，育苗池輪蟲(chóng)高峰期下塘培育。該試驗(yàn)催產(chǎn)率70.2%，受精率87.4%，孵化率69.5%，平游苗下塘率22.7%，產(chǎn)后親魚(yú)成活率97%。2013年4月24日，進(jìn)行了規(guī)?；斯し敝吃囼?yàn)，一批次催產(chǎn)302組親魚(yú)，采用聚乙烯網(wǎng)片和鮮杉樹(shù)枝混搭作魚(yú)巢，水泥池和產(chǎn)卵池微流水孵化。共產(chǎn)卵200萬(wàn)粒，孵化幼苗130萬(wàn)尾，催產(chǎn)率92%，受精率83.4%，孵化率78.2%。幼苗體色變黑后，采用虹吸法出苗，下塘平游苗115萬(wàn)尾，基本實(shí)現(xiàn)了苗種規(guī)?；庇?。

1.3 胚胎發(fā)育

2013年和2014年的繁殖季節(jié)，課題組連續(xù)開(kāi)展了鄱陽(yáng)湖土鯰胚胎發(fā)育研究。親魚(yú)催產(chǎn)后，在效應(yīng)時(shí)間內(nèi)采用人工授精方式獲取受精卵，確保胚胎發(fā)育同步。在18～26℃的水溫條件下，通過(guò)解剖鏡和顯微攝影，對(duì)胚胎在靜止水體中的發(fā)育過(guò)程進(jìn)行了詳細(xì)的觀察記錄。土鯰胚胎發(fā)育經(jīng)過(guò)7個(gè)時(shí)期，從受精卵到孵化出膜約為47.08 h（表2）。將觀察結(jié)果與南方大口鯰、瓦氏黃顙魚(yú)胚胎發(fā)育時(shí)效進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)相同孵化水溫和靜止水體條件下，南方大口鯰孵化脫膜時(shí)間最短（39 h），其次為鄱陽(yáng)湖土鯰（47 h），用時(shí)最長(zhǎng)的為瓦氏黃顙魚(yú)（62 h）。

表2 鄱陽(yáng)湖土鯰胚胎發(fā)育分期

1.4 微孔增氧技術(shù)對(duì)提高出苗率的研究

鄱陽(yáng)湖土鯰脫膜仔魚(yú)在苗種培育池中具有喜沿池底邊線(xiàn)聚集，逆水游動(dòng)能力差，活動(dòng)范圍小的特性，導(dǎo)致出苗操作困難，出苗率較低。為了滿(mǎn)足鄱陽(yáng)湖土鯰苗種孵化培育階段對(duì)水體溶氧量的需求，課題組設(shè)計(jì)使用底部微孔增氧+微流水增氧方式（B1），調(diào)控苗種孵化培育期內(nèi)水體溶氧量。在孵化培育池底部布設(shè)管線(xiàn)，采用長(zhǎng)鋼筋骨架捆綁微孔增氧管并擺放成回字型，同時(shí)在苗種培育對(duì)照池內(nèi)使用微流水方式增氧（A1）。試驗(yàn)池和對(duì)照池投放相同數(shù)量的受精卵并在144 h孵化和苗種培育過(guò)程中，比較這兩種增氧方式對(duì)水體中pH值、溶氧量變化情況及對(duì)孵化率出苗率的影響（表3），為鄱陽(yáng)湖土鯰規(guī)模化育苗篩選出高效安全的增氧方案。

表3 微流水（A1）和微流水+微孔增氧（B1）溶解氧含量比較

對(duì)采集的數(shù)據(jù)使用Excel 2007進(jìn)行T檢驗(yàn)分析，P＜0.01，表明以上2種方法在鄱陽(yáng)湖土鯰苗種孵化培育階段，對(duì)育苗水體pH值變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義影響，并且對(duì)水體溶解氧變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異影響。將土鯰稚苗移入土池時(shí)，對(duì)4個(gè)池內(nèi)稚苗進(jìn)行抽樣計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)各個(gè)池塘的孵化出苗率為A1池60.3%、A2池60.8%、B1池71.5%，B2池72.5%。數(shù)據(jù)表明，在進(jìn)行鄱陽(yáng)湖土鯰苗種孵化培育期間，采用微流水+底部納米管微孔增氧技術(shù)，能有效提高苗種孵化率和出苗率。

2 鄱陽(yáng)湖土鯰苗種培育試驗(yàn)

2.1 苗種培育和人工馴食情況

土鯰為肉食性?xún)疵汪~(yú)類(lèi)，尤其是食性轉(zhuǎn)換階段大小個(gè)體自相殘殺現(xiàn)象嚴(yán)重，導(dǎo)致苗種培育成活率較低。2012年采取肥水下塘培育輪蟲(chóng)和小型枝角類(lèi)作為開(kāi)口餌料，連續(xù)投喂紅蟲(chóng)和魚(yú)糜，14日齡苗全長(zhǎng)達(dá)3.3～4.0 cm，夏花成活率64.7%。2013年進(jìn)一步改進(jìn)了人工馴食技術(shù)，培育池面積2.5×667 m2，水深1.6 m，用生石灰清塘消毒，施肥培育浮游動(dòng)物，在輪蟲(chóng)和小型枝角類(lèi)繁殖高峰期下塘，此后連續(xù)投喂紅蟲(chóng)，確保7 d左右的充足的天然餌料。第7～10天，魚(yú)苗全長(zhǎng)1.5～2.0 cm時(shí)集群沿著池塘邊巡游攝食，進(jìn)入轉(zhuǎn)食培育階段，開(kāi)始人工馴食。按照肥水下塘（培育天然餌料）→潑喂活體紅蟲(chóng)→冰鮮死紅蟲(chóng)→豬肺粒+鮮魚(yú)糜→高蛋白黃顙魚(yú)0號(hào)膨化料（添加誘食劑）的五步馴食法，成功誘導(dǎo)土鯰苗種集群攝食配合飼料。該試驗(yàn)下塘土鯰稚苗130 000尾，經(jīng)過(guò)14 d的專(zhuān)塘培育，育成夏花93 600尾，鯰苗全長(zhǎng)2.8～4.4 cm，平均全長(zhǎng)3.6 cm，成活率達(dá)72.6%（圖1）。

圖1 鯰苗生長(zhǎng)情況

2.2 大規(guī)格魚(yú)種培育

為適應(yīng)商品魚(yú)養(yǎng)殖需要，近年來(lái)課題組開(kāi)展了大規(guī)格土鯰魚(yú)種標(biāo)粗培育試驗(yàn)。培育池多為土池，面積 2×667m2～5×667m2，平均水深 1.5～2.0 m，每年5月底至6月初用生石灰徹底清塘消毒，毒性消失并培肥水質(zhì)后下塘，夏花放養(yǎng)密度為4萬(wàn)～5萬(wàn)尾/667m2。日常投喂采用粗蛋白42%的黃顙魚(yú)1號(hào)膨化料，投飼率為3%～4%，每天清晨和傍晚各投喂1次。經(jīng)15～20 d標(biāo)粗培育，全長(zhǎng)達(dá)8～12 cm，成活率為80%左右。

3 鄱陽(yáng)湖土鯰池塘主養(yǎng)成魚(yú)試驗(yàn)

2012—2015年在南昌市農(nóng)科院向塘基地進(jìn)行了土鯰池塘主養(yǎng)商品魚(yú)試驗(yàn)。因土鯰雌魚(yú)比雄魚(yú)生長(zhǎng)快、個(gè)體大，所以盡量篩選體格粗壯的雌性魚(yú)種進(jìn)行成魚(yú)養(yǎng)殖。

2012年6月10日，投放全長(zhǎng)7～10 cm的土鯰苗5 000尾，平均2 500尾/667 m2。投喂粗蛋白40%的膨化飼料（青蛙料和鲌魚(yú)專(zhuān)用料），按照2.5%-4%的投飼率安排日餌量，每天早、晚2次投喂，7:00—8:00，17:00—18:00，分別占總投喂量的 30%和70%。經(jīng)過(guò)1周年養(yǎng)殖，到2013年6月，最大個(gè)體達(dá)550 g，最小個(gè)體120 g，尾均重260 g，總產(chǎn)量1 066 kg，每 667 m2產(chǎn)量 533 kg，成活率 82%。

2015年的試驗(yàn)池面積2 700m2，水深1.8 m，6月7日放養(yǎng)當(dāng)年培育的F1代大規(guī)格魚(yú)種（大多為全長(zhǎng)10 cm以上雌性）4 000尾。經(jīng)200 d養(yǎng)殖，收獲均重0.55 kg的成魚(yú)3 750尾，成活率達(dá)94%，每667 m2產(chǎn)土鯰515 kg，產(chǎn)值12 360元，每667 m2效益5 120元。該試驗(yàn)總共用飼料3 000 kg，飼料成本27 000元，苗種2 000元，塘租2 400元，電費(fèi)2 000元，藥品及其他1 800元，生產(chǎn)成本合計(jì)35 200元，總利潤(rùn)20 480元，投入產(chǎn)出比1：1.58（表4）。

表4 放養(yǎng)收獲情況

4 鄱陽(yáng)湖土鯰對(duì)幾種常用藥的敏感性試驗(yàn)

2012—2014年，課題組連續(xù)開(kāi)展了土鯰魚(yú)種對(duì)幾種常用藥物的敏感性試驗(yàn)，試驗(yàn)期間水溫22～26℃，pH 值 6.3～6.8，溶解氧 6.5～8.3 mg/L。試驗(yàn)用魚(yú)為鄱陽(yáng)湖土鯰子一代（F1），選用了氯氰菊酯、鋅硫磷、甲苯咪唑、敵百蟲(chóng)、強(qiáng)氯精、戊二醛、苯扎溴銨、高錳酸鉀、聚維酮碘9種常用藥品。試驗(yàn)結(jié)果表明，鄱陽(yáng)湖土鯰對(duì)氯氰菊酯和敵百蟲(chóng)2種滅蟲(chóng)藥很敏感，對(duì)高錳酸鉀和聚維酮碘2種水體消毒劑不敏感（表5）。

表5 土鯰對(duì)幾種常用藥物半致死和致死濃度

5 鄱陽(yáng)湖土鯰同工酶及RAPD遺傳多樣性分析

2016—2017年，課題組采用同工酶電泳和RAPD引物PCR擴(kuò)增兩種方法，對(duì)鄱陽(yáng)湖土鯰的遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。同工酶電泳顯示：LDH、MDH和EST這3種同工酶在鄱陽(yáng)湖土鯰野生群體中存在組織差異性（圖2、圖3）；RAPD試驗(yàn)結(jié)果顯示：12條RAPD引物在30尾鄱陽(yáng)湖土鯰個(gè)體中共擴(kuò)增出了127條不同分子量的RAPD標(biāo)記，其中多態(tài)性帶72條，多態(tài)性帶的比例為56.56%，平均每個(gè)引物產(chǎn)生8.39條帶和5.61條多態(tài)性帶（圖4），遺傳多樣度顯示鄱陽(yáng)湖土鯰的遺傳水平處于較高水平，可見(jiàn)鄱陽(yáng)湖土鯰在選擇育種和遺傳改良方面具有較大的潛力，所篩選出的RAPD引物可用于分析鄱陽(yáng)湖土鯰野生群體的遺傳多樣性。該研究可為土鯰的種質(zhì)資源保護(hù)及人工選育提供依據(jù)。

圖2 鄱陽(yáng)湖土鯰10種組織MDH同工酶譜模式圖

圖3 鄱陽(yáng)湖土鯰10種組織EST同工酶譜模式圖

圖4 部分PCR擴(kuò)增結(jié)果