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(1.山東省青島市西海岸新區(qū)靈珠山社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，山東 青島 266500； 2. 內(nèi)蒙古國際蒙醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010065)

協(xié)日嘎-4顆粒劑由姜黃、梔子、黃柏和蒺藜組成，具有解熱、消淋、利尿的作用，臨床常用于尿道炎，尿頻尿急。本實驗觀察其鎮(zhèn)痛、抗炎、利尿及抑菌作用。

1 實驗材料

1.1 藥品與試劑 協(xié)日嘎-4顆粒劑，批號15101501，由內(nèi)蒙古國際蒙醫(yī)醫(yī)院提供，顆粒劑對藥材1g：1.7g。氫氯噻嗪片山西利豐華瑞制藥公司，批號150103，以蒸餾水配制成0.5g/kg的混懸液。阿司匹林沈陽奧吉娜有有限公司，批號150106，以蒸餾水配制成0.2g/kg的混懸液。

1.2 儀器 電子天平賽多利斯科學(xué)儀器有限公司，智能熱板儀成都泰盟軟件公司、型號RB-200T。

1.3 動物 小鼠昆明種，雄雌各半，體重20g，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供。

1.4 菌株 金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC25923和大腸埃希菌25922由中國藥品生物制品鑒定所提供。

2 方法

2.1 對小鼠扭體鎮(zhèn)痛[1]小鼠60只，雄雌各半，體重30～40g，按體重、性別均衡隨機分為5組，對照組以蒸餾水、阿司匹林組0.2g/kg、協(xié)日嘎-4顆粒劑組低、中、高劑量(1.5、3.0、6.0g/kg)，每天灌胃給藥1次，給藥體積20mL/kg，連續(xù)7次，末次給藥30min，腹腔注射0.7%乙酸溶液， 0.1mL/10g，記錄注射致痛劑后15min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，見表1。

2. 2 對熱板刺激鎮(zhèn)痛[2]用熱板致痛儀(溫度55±0.5℃)篩選兩次痛閥平均值低于30s并大于5s的雌性小鼠50只，隨機分為5組，對照組以蒸餾水， 阿司匹林組(0.2g/kg)，協(xié)日嘎-4顆粒劑劑高、中、低濃度(6.0、3.0、1.5/kg)，給藥體積為(20mL/kg)，每天灌胃給藥1次，連續(xù)7次。測定給藥后15、30、60、90min痛閥值，見表2。

鎮(zhèn)痛百分率=(給藥后痛閥值-給藥前痛閥值)/給藥前痛閥值%。

2.3 利尿作用[2]小鼠濾紙稱重法：取小鼠50只，按體重隨機分為5組，對照組蒸餾水， 氫氯噻嗪0.5g/kg(0.2mL/10g)，協(xié)日嘎-4顆粒劑劑高、中、低濃度(6.0、3.0、1.5/kg)，給藥體積為(20mL/kg)，每天灌胃給藥1次，連續(xù)7次，給藥6次后禁食不禁水。第7次給藥后 ，隨即將小鼠放入墊有濾紙的燒杯中，每h換紙1次，稱量濾紙，觀察3h，以濾紙增重作為排尿量，見表3。

2.4 抗炎作用[1]小鼠50只，體重26～30g，隨機分為5組：對照組以蒸餾水，阿司匹林組0.2g/kg，協(xié)日嘎-4顆粒劑劑低、中、高劑量組(1.5、3.0、6.0/kg)，各組均采用灌胃給藥，連續(xù)給藥7次，給藥體積為20mL/kg，末次給藥1h，每鼠右耳涂二甲苯0.1mL，15min后，頸椎脫臼處死，剪下雙耳，用直徑9mm打孔器在左右耳廓相同部位打孔取材，分別稱重，以左右兩耳重量之差為腫脹度，并計算抑制率，見表4。腫脹抑制率=(對照組—給藥組/對照組)，結(jié)果見表4。

2.5 體外抑菌作用[3]協(xié)日嘎-4顆粒劑加生理鹽水溶解，濃度36%，離心取上清液，以二倍稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC)。以金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌為試驗菌株，見表5。

2.6 體內(nèi)抑菌作用[3]小鼠60只， 隨機分為6組，每組10只，對照組以蒸餾水，模型組以蒸餾水，陽性藥組(慶大霉素2000u/20g)，協(xié)日嘎-4顆粒劑劑低、中、高劑量組(1.5、3.0、6.0/kg)，各組均采用灌胃給藥，2次/d，連續(xù)給藥3d后，腹腔接種大腸桿菌肉湯增菌液 0.4 mL / 只， 接種后繼續(xù)給藥4d，觀察記錄各組小鼠死亡情況，見表6。

3 實驗結(jié)果

3.1 對扭體作用 協(xié)日嘎顆粒劑對乙酸溶液的腹腔刺激疼痛反應(yīng)有顯著抑制作用，與對照組比較均有顯著性差異(P<0.05)，見表1。

表1 協(xié)日嘎-4顆粒劑對乙酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響

注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01

3. 2 對熱板作用 協(xié)日嘎顆粒劑對熱板刺激疼痛反應(yīng)有顯著抑制作用，與對照組比較均有顯著性差異(P<0.05)，見表2。

表2 協(xié)日嘎-4顆粒劑顆粒劑劑熱板刺激小鼠疼痛反映的影響

注：與對照組比較， *P<0.05，**P<0.01

3.3 對利尿作用 協(xié)日嘎散劑具有顯著利尿作用，與對照組比較差異顯著(P<0.01)；協(xié)日嘎-4顆粒劑劑低中高濃度對不同時間點具有不同程度的利尿作用，與對照組比較差異顯著(P<0.05)，結(jié)果見表3。

表3 協(xié)日嘎-4顆粒劑對小鼠排尿量的影響

注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01

3.4 對二甲苯炎癥 協(xié)日嘎四味顆粒劑對二甲苯小鼠耳廓腫脹程度有顯著抑制作用，與對照組比較差異顯著(P<0.05)，見表4。

表4 協(xié)日嘎-4顆粒劑對二甲苯小鼠耳廓腫脹的影響

注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01

3.5 對體外抑菌作用 協(xié)日嘎-4顆粒劑98.1μg/mL對金葡菌生長抑制MIC90為126.2μg /mL，78.8μg/mL對大腸埃希菌生長抑制MIC90為 112.6μg/mL，見表5。

表5 協(xié)日嘎-4顆粒劑對金黃色葡萄球菌的體外抗菌活性

3.6 體內(nèi)抑菌作用：協(xié)日嘎-4顆粒劑對腹腔接種大腸桿菌肉湯增菌液 致死作用無明顯作用，與模型組比較無顯著差異(P>0.05)，見表6。

4 討論

尿路感染(尿感)屬于蒙醫(yī)學(xué)中尿閉癥的赤巴淋癥范疇。蒙醫(yī)認(rèn)為，赤巴淋癥治宜清熱利尿，通淋止痛?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，尿路感染主要由細(xì)菌引起，其中以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌最為常見。協(xié)日嘎-4顆粒劑由姜黃、梔子、黃柏和蒺藜組成，具有清熱，利尿的作用[4]，用于尿道炎，尿頻，尿急。 本實驗結(jié)果顯示， 協(xié)日嘎-4顆粒劑具有顯著鎮(zhèn)痛、抗炎及利尿作用，體外抑菌作用明顯，對體內(nèi)無明顯抑菌作用。

表6 協(xié)日嘎-4顆粒劑對小鼠感染大腸桿菌的抑制作用

注：與模型組比較 *P<0.05 **P<0.01