王翔鵬 張全書 李麗麗 武璐璐 向陽

【摘 要】 狼瘡性腎炎是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的一種并發(fā)癥，以自身抗體及其免疫復合物在腎臟沉積引發(fā)的腎臟炎癥浸潤為基礎，腎實質破壞與間質增生并存，造成腎臟結構紊亂、腎功能障礙，最終可能發(fā)展為腎功能衰竭，是系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者預后是否良好的關鍵因素。核轉錄因子-κB（NF-κB）能調節(jié)免疫細胞分化、激活炎癥因子轉錄等，在狼瘡性腎炎腎臟損傷過程中有著重要的調控作用。探究NF-κB對狼瘡性腎炎病程的調控，能夠更好地為基礎研究與臨床診治提供理論基礎。

【關鍵詞】 狼瘡性腎炎；系統(tǒng)性紅斑狼瘡；核轉錄因子-κB；自身免疫性疾病

狼瘡性腎炎（lupus nephritis，LN）是一種在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）狀態(tài)下，自身免疫系統(tǒng)功能紊亂而引發(fā)腎臟慢性炎性損傷的自身免疫性疾病。約60%的SLE患者伴有LN的發(fā)生，10%～30%的患者最終發(fā)展為腎功能衰竭[1]。LN的核心致病過程為自身抗體及其免疫復合物沉積在腎臟，引發(fā)慢性炎癥浸潤，逐步破壞腎臟的結構與功能。核轉錄因子-κB（NF-κB）作為重要的免疫與炎癥相關信號分子，2008年

ZHENG等[2]就發(fā)現了LN患者腎臟中NF-κB的顯著活化，提示LN與NF-κB存在一定關聯。NF-κB作用廣泛，參與LN自身抗體產生過程中自身反應性B細胞活化與增殖，及腎臟炎性損傷，在LN發(fā)病及病情進展過程中發(fā)揮著重要作用；但NF-κB在LN中的作用還未被系統(tǒng)闡述。為進一步了解兩者之間的關系，并為進一步探索LN防治打下基礎，本文就LN的發(fā)病機制與NF-κB在LN病程進展中的作用進行相關闡述。

1 LN的發(fā)病機制

1.1 自身抗體的產生 目前，LN被界定為一種病程復雜的自身免疫性疾病，表現為B細胞自我耐受性喪失、自身抗體的分泌與腎臟的慢性炎癥，其中，自身抗體的分泌是LN發(fā)病的基礎?？闺p鏈DNA（ds-DNA）抗體是最為常見的自身抗體[3]。ds-DNA的主要來源是細胞死亡。細胞死亡釋放的ds-DNA一般不具有免疫原性，只擁有免疫反應性。若與適當的刺激物聯合作為T輔助細胞或B細胞的共刺激因子時，則產生針對自身ds-DNA的免疫應答，如來自病原體的DNA結合蛋白、多瘤病毒的T抗原、抗微生物肽LL37等。在特殊情況下，DNA自身也可具有強免疫原性，比如紫外線直接損傷皮膚而導致細胞死亡產生的DNA具有很強的免疫原性，可直接被髓樣樹突狀細胞識別，并誘導免疫反應[4]。正常人體中B細胞發(fā)育和分化的任意階段都存在著防止自身反應性B細胞活化的機制，包括bim、Fas對自身反應性B細胞的清除和SHIP-1、SHP-1誘導B細胞產生自身DNA耐受

等[5]。若上述基因功能缺失，則可形成自身反應性B細胞并分泌自身抗體。除此之外，其他基因的突變或缺失也可促使機體形成自身反應性B細胞，如DNASE1與DNASE1L3的突變導致DNA降解障礙[6]、IFIH1與ACP5的異常表達啟動

I型IFN過表達[7-8]及補體系統(tǒng)C1、C3與C4功能缺失導致的凋亡細胞清除受阻等途徑提高免疫細胞自身反應性[9]，從而導致自身反應性B細胞的

生成。

1.2 自身抗體及其免疫復合物在腎臟沉積 自身抗體及其免疫復合物的腎臟沉積是LN患者腎臟損傷的基礎。STAMATIADES等[10]證實，腎巨噬細胞通過表面FcγR與免疫復合物的識別并結合，攝取免疫復合物，完成免疫復合物的內皮運輸，致使免疫復合物沉積于腎臟。繼而激活補體系統(tǒng)、招募炎細胞聚集、釋放細胞因子及蛋白水解酶，造成系膜細胞增生、血管球上皮受損和腎間質纖維化等一系列病理改變，最終導致腎功能喪失。

除免疫復合物的直接沉積外，KRISHNAN等[11]

研究發(fā)現，抗ds-DNA抗體可直接與腎小球基底膜結合，進一步與血液中相應自身抗原結合形成免疫復合物。此外，單純抗體的直接作用也可產生類似免疫復合物帶來的炎癥反應。YUNG等[12]將LN患者血清中分離出的抗ds-DNA抗體直接作用于體外腎小管上皮細胞，誘導了轉化生長因子-β（TGF-β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）等細胞因子的分泌并激活NF-κB等炎癥相關信號通路，加劇炎癥環(huán)境，加速纖維化的進展。因此，單純抗ds-DNA抗體無需依賴與血液中的ds-DNA結合就可沉積于腎臟，并擁有與免疫復合物相似的致病性，也可進一步形成免疫復

合物。

在自身抗體及其免疫復合物沉積腎臟之后，腎臟炎性損傷隨之而來，造成腎臟功能下降[13]。炎癥介質、自身抗體及其免疫復合物是誘導炎性損傷的主要分子。LN早期，自身抗體及其免疫復合物沉積于腎臟，腎小球產生大量趨化因子，巨噬細胞趨化，釋放IL-1β、IL-6及TNF-α等促炎細胞因子，分泌基質金屬蛋白酶及組織蛋白酶，引發(fā)腎實質細胞死亡及腎臟組織結構改變[14]。此外，促炎細胞因子可繼續(xù)激活腎間質細胞中炎癥相關信號通路，分泌更多的細胞因子，增強細胞凋亡和細胞焦亡的進展，進而加劇腎臟的損傷。

2 LN與NF-κB的關系

2.1 NF-κB概述 NF-κB蛋白包括5種亞單位，分為NF-κB蛋白與C-末端具有反式激活結構域的Rel蛋白，NF-κB蛋白包括NF-κB1（p105/p50）、NF-κB2（p100/p52），Rel蛋白包括RelA（p65）、RelB和cRel。這些亞單位通過經典和非經典兩種途徑被二聚體化激活，進而入核，起到轉錄因子的作用，但p50與p52形成的二聚體或自身的同二聚體不具有激活基因轉錄的功能。

2.2 NF-κB調節(jié)淋巴細胞功能 漿細胞是自身抗體的主要來源，自身反應性B細胞發(fā)育至漿細胞的過程是LN發(fā)病的基礎環(huán)節(jié)，NF-κB的非經典激活途徑對于其發(fā)育分化更是有著關鍵作用。RelB與NF-κB2的缺失都可導致B細胞成熟障礙，后者尤甚[15]。在經典激活途徑中，NF-κB必需調節(jié)劑（NEMO）與激活IκB激酶（IKK）復合物的缺陷會阻滯B細胞的成熟，降低未成熟B細胞的生命活力，但這種抑制作用對于成熟B細胞并不明顯[16]。

患者過度表達的B細胞激活因子（BBAF）與BBAF-R結合，激活NF-κB，加速B細胞的成熟，并使其具有更強的分泌抗體的能力[17]。

此外，Th17、Treg等T細胞亞群比例失衡與LN的發(fā)病也關系密切。Treg功能障礙會引發(fā)B細胞活動異常及自身抗體的生成，造成致死性多器官自身免疫反應[18]。若在炎癥環(huán)境中，NF-κB誘導激酶（NIK）的激活會解除Treg細胞對免疫系統(tǒng)的抑制，促使其分泌IFN-γ與IL-2，增強B細胞的反應性[19]。

2.3 NF-κB誘導炎性損傷 自身抗體在LN患者的腎臟炎癥過程中發(fā)揮著重要的引導作用。當抗ds-DNA抗體與巨噬細胞結合，可激活TLR4-NF-κB和NLRP3炎性小體信號通路，造成巨噬細胞發(fā)生焦亡，加強細胞因子的分泌并釋放活性氧，損傷腎組織[20]。此外，將患者血清中分離的抗ds-DNA抗體加入至腎系膜細胞的培養(yǎng)基當中，引發(fā)內質網應激，激活NF-κB信號通路，并促進

IL-1β、TNF-α及MCP-1的釋放[21]。MCP-1可通過趨化作用進一步招募巨噬細胞在腎臟集聚，加劇炎癥反應。

諸多細胞因子作為NF-κB的下游分子，對LN患者的腎臟損傷都具有重要作用。其中TNF-α誘導的細胞凋亡和炎癥小體引發(fā)的細胞焦亡在腎損傷的過程中有著重要作用，包括免疫細胞、腎系膜細胞、腎小管上皮細胞等細胞中NF-κB的激活上調TNF-α及IL-1β的生成與釋放，及NF-κB激活的下游炎癥小體，引發(fā)腎小管上皮細胞及足細胞程序性死亡，導致腎臟發(fā)生炎性損傷，腎功能受到影響，出現蛋白尿等臨床癥狀[22-23]。

然而，腫瘤壞死因子α誘導蛋白3（TNFAIP3）同樣作為被NF-κB調控的蛋白，卻具有與TNF-α等炎癥因子截然相反的作用。TNFAIP3過表達可通過抑制小鼠巨噬細胞中的NF-κB和NLRP3炎癥小體活化來減輕LN的癥狀[24]。但在LN中NF-κB的激活導致的主要趨勢仍是炎性損傷，因而TNFAIP3的激活作為一種機體自身的防御措施可能能夠成為臨床治療LN的一種手段。

2.4 NF-κB參與腎臟纖維化 腎纖維化是LN病程中腎臟發(fā)生的主要病理改變之一。主要過程包括巨噬細胞的浸潤，造成腎結構消融，自身抗體的沉積誘導炎癥、腎小管上皮細胞與腎間質細胞分泌細胞外基質所致。

巨噬細胞在腎臟中的浸潤是LN患者和動物模型的顯著特征，被認為是LN病程中最重要的標志之一。在腎臟聚集的巨噬細胞主要來源于血液中的單核細胞，可能是由于自身抗體的腎臟沉積及其誘導的炎性環(huán)境促使腎小管上皮細胞激活TLR4/

NF-κB，進而分泌MCP-1，導致單核細胞在腎臟炎性環(huán)境中轉化為活化的巨噬細胞，上調組織蛋白酶與基質金屬蛋白酶的表達，進而浸潤腎間質，改變腎實質結構[13，20，25-26]。沉積的自身抗體及其免疫復合物與炎癥環(huán)境共同刺激腎小管上皮細胞分泌TGF-β1[12]。TGF-β1可激活腎成纖維細胞Samd通路，上調I型膠原的分泌，從而參與到腎纖維化進程[27]。除此之外，LI等[28]在進行乙肝病毒X蛋白誘導腎臟纖維化的實驗當中發(fā)現，NF-κB的磷酸化與腎小管上皮細胞的上皮-間質轉化呈正相關，而與MAPK等炎癥通路無明顯相關，這提示NF-κB可能是LN病程中腎纖維化的重要分子之一。

2.5 LN治療與NF-κB的關系 NF-κB在LN病程中作用廣泛，涉及前期自身抗體的產生及后期腎臟的炎性損傷，通過調節(jié)NF-κB的活化狀態(tài)可達到一定的治療目的。JHOU等[29]發(fā)現，白藜蘆醇依賴激活NF-κB上調FcγRIIB，減少雌性MRL/lpr小鼠脾臟生發(fā)中心B細胞和骨髓B細胞的數量并改善脾腫大。同時，血清自身抗體含量隨著B細胞數量的減少也明顯降低，LN癥狀也得以改善。這提示B細胞中的NF-κB是LN的一種潛在治療靶點。除調節(jié)B細胞活性外，ZHAO等[30]使用特異性NF-κB抑制劑Bay11-7082作用于雌性MRL/lpr小鼠，發(fā)現其能夠阻滯NF-κB的激活，明顯改善腎臟炎癥浸潤及抑制炎性小體活化，顯著減少腎臟損傷程度。WU等[31]研究表明青蒿素可通過抑制NF-κB的磷酸化，減少IL-6、TNF-α等細胞因子的釋放，達到緩解狼瘡小鼠腎臟損傷的效果。雖然干預NF-κB的活化在動物實驗中治療LN有著良好的療效，但還未有臨床研究報道。

3 小 結

LN作為SLE重要的并發(fā)癥之一，其病程的進展關系著患者生存年限與生活質量。對于其發(fā)病機制的認識與治療手段的探索，還有很多的不足?，F有研究水平雖不能夠對LN的發(fā)病機制作出完善的解釋，但自身免疫與腎臟炎癥作為LN的基本特征已經被廣泛接受。

目前，LN主要的治療手段是免疫抑制，雖有一定療效，但差強人意。根據NF-κB在淋巴細胞分化與腎臟炎癥中的作用，NF-κB的激活很有可能是LN發(fā)病及致病過程中的重要機制之一。已有研究通過調節(jié)NF-κB的活化進而探索LN的治療手段，不論是在淋巴細胞方面，還是腎臟炎癥方面，都取得了一定進展，表明調控LN進展中的NF-κB有望成為治療LN的有效手段。但如何靶向調控淋巴細胞及腎臟炎癥相關細胞中NF-κB的活性，是動物實驗走向臨床試驗的首要難題，望未來能夠解決此難題，讓靶向調控NF-κB為臨床治療LN

服務。

4 參考文獻

[1] INDA-FILHO A，NEUGARTEN J，PUTTERMAN C，et al.Improving outcomes in patients with lupus and end-stage renal disease[J].Semin Dials，2013，26（5）：590-596.

[2] ZHENG L，SINNIAH R，HSU SI.Pathogenic role of NF-kappaB activation in tubulointerstitial inflammatory lesions in human lupus nephritis[J].J Histochem Cytochem，2008，56（5）：517.

[3] PISETSKY DS.Anti-DNA antibodies：quintessential biomarkers of SLE[J].Nat Rev Rheumatol，2016，12（2）：102-110.

[4] BAI Y，TONG Y，LIU Y，et al.Self-dsDNA in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus[J].Clin Exp Immunol，2018，191（1）：1-10.

[5] TSUBATA T.B-cell tolerance and autoimmunity[J].F1000 Res，2017，6：391.

[6] SISIRAK V，SALLY B，D'AGATI V，et al.Digestion of Chromatin in Apoptotic Cell Microparticles Prevents Autoimmunity[J].Cell，2016，166（1）：88-101.

[7] AN J，BRIGGS TA，DUMAX-VORZET A，et al.Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Deficiency in the Predispo-

sition to Systemic Lupus Erythematosus[J].Arthritis Rheumatol，2016，69（1）：131-142.

[8] CROW YJ，CHASE DS，LOWENSTEIN SCHMIDT J，et al.Characterization of human disease phenotypes associated with mutations in TREX1，RNASEH2A，RNASEH2B，RNASEH2C，SAMHD1，ADAR，and IFIH1[J].A J Med Genet A，2015，167A（2）：296-312.

[9] MARTIN M，BLOM AM.Complement in removal of the dead-balancing inflammation[J].Immunol Rev，2016，274（1）：218-232.

[10] STAMATIADES EG，TREMBLAY ME，BOHM M，et al.

Immune Monitoring of Trans-endothelial Transport by Kidney-Resident Macrophages[J].Cell，2016，166（4）：991-1003.

[11] KRISHNAN MR，WANG C，MARION TN.Anti-DNA autoantibodies initiate experimental lupus nephritis by binding directly to the glomerular basement membrane in mice[J].Kidney Int，2012，82（2）：184-192.

[12] YUNG S，NQ CY，HO SK，et al.Anti-dsDNA antibody induces soluble fibronectin secretion by proximal renal tubular epithelial cells and downstream increase of TGF-β1 and collagen synthesis[J].J Autoimmun，2015（58）：111-122.

[13] DAVIDSON A.What is damaging the kidney in lupus nephritis？[J].Nat Rev Rheumatol，2016，12（3）：

143-153.

[14] P?REZ DE LEMA G，MAIER H，NIETO E，et al.Chemokine expression precedes inflammatory cell infiltration and chemokine receptor and cytokine expression during the initiation of murine lupus nephritis[J].J Am Soc Nephrol，2001，12（7）：1369-1382.

[15] DE SILVA NS，SILVA K，ANDERSON MM，et al.Impairment of Mature B Cell Maintenance upon Combined Deletion of the Alternative NF-κB Transcription Factors RELB and NF-κB2 in B Cells[J].J Immunol，2016，196（6）：2591-2601.

[16] DERUDDER E，HERZOG S，LABI V，et al.Canonical NF-κB signaling is uniquely required for the long-term persistence of functional mature B cells[J].Proc Natl Acad Sci USA，2016，113（18）：5065-5070.

[17] STERI M，ORR? V，IDDA ML，et al.Overexpression of the Cytokine BAFF and Autoimmunity Risk[J].N Engl J Med，2017，376（17）：1615-1626.

[18] JOSEFOWICZ SZ，LU LF，RUDENSKY AY.Regulatory T cells：mechanisms of differentiation and function[J].Annu Rev Immunol，2012（30）：531-564.

[19] POLESSO F，SARKER M，ANDERSON A，et al.Constitutive expression of NF-κB inducing kinase in regulatory T cells impairs suppressive function and promotes instability and pro-inflammatory cytokine production[J].

Sci Rep，2017，7（1）：14779.

[20] ZHANG H，FU R，GUO C，et al.Anti-dsDNA antibodies bind to TLR4 and activate NLRP3 inflammasome in lupus monocytes/macrophages[J].J Transl Med，2016，14（1）：156.

[21] ZHANG H，ZHAO C，WANG S，et al.Anti-dsDNA antibodies induce inflammation via endoplasmic reticulum stress in human mesangial cells[J].J Transl Med，2015，13（1）：178.

[22] FU R，GUO C，WANG S，et al.Podocyte Activation of NLRP3 Inflammasomes Contributes to the Development of Proteinuria in Lupus Nephritis[J].Arthritis Rheumatol，2017，69（8）：1636-1646.

[23] LIU Z，WANG X，WANG Y，et al.NLRP3 inflammasome activation regulated by NF-κB and DAPK contributed to paraquat-induced acute kidney injury[J].Immunol Res，2017，65（3）：687-698.

[24] LI M，SHI X，QIAN T，et al.A20 overexpression alleviates pristine-induced lupus nephritis by inhibiting the NF-κB and NLRP3 inflammasome activation in macrophages of mice[J].Int J Clin Exp Med，2015，8（10）：17430-17440.

[25] DING Y，LIAO W，HE X，et al.CSTMP Exerts Anti-Inflammatory Effects on LPS-Induced Human Renal Prox

（下轉第76頁）

（上接第57頁）

imal Tubular Epithelial Cells by Inhibiting TLR4-Mediated NF-κB Pathways[J].Inflammation，2016，39（2）：849-859.

[26] BETHUNAICKAN R，BERTHIER CC，RAMANUJAM M，et al.A unique hybrid renal mononuclear phagocyte activation phenotype in murine systemic lupus erythematosus nephritis[J].J Immunol，2011，186（8）：4994-5003.

[27] LU J，SHI J，LI M，et al.Activation of AMPK by metformin inhibits TGF-β-induced collagen production in mouse renal fibroblasts[J].Life Sci，2015（127）：59-65.

[28] LI M，HU L，ZHU F，et al.Hepatitis B virus X protein promotes renal epithelial-mesenchymal transition in human renal proximal tubule epithelial cells through the activation of NF-κB[J].Int J Mol Med，2016，38（2）：513-520.

[29] JHOU JP，CHEN SJ，HUANG HY，et al.Upregulation of FcγRIIB by resveratrol via NF-κB activation reduces B-cell numbers and ameliorates lupus[J].Exp Mol Med，2017，49（9）：e381.

[30] ZHAO J，ZHANG H，HUANG Y，et al.Bay11-7082 attenuates murine lupus nephritis via inhibiting NLRP3 inflammasome and NF-κB activation[J].Int Immunopharmacol，2013，17（1）：116-122.

[31] WU X，ZHANG W，SHI X，et al.Therapeutic effect of artemisinin on lupus nephritis mice and its mechanisms[J].

Acta Biochim Biophys Sin（Shanghai），2010，42（12）：916-923.

收稿日期：2018-01-05；修回日期：2018-03-28