(西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,四川 成都 610041)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指人工飼育并對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲實(shí)行控制,遺傳背景明確或來(lái)源清楚,用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、鑒定及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的各類動(dòng)物的總稱。隨著國(guó)家經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需求的品系品種、數(shù)量日益增加和質(zhì)量日益提升。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須符合科學(xué)工作的特定要求,諸如“人工飼育”“對(duì)其攜帶的微生物和寄生蟲實(shí)行控制”“遺傳背景明確或來(lái)源清楚”等話語(yǔ)的表述,是作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物最基本的要求。因此,國(guó)家對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境和使用情況有嚴(yán)格的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量提出要求,并作為執(zhí)法依據(jù)。比如通過(guò)1988年的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》、1997年的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法》、2001年的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法(試行)》等法規(guī)規(guī)章的頒布,將我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理納入法制化的管理軌道。
據(jù)Pubmed網(wǎng)站對(duì)30年科技論文檢索統(tǒng)計(jì),有數(shù)以萬(wàn)計(jì)的單篇SCI論文采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型進(jìn)行研究,涉及生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的大部分領(lǐng)域[1],由此可知,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成為高校教學(xué)與科研中十分基礎(chǔ)和十分重要的實(shí)驗(yàn)對(duì)象和材料。然而,我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)起步晚、發(fā)展慢、規(guī)格低等因素的存在,使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)和管理的水平相對(duì)滯后,這與快速發(fā)展的高校教育實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的需求相矛盾,于是,高校實(shí)驗(yàn)室生物安全問(wèn)題便日益顯現(xiàn)出來(lái)。
生物安全主要指必須實(shí)施避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害所采取的一系列綜合措施,目的是使人們對(duì)由動(dòng)物、植物、微生物等生物體給人類健康和自然環(huán)境可能造成的不安全進(jìn)行防范[2]。在科學(xué)實(shí)驗(yàn)工作中,實(shí)驗(yàn)室管理上的疏忽和意外事故不僅會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的感染,更容易造成實(shí)驗(yàn)室工作人員的感染。高校的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室常常是生物安全的重點(diǎn)防范區(qū)域,一旦其工作出現(xiàn)紕漏就會(huì)導(dǎo)致不良后果:比如2010年?yáng)|北農(nóng)業(yè)大學(xué)28名師生在解剖羊?qū)嶒?yàn)過(guò)程中嚴(yán)重感染了布氏桿菌,中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心曾感染流行性出血熱等[3]。因此,保障實(shí)驗(yàn)室的安全是生物安全的基礎(chǔ)工作,認(rèn)識(shí)并控制實(shí)驗(yàn)室生物安全的危險(xiǎn)與危害,就是獲得了實(shí)驗(yàn)室生物安全的機(jī)會(huì)和利益。換言之,保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全是做好生物安全工作的前提。本文針對(duì)高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和生物安全問(wèn)題進(jìn)行探討,并著重強(qiáng)調(diào)其優(yōu)化措施的落實(shí)情況。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課是以動(dòng)物為研究對(duì)象,在生命科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)研究和相關(guān)領(lǐng)域的教學(xué)研究中常常開設(shè)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)課程。此類課程主要包括動(dòng)物解剖學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)、微生物學(xué)及免疫學(xué)等課程。講授此類課程時(shí),不僅要求實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種多、數(shù)量大、質(zhì)量好,而且符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物最基本的要求,以滿足高校教育教學(xué)和科研工作的需求。進(jìn)一步加強(qiáng)和規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和質(zhì)量控制是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)科學(xué)發(fā)展的關(guān)鍵,也是生物安全的重要一環(huán)[4]??墒牵簧俚貐^(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生產(chǎn)企業(yè)尚未產(chǎn)業(yè)化,規(guī)模小且結(jié)構(gòu)不合理,以致常規(guī)動(dòng)物的供應(yīng)質(zhì)量難以保證。相關(guān)法律法規(guī)明確規(guī)定:從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)或使用的單位和個(gè)人,必須取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證等條件,方可進(jìn)入科學(xué)實(shí)驗(yàn)的環(huán)節(jié)之中??梢?,許可證管理是保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的重要措施,是單位和個(gè)人從事動(dòng)物實(shí)驗(yàn)工作的行業(yè)準(zhǔn)入門檻,是開展實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作管理的重要依據(jù)。重視許可證的審批和管理工作,可從源頭上堵住不合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,提高風(fēng)險(xiǎn)防疫指數(shù)。高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心如果能夠按照許可證的條目要求和科學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量的管理把握到位,全面開展防疫工作,就能降低生物安全風(fēng)險(xiǎn)。下文介紹其具體做法。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由外部環(huán)境進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前,應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的來(lái)源、數(shù)量、性別、規(guī)格、包裝、質(zhì)量合格證明或檢疫檢驗(yàn)報(bào)告等基本情況做好核查,并根據(jù)動(dòng)物等級(jí)分別實(shí)施相應(yīng)的檢疫程序。①普通級(jí)動(dòng)物:從運(yùn)輸容器中取出后通過(guò)肉眼觀察評(píng)判動(dòng)物質(zhì)量。一般要求精神狀態(tài)好,運(yùn)動(dòng)活潑,四肢無(wú)缺損、畸形和外傷;皮毛光亮,皮膚彈性好,無(wú)創(chuàng)傷和異常;天然孔無(wú)異常分泌物;發(fā)育良好,體質(zhì)健壯等。如果未見異常就將動(dòng)物轉(zhuǎn)入檢疫間進(jìn)行檢疫。②清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和SPF動(dòng)物:應(yīng)通過(guò)傳達(dá)間傳入運(yùn)輸容器。清潔區(qū)的飼養(yǎng)人員打開運(yùn)輸容器,對(duì)動(dòng)物進(jìn)行一般觀察,如果未見異常則將動(dòng)物轉(zhuǎn)入觀察間進(jìn)行2-3天的臨床觀察。觀察后未見異常者,才可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和飼養(yǎng)。③無(wú)菌級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:將動(dòng)物引入隔離器進(jìn)行2-3天的臨床觀察。未見異常情況者,可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和飼養(yǎng)。
以上做法有的高校實(shí)施起來(lái)比較順利,但有的高校由于沒有規(guī)范建立動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常常來(lái)自生產(chǎn)企業(yè)或散養(yǎng)農(nóng)戶,故而某些實(shí)施環(huán)節(jié)還存在缺失的情況。因此,必須加強(qiáng)高校對(duì)生產(chǎn)企業(yè)的資格審查,選擇符合國(guó)家法律法規(guī)要求的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)企業(yè)來(lái)提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,限制或杜絕使用散養(yǎng)農(nóng)戶提供的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,不容許帶有人畜共患疾病的病原體及寄生蟲進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。如此才能保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量的全程控制,降低生物安全的危險(xiǎn)系數(shù)。
高校開展教學(xué)和科研實(shí)驗(yàn)所使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要有兩種:一是小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、雞、鴿子等;二是大型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,如羊、牛、犬等。因此,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在一定的生物安全隱患,必須加強(qiáng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)環(huán)境的防疫,確保實(shí)驗(yàn)室生物安全。
1.加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)環(huán)境的防護(hù)
在高校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,學(xué)生是實(shí)驗(yàn)的主體,加強(qiáng)對(duì)大學(xué)生的安全保護(hù),防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有害生物因子、氣溶膠、危險(xiǎn)廢棄物等危害因素對(duì)環(huán)境造成污染和對(duì)實(shí)驗(yàn)者造成傷害。特別要提醒實(shí)驗(yàn)者加強(qiáng)個(gè)人防護(hù),在接觸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)需有防護(hù)裝備如手套、口罩、鞋套、防護(hù)服、防護(hù)面罩、防護(hù)靴和安全眼鏡等設(shè)備。高校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)最常見的安全事件是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物咬傷或抓傷,手術(shù)器械如手術(shù)針、手術(shù)刀、手術(shù)剪、注射器等銳器刺傷,或者動(dòng)物分泌排泄的各種體液污染暴露的皮膚等傷害事件,必須制定緊急應(yīng)對(duì)措施,如配置個(gè)人防護(hù)用品,設(shè)立醫(yī)療急救箱等,確保實(shí)驗(yàn)教師與學(xué)生的安全。
實(shí)驗(yàn)室是實(shí)驗(yàn)的場(chǎng)所,也是相對(duì)獨(dú)立的環(huán)境。實(shí)驗(yàn)中保護(hù)好實(shí)驗(yàn)人員非常重要,而防止傳染因子擴(kuò)散到實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外造成環(huán)境和社會(huì)危害更為重要。實(shí)驗(yàn)室的物理防護(hù)是通過(guò)安全設(shè)備實(shí)現(xiàn)的,安全設(shè)備主要包括為了減少直接接觸有害生物因子而制作的各種生物安全柜、離心機(jī)罩、負(fù)壓隔離器、密閉容器等設(shè)備[5]。開展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)一定要根據(jù)實(shí)驗(yàn)性質(zhì)選擇實(shí)驗(yàn)設(shè)備,在使用這些安全設(shè)備時(shí)必須與個(gè)人防護(hù)裝備聯(lián)合使用。
2.規(guī)范動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的安全技術(shù)操作
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,為了保證師生的生物安全,必須確保規(guī)范操作規(guī)程得到嚴(yán)格實(shí)施,學(xué)生必須熟練掌握各種操作技能。首先,熟悉各種實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備的操作規(guī)程。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要各種不同類型、數(shù)量的儀器,學(xué)生開展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前,必須熟練掌握實(shí)驗(yàn)儀器的安全使用方法并進(jìn)行規(guī)范操作,避免因操作失誤而造成安全事故。其次,熟悉動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施步驟,規(guī)范動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的手術(shù)操作。教師必須詳細(xì)講解實(shí)驗(yàn)步驟,示范實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的手術(shù)操作,如動(dòng)物的抓取、保定、麻醉、剪毛消毒,以及手術(shù)器械的擺放與傳遞、手術(shù)刀的持刀方式、止血鉗的持握法、手術(shù)結(jié)的打結(jié)方式、手術(shù)過(guò)程止血的方法等手術(shù)基本操作技術(shù)。研究發(fā)現(xiàn),在測(cè)試的276種實(shí)驗(yàn)操作中,有239種操作可以產(chǎn)生微生物氣溶膠。這些操作即使一次產(chǎn)生較少氣溶膠卻因需要多次重復(fù)的實(shí)驗(yàn)操作而可在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的微生物氣溶膠,對(duì)工作人員造成危害[6]。教師應(yīng)監(jiān)督學(xué)生規(guī)范手術(shù)操作,避免因操作方法不當(dāng)或使用不當(dāng)而引起生物安全事故的發(fā)生。因此,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,必須嚴(yán)格執(zhí)行微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程以及實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。
3.落實(shí)高校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廢棄物的防疫
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程會(huì)產(chǎn)生大量的生物危害性極大的實(shí)驗(yàn)廢棄物,如動(dòng)物的排泄物、更換的墊料、飼料、血液、組織樣品、動(dòng)物尸體等,為避免這些感染因子向外擴(kuò)散,必須采取物理方法和化學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行科學(xué)的處理。一般性無(wú)害的廢棄物如墊料、動(dòng)物的排泄物、紙張及其他物品,其常用的處理方法包括焚燒、過(guò)濾、高溫滅菌物理方法以及用化學(xué)制劑消毒處理等。具有毒性、傳染性的廢棄物,需按照國(guó)家相關(guān)規(guī)定,到具備相應(yīng)資質(zhì)的企業(yè)進(jìn)行無(wú)害化處理。動(dòng)物尸體的處理是其關(guān)鍵,也是高校廢棄物處理的難點(diǎn)。由于所使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物類型多、數(shù)量大、冷藏設(shè)備不達(dá)標(biāo)、生物安全教育缺乏等原因,常發(fā)生隨意丟棄、掩埋動(dòng)物尸體的情況。國(guó)家相關(guān)法律法規(guī)規(guī)定,必須配備冷藏設(shè)備以暫時(shí)儲(chǔ)存動(dòng)物尸體,無(wú)害性動(dòng)物尸體的處理需由專業(yè)的醫(yī)療處理公司進(jìn)行統(tǒng)一集中處理。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是推動(dòng)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)發(fā)展的重要力量,是生命科學(xué)研究的基礎(chǔ)和條件,其水平是衡量一個(gè)國(guó)家、一個(gè)地區(qū)、一個(gè)大學(xué)生命科學(xué)研究水平高低的標(biāo)志之一[7]。因此,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心的建設(shè)是高校教學(xué)科研的重要基礎(chǔ)建設(shè)。由于高校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心建設(shè)具有標(biāo)準(zhǔn)高、投入大、風(fēng)險(xiǎn)高、效益差等特點(diǎn),又具有公共屬性,因此,某些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心的基礎(chǔ)設(shè)施和安全設(shè)備建設(shè)的水平嚴(yán)重滯后。近些年來(lái),隨著SARS、甲流、H7N9等疫情的暴發(fā),國(guó)家急需建設(shè)BSL-3、BSL-4(3、4級(jí)安全實(shí)驗(yàn)室),開展對(duì)病原體及生物安全防范的研究,故而非常重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施建設(shè),逐年加大實(shí)驗(yàn)設(shè)備的投入力度。在這樣的形勢(shì)下,合理配置高校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的安全設(shè)備便成為重要的舉措之一,必須對(duì)照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》的目標(biāo)要求,對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的設(shè)施選址、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)間的環(huán)境技術(shù)指標(biāo)、屏障環(huán)境設(shè)施等進(jìn)行規(guī)范化;必須按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》中的條款,做好實(shí)驗(yàn)室生物安全分級(jí),實(shí)驗(yàn)室布局以及實(shí)驗(yàn)設(shè)施和設(shè)備,個(gè)人防護(hù)等基礎(chǔ)建設(shè)工作,并對(duì)給排水、氣體、配電、消防等做出詳細(xì)的安全規(guī)定。同時(shí),高校必須加大對(duì)安全設(shè)備的購(gòu)置力度,配置諸如層流柜、獨(dú)立通風(fēng)籠具、脈動(dòng)真空高壓滅菌器等防疫設(shè)備。對(duì)于大型動(dòng)物的教學(xué)實(shí)驗(yàn)更要具備滿足實(shí)驗(yàn)的硬性條件。相關(guān)日常工作必須嚴(yán)格按照國(guó)家法律法規(guī)建設(shè)維護(hù)高校動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,明確實(shí)驗(yàn)中心的職責(zé)定位,使之成為具有集中化、規(guī)?;?、現(xiàn)代化特點(diǎn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,從而減少生物安全事故的發(fā)生,充分發(fā)揮動(dòng)物實(shí)驗(yàn)安全設(shè)備的防護(hù)作用。
加強(qiáng)生物安全相關(guān)法律法規(guī)的宣傳,是實(shí)驗(yàn)室安全的重點(diǎn)工作之一,學(xué)習(xí)生物安全法律法規(guī)應(yīng)被列入實(shí)驗(yàn)師生的培訓(xùn)內(nèi)容之中。實(shí)驗(yàn)前必須對(duì)進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的教師和學(xué)生加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全知識(shí)的考核,其具體要求如下:必須掌握實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)知識(shí)、生物安全操作規(guī)程、個(gè)人防護(hù)措施以及實(shí)驗(yàn)設(shè)備的使用維護(hù)辦法等;必須掌握影響生物安全的因素及其應(yīng)對(duì)措施等,如提高識(shí)別和控制微生物因子的能力;必須了解實(shí)驗(yàn)室會(huì)因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物不同而產(chǎn)生不同的危害,如感染性危害有細(xì)菌性感染、病毒性感染、寄生蟲感染,非感染性危害有過(guò)敏、外傷、疫苗等[8]。通過(guò)這些考核手段,將生物安全的防護(hù)教育培訓(xùn)貫穿于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的始終,使之制度化、常態(tài)化。
立足于我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展以及高校教育的發(fā)展需要,國(guó)家已出臺(tái)多部有關(guān)生物安全的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)如GB17981-2005《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全要求》、GB19489-2008《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》,以及法規(guī)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》等[9],這些國(guó)標(biāo)、法規(guī)的出臺(tái)有利于促進(jìn)高校實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物生物管理工作的開展。經(jīng)過(guò)多年來(lái)實(shí)驗(yàn)室生物安全系統(tǒng)的建設(shè),許多高校已建立了相對(duì)完善的實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物安全管理體系,形成了管理、檢查、監(jiān)督等機(jī)制。比如我校建立了實(shí)驗(yàn)室與設(shè)備管理處,引入了信息化的管理模式,對(duì)實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)儀器、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行監(jiān)督管理,特別是注重對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、試劑和設(shè)備的安全管理,建立完善的生物安全管理制度、人員培訓(xùn)制度、動(dòng)物尸體及實(shí)驗(yàn)廢棄物的回收處理制度。這些舉措的推行,無(wú)疑使實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物和生物安全管理日趨科學(xué)化、系統(tǒng)化,也為相關(guān)高校強(qiáng)化這項(xiàng)工作明確了方向。
總之,隨著高校醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域科技水平的提高,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用率已經(jīng)大幅度提升。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)給人類醫(yī)學(xué)發(fā)展帶來(lái)了進(jìn)步,也帶來(lái)了風(fēng)險(xiǎn)。“安全第一、預(yù)防為主”是我國(guó)安全工作的長(zhǎng)期基本方針,也是高校生物安全工作的核心重點(diǎn),我們要抓住實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理工作的要點(diǎn),優(yōu)化相應(yīng)的措施手段,將實(shí)驗(yàn)室建設(shè)水平推向一個(gè)新的高度。