顧靜靜

摘要：食品行業(yè)發(fā)展以及人類健康提升中，食品檢測(cè)發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，隨著食品安全檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的逐步提升，高效液相色譜技術(shù)呈現(xiàn)出無法比擬的優(yōu)勢(shì)。未來高效液相色譜技術(shù)將會(huì)實(shí)現(xiàn)更好地發(fā)展并為人們生活、健康等做出更大的貢獻(xiàn)。作為食品檢測(cè)人員需要在日常工作中積極總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，完善檢測(cè)技術(shù)方法，更好地促進(jìn)食品行業(yè)的安全、健康發(fā)展。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜技術(shù)；食品檢測(cè)；應(yīng)用

一、高效液相色譜設(shè)備結(jié)構(gòu)及原理

1、高效液相色譜設(shè)備結(jié)構(gòu)

高效液相色譜設(shè)備涉及到幾個(gè)部分，主要包括高壓泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器以及收集處理數(shù)據(jù)設(shè)備等。高壓泵要有一定的耐腐蝕性，使得流動(dòng)相和樣品通過色譜分離柱和檢測(cè)系統(tǒng)時(shí)有足夠的動(dòng)力。色譜柱能夠?qū)ξ镔|(zhì)進(jìn)行有效的分離，流出液中濃度變化可以通過檢測(cè)器轉(zhuǎn)變?yōu)楣鈱W(xué)或電學(xué)信號(hào)。數(shù)據(jù)收集處理設(shè)備能夠?qū)z測(cè)器中檢測(cè)到的信號(hào)呈現(xiàn)在屏幕上。

2、原理分析

對(duì)于食品中的合成著色劑，在提取時(shí)可以使用液———液分配法等進(jìn)行，制作成水溶液，利用高效液相色譜儀器實(shí)現(xiàn)多頻率的分離，通過標(biāo)準(zhǔn)化的溶液實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化曲線的建設(shè)，利用外標(biāo)法，通過保留時(shí)間的長(zhǎng)短進(jìn)行準(zhǔn)確地定性，定量一般是通過峰面積進(jìn)行的。利用高壓泵將要檢測(cè)的液體吸入到儀器中，對(duì)壓力和流量計(jì)算后，進(jìn)入到進(jìn)樣器中，與流動(dòng)相一起進(jìn)入到色譜柱中，對(duì)比溶劑兩相間樣品分配系數(shù)的不同，在色譜柱中進(jìn)行分離，檢測(cè)器對(duì)于不同時(shí)間流入的信號(hào)進(jìn)行收集，通過數(shù)據(jù)處理設(shè)備獲得色譜圖，然后再次分析。

二、高效液相色譜技術(shù)在食品添加劑中的運(yùn)用

2.1食品甜味劑的檢測(cè)

根據(jù)有無營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，甜味劑可分為營(yíng)養(yǎng)型與非營(yíng)養(yǎng)型甜味劑，一般所說的甜味劑是人工合成的非營(yíng)養(yǎng)型甜味劑。糖精鈉是使用時(shí)間最長(zhǎng)的人工合成甜味劑之一，WHO制訂的ADI（亞德諾半導(dǎo)體）為0～2.5 mg/kg。單獨(dú)測(cè)定食物中的糖精鈉方法相對(duì)簡(jiǎn)單，應(yīng)用反相色譜柱，以甲酸0.02 mol/L、乙酸銨（5∶95）為流動(dòng)相，紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)選擇230 nm，能很容易地獲得結(jié)果，這是國(guó)家規(guī)范檢驗(yàn)方法。使用反相離子對(duì)分配型HPLC法能同時(shí)測(cè)定食品中甘草苷和糖精鈉，簡(jiǎn)單、快速的操作。其條件為Chrosorb RP-18（5μm）柱，流動(dòng)相為乙醇0.05 M磷酸二氫鈉（2∶3）溶液中含0.02 MCTA，用磷酸調(diào)pH為3.0，紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)選擇245 nm。和高效液相色譜-紫外檢測(cè)法（HPLC-UV）比較，重現(xiàn)性好的HPLC-FLD法，準(zhǔn)確度更高。

2.2食品防腐劑的檢測(cè)

防腐劑在食品中十分常用，主要有苯甲酸與山梨酸和其鈉鹽，其應(yīng)用范圍與限量要根據(jù)GB2760-2011食品安全國(guó)家規(guī)范食品添加劑應(yīng)用規(guī)范中的規(guī)定實(shí)施。食品中苯甲酸、山梨酸與糖精鈉的含量運(yùn)用高效液相色譜法測(cè)定，使用C 18色譜柱，以甲醇-乙酸銨混合溶液為流動(dòng)相，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm處，對(duì)不同的樣品使用不同的前處理方法，定容后用高效液相色譜儀實(shí)施分析定量，可獲得良好的分離效果，苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的檢出限分別為1.8、1.2、3.0 mg/kg。用乙酸鋅溶液與亞鐵氰化鉀溶液作為沉淀劑實(shí)施樣品的預(yù)處理，為流動(dòng)相的甲醇-乙酸銨混合溶液，C 18色譜柱，于波長(zhǎng)290 nm處紫外檢驗(yàn)，簡(jiǎn)化了樣品前處理過程，分離度高，有相對(duì)好的回收率。

2.3食品色素的檢測(cè)

對(duì)2015年食品安全的檢驗(yàn)規(guī)范分析，食用色素屬于被國(guó)家嚴(yán)格管控食品安全范圍的人工合成的。但因價(jià)格低且效果好，許多超國(guó)家規(guī)范的人工合成食用色素大量產(chǎn)生，所以需要注重對(duì)這類色素的檢驗(yàn)。HPLC法可測(cè)定食品中含有違禁或過量的人工合成色素，使用樣本的合理粉碎方式和層次清洗方式。聚酰胺吸附純化LichrospherC 18柱，結(jié)果與含量的大小并沒有直接的對(duì)應(yīng)影響。甲醇-乙酸銨為流動(dòng)相梯度洗脫，依照對(duì)照品的相應(yīng)出峰時(shí)間和積分面積得出樣品中是否含有相應(yīng)色素或含量的多少。

三、高效液相色譜技術(shù)在食品營(yíng)養(yǎng)成分中的運(yùn)用

3.1糖類的檢測(cè)

食品中糖類是最廣泛的組成成分，通常情況下，糖的測(cè)定過程會(huì)影響其提取、測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，而高效液相色譜法的高靈敏度能彌補(bǔ)這一缺陷。樣本中水溶性單糖與寡糖組分的類型與含量通過高效液相色譜-蒸發(fā)光散射進(jìn)行測(cè)定，使用hypersilnh柱，選擇流動(dòng)性的發(fā)散光放射方式的檢驗(yàn)。該方式對(duì)與糖類的檢驗(yàn)有直接的判定表現(xiàn)。分離鑒定其碳水化合物中的焦糖等糖分所處在的變化系數(shù)區(qū)域。并對(duì)色譜中顯示的波動(dòng)范圍進(jìn)行堆成線性的直接視覺表現(xiàn)，得到檢驗(yàn)樣本參照的安全規(guī)范系數(shù)。

3.2氨基酸的檢測(cè)

生物體生存與發(fā)展的關(guān)鍵基礎(chǔ)性物質(zhì)是氨基酸，它是酶和蛋白質(zhì)的主要組成成分，這2種物質(zhì)自身的易變性能需要在檢驗(yàn)的過程中使用新技術(shù)、新方法進(jìn)行判斷。高效液相色譜法因其自身具有高度靈敏性、流動(dòng)相色譜范圍大的特征，對(duì)這些物質(zhì)有著可靠的提取效果，受到人們的高度注重。

3.3維生素的檢測(cè)

維生素是一類保持人體生命活動(dòng)必要的有機(jī)物質(zhì)，也是維持人體健康的關(guān)鍵活性物質(zhì)，假如一直缺少某種維生素，就會(huì)出現(xiàn)生理機(jī)能障礙而產(chǎn)生某種疾病。用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定維生素B 1與維生素B 2，使用uBondpak C 18柱，色譜條件：甲醇∶水=40∶60（V/V）為流動(dòng)相，0.8 mL/min的流速，使用熒光檢驗(yàn)器，結(jié)果顯示平均回收率分別為95.50%和95.82%。該方法簡(jiǎn)單、省時(shí)、干擾小并有相對(duì)較高的靈敏度、準(zhǔn)確性及較寬的應(yīng)用范圍。

四、高效液相色譜技術(shù)在有毒有害物質(zhì)中的應(yīng)用

作為食品安全重要課題的殘留監(jiān)測(cè)，需要應(yīng)用各類樣品實(shí)施解決和分析。近年來，HPLC和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)通過不斷的發(fā)展，使其在不同種類的農(nóng)藥、獸藥和毒素等有害物質(zhì)的檢驗(yàn)中更加廣泛地運(yùn)用。在動(dòng)物性食品中，殘留獸藥指的是在喂養(yǎng)動(dòng)物的過程中服用藥物的殘留和其代謝物；殘留農(nóng)藥指的是在種植植物的過程中噴灑的農(nóng)藥殘留和降解產(chǎn)物的殘留。食品中農(nóng)藥殘留問題至關(guān)重要，尤其是蔬菜水果中的農(nóng)藥殘留含量分析最為重點(diǎn)，它不僅和人民生活息息有關(guān)，而且直接威脅到人民的健康。HPLC是分離分析熱不穩(wěn)定和難揮發(fā)性化合物的最為直接有效的方法。HPLC對(duì)于分析易揮發(fā)、吸附力強(qiáng)不易清除的物質(zhì)十分有效。

五、結(jié)語

在經(jīng)濟(jì)文化繁榮發(fā)展的信息時(shí)代下，科學(xué)技術(shù)得到了快速的更新，高效液相色譜技術(shù)逐漸應(yīng)用于各領(lǐng)域中。近年來，為了提高食品安全的質(zhì)量，該技術(shù)被充分應(yīng)用于食品檢測(cè)中，并取得了顯著的成果。本文主要以該技術(shù)的應(yīng)用為主，分析其在食品營(yíng)養(yǎng)成分、食品添加劑和有毒物質(zhì)中的檢測(cè)情況。希望通過本文關(guān)于高效液相色譜技術(shù)相關(guān)應(yīng)用的研究，為日后促進(jìn)高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的發(fā)展提供寶貴的建議。

參考文獻(xiàn)：

[1]孫貝貝，房文紅.高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（35）：20454-20456，20490.

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（作者單位：濱?？h綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心）