洪 慶，徐曼麗，湯 建

(江蘇大學(xué) 藥學(xué)院, 江蘇 鎮(zhèn)江 212013)

環(huán)烯醚萜是一類含有縮醛結(jié)構(gòu)的單萜類天然產(chǎn)物，自然界中分布廣泛，具有保肝、利膽、抗炎、抗腫瘤、抗糖尿病以及神經(jīng)保護(hù)作用。特別是近年來，環(huán)烯醚萜類成分在腦缺血損傷、老年癡呆癥、帕金森病以及其他衰老相關(guān)疾病等方面表現(xiàn)出良好的應(yīng)用潛力，成為研究抗衰老和神經(jīng)保護(hù)的中藥化合物來源[1]。

車葉草苷(Asperuloside)是從茜草科(Rubiaceae)、杜仲科(Eucommiaceae)等植物中提取的環(huán)烯醚萜類化合物。近年來的藥理研究表明，車葉草苷具有抗炎鎮(zhèn)痛、降血壓、抗細(xì)胞染色體誘變作用多種藥理活性，受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注；我們實(shí)驗(yàn)室在前期的研究中發(fā)現(xiàn)車葉草苷具有神經(jīng)保護(hù)和激活端粒酶等活性作用，在抗衰老和神經(jīng)保護(hù)方面具有良好的應(yīng)用前景[2]。本文綜合國內(nèi)外關(guān)于車葉草苷的研究報(bào)道，對(duì)其藥理作用、作用機(jī)制以及車葉草苷的藥材基源作一綜述。

1 車葉草苷的藥理活性及其作用機(jī)制

1.1 抗炎作用

車葉草苷對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷模型(ALI)及RAW 264.7巨噬細(xì)胞模型均有明顯的對(duì)抗作用，體內(nèi)外均顯著下調(diào)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)及IL-6的水平，給藥后顯著降低肺組織濕干重比，在改變小鼠組織同時(shí)激活其體內(nèi)髓過氧化物酶(MPO)。Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)車葉草苷能有效抑制核因子κB(NF-ΚB)抑制蛋白α (IκBα)、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)、c-Jun N端激酶(JNK)和p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的磷酸化[3]。車葉草苷對(duì)巴豆油致小鼠耳腫脹、交叉萊膠致大鼠足腫脹等急性炎癥模型具有較好的抗炎作用，對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞具有良好的抗炎作用，可能與抑制NF-ΚB的活化，從而抑制iNOS的基因轉(zhuǎn)錄和iNOS蛋白表達(dá)，減少NO釋放有關(guān)[4]。在大鼠原代滑膜細(xì)胞中，相對(duì)于模型組，車葉草苷(20 mg/kg)對(duì)TNF-α，IL-1β和前列腺素E2(PGE2)的抑制率分別為41%，54%和63%，低劑量(10 mg/kg)的車葉草苷仍表現(xiàn)出明顯的抑制作用。車葉草苷減輕軟骨破壞同時(shí)促進(jìn)骨關(guān)節(jié)活動(dòng)功能恢復(fù)，發(fā)揮治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)療效[5]。

雞屎藤中制備得到的車葉草苷對(duì)尿酸性腎病(UAN)模型大鼠具有一定的抗炎鎮(zhèn)痛活性，其作用機(jī)制涉及抑制NF-κB p65炎癥通路的活性，下調(diào)單核細(xì)胞趨化蛋-1(MCP-1)和α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的表達(dá)并且調(diào)節(jié)UAN組織中促炎介質(zhì)的產(chǎn)生，以改善UAN大鼠腎組織纖維化[6]。

1.2 鎮(zhèn)痛作用

車葉草苷發(fā)揮抗炎作用的同時(shí)還伴隨著鎮(zhèn)痛作用。雞屎藤根、莖的甲醇提取物中陸續(xù)分離出車葉草苷、去乙酰車葉草苷等環(huán)烯醚萜苷類化合物和環(huán)烯醚萜苷二聚體。小鼠口服600和900 mg/kg雞屎藤甲醇提取物后，在醋酸扭體實(shí)驗(yàn)、福爾馬林實(shí)驗(yàn)和熱水甩尾實(shí)驗(yàn)中對(duì)化學(xué)和熱刺激引發(fā)的疼痛具有顯著的耐受性。在福爾馬林實(shí)驗(yàn)中雞屎藤甲醇提取物表現(xiàn)出了中樞和外周雙重鎮(zhèn)痛機(jī)制[7]。雞屎藤環(huán)烯醚萜苷(IGPS)是植物雞屎藤中提取的一類組分，其主要活性成分之一車葉草苷。IGPS在小鼠福爾馬林實(shí)驗(yàn)、醋酸致扭體實(shí)驗(yàn)及大鼠坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷(SNI)等多種疼痛動(dòng)物模型中均具有良好的鎮(zhèn)痛作用，且用藥安全性高，連續(xù)用藥無成癮性。IGPS的鎮(zhèn)痛作用機(jī)制與阿片受體無關(guān)，而可能與抑制NO/cGMP/PKG信號(hào)通路有關(guān)[8]。

1.3 抗細(xì)胞染色體誘變作用

車葉草苷及衍生物車葉草苷酸和去乙?；嚾~草苷酸均能夠抑制中國倉鼠卵巢細(xì)胞以及抑制小鼠的染色體誘變。用氯化甲基汞(MMC)誘導(dǎo)后的倉鼠卵細(xì)胞，用車葉草苷處理后，發(fā)現(xiàn)其染色體畸變的幾率顯著減少；先給小鼠腹腔注射MMC，6小時(shí)后再對(duì)其進(jìn)行灌胃1 mL質(zhì)量濃度為4%的車葉草苷，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)微核數(shù)量減少，證明車葉草苷具有一定的抗細(xì)胞染色體誘變的作用[9]。

1.4 抗肥胖作用

大鼠喂養(yǎng)40%的高脂肪飲食(HFD)以建立代謝綜合征樣模型。HFD模型大鼠口服杜仲葉提取物、車葉草苷和另一環(huán)烯醚萜苷，發(fā)現(xiàn)車葉草苷可以顯著增加HFD大鼠體內(nèi)膽酸和脫氧膽酸的分泌。車葉草苷長期給藥可以抑制模型組老鼠的體重、白色脂肪組織重量、血漿甘油三酯和游離脂肪酸的增加。此外，長期喂食車葉草苷還增加了HFD模型老鼠的基礎(chǔ)代謝率，而且HFD對(duì)照組的呼吸速率顯著下降，加速脂質(zhì)代謝，表現(xiàn)出良好的抗肥胖作用[10]。

1.5 其他藥理活性

車葉草苷對(duì)銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、摩氏變形桿菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、沙門氏菌和志賀氏菌等有抑制作用，這被認(rèn)為是藥材海巴戟發(fā)揮治療皮膚病、感冒、發(fā)燒等疾病的作用基礎(chǔ)[9]。車葉草苷對(duì)腐皮鐮刀菌、宮部旋胞腔菌、多粘芽胞桿菌也表現(xiàn)一定的抑制作用[11]。

杜仲皮及葉中分離到的含環(huán)烯醚萜苷類和木脂素類的提取物口服后能降低大鼠血壓，杜仲皮煎劑(生藥材4.2 g/kg)和杜仲葉浸提物制劑(生藥材6.3 g/kg)均可使正常大鼠的血壓降低，并且杜仲葉浸提物制劑可使大鼠的心率減慢[12]。自發(fā)性高血壓大鼠模型喂食杜仲葉提取物表現(xiàn)出劑量依賴性的降壓作用。人類長期攝入杜仲葉提取物可以降低心臟收縮壓。其降壓作用可能源于包含車葉草苷在內(nèi)的杜仲苷類成分[13]。

車葉草苷能夠增強(qiáng)293T細(xì)胞和BJ成纖維細(xì)胞端粒酶活性，促進(jìn)BJ成纖維細(xì)胞的增殖，表明車葉草苷具有基于端粒酶機(jī)制的促神經(jīng)細(xì)胞再生的潛力。車葉草苷能顯著延長果蠅壽命，增強(qiáng)動(dòng)物體內(nèi)過氧化氫酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性，降低脂質(zhì)過氧化物的降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)的含量，抑制體內(nèi)氧化應(yīng)激(ROS)效應(yīng)，具有良好的神經(jīng)保護(hù)和抗衰老的潛力[2]。

2 相關(guān)植物基源

車葉草苷的成分來源可以從茜草科巴戟天屬(Morinda)、耳草屬(Hedyotis)、拉拉藤屬(Galium)等植物中提取分離。另有杜仲科植物，如杜仲中也發(fā)現(xiàn)有車葉草苷。車葉草苷為環(huán)烯醚萜類化合物，在植物組分的提取分離的過程中，常伴有其結(jié)構(gòu)類似物：去乙酰車葉草酸甲酯、車葉草苷酸，后者也可能是車葉草苷的內(nèi)酯環(huán)開環(huán)產(chǎn)物，化學(xué)式如圖1。

圖1 車葉草苷(a)，去乙酰車葉草酸甲酯(b)，車葉草苷酸(c)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

茜草科巴戟天屬植物亮葉巴戟天(MorindalucidaBenth.)在西非作為藥用植物，主要用于治療發(fā)燒、瘧疾，并具有一定的鎮(zhèn)痛作用。亮葉巴戟天的二氯甲烷/甲醇提取物中分離出車葉草苷和車葉草苷酸等化合物[14]。同屬植物海巴戟(MorindacitrifoliaL.)，其根、皮、莖、葉和果實(shí)用于治療糖尿病、高血壓和癌癥等，從海巴戟果實(shí)中分離出車葉草苷[15]。

雞屎藤[Paederiascandens(Lour.) Merr.]為茜草科植物，具有祛風(fēng)利濕、止痛解毒、消食化積和活血消腫之功效，含有車葉草苷等大量的環(huán)烯醚萜類化合物[16]。

白花蛇舌草(HedyotisdiffusaWilld.)為茜草科耳草屬植物，具有清熱解毒、利尿消腫、活血止痛之功效，采用柱色譜法從白花蛇舌草提取物中分離得到車葉草苷[17]。同屬植物閉花耳草(HedyotiscryptanthaDunn)中也分離得到包括車葉草苷及其衍生物[18]。

長尾粗葉木(LasianthusacuminatissimusMerr.)系茜草科植物，其根俗稱“鐵骨人參”，有行氣活血，祛濕強(qiáng)筋，止痛功效，色譜手段純化長尾粗葉木提取物，得到車葉草苷等化合物，長尾粗葉木中分離得到的車葉草苷和去乙酰車葉草苷具有抑制佐劑型關(guān)節(jié)炎(AA)的作用，可能是長尾粗葉木中抗RA的活性成分[19]。

茜草科拉拉藤屬植物蓬子菜(GaliumverumLinn.)具有清熱解毒、行血、利濕止癢的功效，即可內(nèi)服又可外用，從中可分離得到車葉草苷等成分[20]。長葉蓬子菜(GaliumverumLinn. var.asiaticumNakai)為蓬子菜變種，其甲醇提取物分離得到車葉草苷、車葉草苷酸等化合物[21]。同屬植物豬殃殃(GaliumspuriumL.)地上部分的甲醇提取物分離到車葉草苷、車葉草苷酸等化合物[22]。

繁星花[Pentaslanceolata(Forsk.) K. Schum.]為茜草科五星花屬多年生草本花卉，其地上部分的乙醇提取物中分離出一系列以車葉草苷為代表的環(huán)烯醚萜類化合物[23]。

瓊島染木樹(SaprosmamerrilliiLo)是茜草科染木樹屬(Saprosma)，其具有良好的抗腫瘤及抗菌活性，其莖中分離得到車葉草苷等化合物[24]。

Coprosmaquadrifida(Labill.) B. L. Rob.是茜草科臭葉木屬小灌木。快速加壓熱水提取的方法從其中提取出大量的車葉草苷[25]。

Ronabeaemetica(L. f.) A. Rich.是茜草科頭九節(jié)屬灌木，其具有醫(yī)治痢疾的作用，在西班牙和葡萄牙也曾被作為催吐藥使用。從其中分離出4種化合物，其中包括車葉草苷、去乙酰車葉草酸甲酯、車葉草苷酸等[26]。

杜仲科植物杜仲(EucommiaulmoidesOliv.)的樹皮入藥，具補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、降血壓、安胎等諸多功效，從杜仲皮、葉及花中均發(fā)現(xiàn)車葉草苷等環(huán)烯醚萜類成分[27]。

3 結(jié)論與展望

總體而言，目前關(guān)于車葉草苷的藥理活性研究并不是很多，且主要集中在鎮(zhèn)痛、降壓、抗染色體誘變等方面，系統(tǒng)的、深入的作用機(jī)制方面的研究還相對(duì)較少。但車葉草苷作為環(huán)烯醚萜的一員，在抗腫瘤、抗炎和神經(jīng)保護(hù)方面具有良好的潛力。因此，對(duì)車葉草苷的植物基源、藥理活性及其作用機(jī)制進(jìn)行深入研究對(duì)進(jìn)一步開發(fā)車葉草苷資源，擴(kuò)大其臨床應(yīng)用范圍，提高臨床應(yīng)用價(jià)值具有重要的意義。