趙俊英，趙俊明

(1.隴東學院 化學化工學院，甘肅 慶陽 745000；2.山東華宇工學院，山東 德州 253000)

硫氰酸鈉是生乳中天然存在的一種活性抗菌體系，少量的硫氰酸鈉對乳品起到保鮮作用。國際乳聯(lián)(IDF)公報234號指出，牛乳中的硫氰酸鈉含量是不穩(wěn)定的，可以達到10～15 mg/kg，但通常的濃度范圍是2～7 mg/kg。硫氰酸鈉的檢測方法有高效液相色譜法[1]、離子色譜法[2]、分光光度法[3]、動力學光度法、紅外光譜法等。于超等人采用高效液相色譜法測定乳品中硫氰酸鈉的含量[1]，該方法對乳及乳制品中硫氰酸鈉有較高的提取率，回收率均在80%以上，該法分析成本較高，而且耗時。陳基耘采用離子色譜法測定乳品中硫氰酸鈉的含量[2]，硫氰酸鈉質(zhì)量濃度在0.10～4.00 mg/L范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好的線性，該方法的檢出限為0.01 mg/L，但樣品的處理過程較為復雜。 本文采用分光光度法測定乳品中硫氰酸鈉的含量，操作簡單，重現(xiàn)性好，回收率高，特別適用于乳品企業(yè)對硫氰酸鈉的快速檢測[4]。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

紫外可見分光光度計SPECORD50(德國耶拿公司) 、電子分析天平FA2004N、三氯乙酸(A.R.)、硫氰酸鉀(A.R.)、硝酸鐵(A.R.)、市售純牛奶(蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進)。

1.2 樣品處理

準確吸取20.00 mL市售純牛奶與三角瓶中，為除去牛奶中的蛋白質(zhì)、脂肪等雜質(zhì)，邊振搖邊加入三氯乙酸溶液(200 mg/L)5 mL待混合均勻后靜置15min。用定量濾紙過濾于干凈的三角瓶中，濾液待用。

2 結(jié)果與分析

2.1 吸收波長的確定

取上述含硫氰酸根濃度為10 mg/L的標準溶液，在紫外可見分光光度計中進行全波長掃描。主要數(shù)據(jù)見表1，以波長為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪制的曲線見圖1。由圖1可以看出，波長在340～450 nm范圍內(nèi)，標準溶液的吸光值逐漸增大，在460～540 nm范圍內(nèi)，標準溶液的吸光值逐漸減小。因此，本文采用的測定波長為450 nm。

表1 吸收波長的確定數(shù)據(jù)

圖1 最大波長的確定

2.2 繪制標準曲線

配制一系列含硫氰酸根濃度為0、2、5、10、15、20、25和30 mg/L的待測溶液。準確吸取5.00 mL硝酸鐵溶液(16 g/L)于盛有含硫氰酸根濃度為5 mg/L的25 mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度，搖勻待測。測得的數(shù)據(jù)見表2，以硫氰酸根濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪制的標準曲線見圖2。由圖2可以看出，在硫氰酸根濃度為0～30 mg/L、波長為450 nm時，測得的吸光度和硫氰酸根濃度呈良好線性關系，回歸方程為y=0.0258x+0.0976，相關系數(shù)為0.9965。當硫氰酸根濃度大于30 mg/L時，繪制的曲線偏離了標準曲線，不適用改曲線計算樣品中硫氰酸根的含量。

表2 含硫氰酸根濃度梯度溶液的吸光值數(shù)據(jù)

圖2 硫氰酸根標準曲線

2.3 樣品測定

選取蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進等市售純牛奶按上述方法進行測定，經(jīng)多次測定生鮮乳本底吸光值(生乳硫氰酸根為陰性時的吸光值)為0.0854±0.0047，本實驗計算中選用0.0901，測定結(jié)果表3。

測得樣品的凈吸光值以及從標準曲線計算出樣品中硫氰酸鈉含量的數(shù)據(jù)如下表所示，符合衛(wèi)生部對乳品中硫氰酸鈉含量的規(guī)定。由表3可以看出，蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進等市售純牛奶中硫氰酸鈉的含量分別為0.5581、1.6202、2.1899、3.0078 mg/L，符合國際乳聯(lián)(IDF)公報中，國內(nèi)外科學界研究的健康牛奶中硫氰酸鈉含量為0.4～22 mg/L的成果。

表3 樣品中硫氰酸根含量測定結(jié)果

2.4 回收率試驗結(jié)果

對于以上4種樣品(2.3)進行加標回收試驗，按上述試驗方法1.2制取4種樣品的乳清液，分別置于4個標有蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進的干凈錐形瓶中，以備待用。準確吸取10.00 mL 蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進等市售純牛奶的乳清液于25 mL容量瓶中，再向其中加入1.00 mL含硫氰酸根濃度為1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的加標溶液，然后準確吸入5.00 mL硝酸鐵溶液(16 g/L)用蒸餾水定容至刻度，搖勻待測。

按上述2.3試驗方法測定，測得回收率試驗結(jié)果見表4。由表4可以看出，蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進等市售純牛奶的回收率分別為90.6%、96.8%、91.8%、96.4%，滿足回收率在80%～120%的要求，表明該方法準確度較高。

表4 回收率試驗結(jié)果

2.5 干擾測定

以免濾液中含有的三氯乙酸干擾實驗，須進行干擾測定。取三氯乙酸溶液5.00 mL于干凈的容量瓶中，再加入5.00 mL硝酸鐵溶液(16 g/L)，加蒸餾水定容并搖勻，使用紫外分光光度計測定其吸光值。

按上述方法，對樣品蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進等市售純牛奶進行干擾測定，測定結(jié)果見表5。由表5可以看出，干擾測定結(jié)果為0.0854±0.0047，本實驗計算中選用0.0901。

表5 干擾測定結(jié)果

2.6 重現(xiàn)性試驗結(jié)果

取市售蒙牛純牛奶五份，按1.2方法制備乳清液，再按2.3方法測定其硫氰酸根含量，測定結(jié)果見表6。由表6可以看出，市售純牛奶蒙牛(1)～(5)的含量分別為0.5775、0.5796、0.5814、0.5849、0.5871 mg/L，且RSD=0.7%，表明紫外分光光度法重現(xiàn)性較高。

表6 重現(xiàn)性試驗結(jié)果

3 結(jié)論

本文采用紫外分光光度法測定硫氰酸鈉的含量。在硫氰酸根濃度為0～30 mg/L、波長為450 nm時，測得的吸光度和硫氰酸根濃度呈良好線性關系，回歸方程為y=0.0258x+0.0976，相關系數(shù)為0.9965，測得蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進等乳品中硫氰酸根的含量分別為0.5581、1.6202、2.1899、3.0078 mg/L，加標回收率為90.6%～96.8%。結(jié)果表明，硫氰酸鈉的含量在正常范圍內(nèi)，因此蒙牛、伊利、特侖蘇、夏進等乳品不存在任何風險。而且本方法具有操作簡便、回收率高、成本低、分析周期短、靈敏度高等優(yōu)點。非常適合中小企業(yè)對乳品中硫氰酸鈉含量進行快速檢測。