□ 張威 胡重怡 呂小麗 郭平（通訊作者） 江西省食品檢驗檢測研究院

1 前言

基于大型儀器的檢測方法一般都具有靈敏度高、精度高、準確性好、重復性好等優(yōu)點，其在食品安全監(jiān)督管理過程中起著主導作用。但是，此類方法也存在設備龐大、操作復雜、耗時長、成本高等缺點，難以滿足及時、快速的現(xiàn)場安全監(jiān)管需求。20世紀70年代以來，市場上逐漸涌現(xiàn)出一類具有快速簡便、現(xiàn)場可操作性強、檢測成本低、對檢測人員技術要求低等特點的檢測方法，它們被稱為快速檢測（快檢）方法[1]。國際標準化組織將快檢方法定義為具有能夠滿足用戶適當需求性能的，具有減少分析時間、易于操作或可以自動操作、小型化、降低檢測成本等優(yōu)勢的替代方法[2]。1994年，國際分析家學協(xié)會（Association of Official Agricultural Chemists，AOAC）發(fā)布了“檢測試劑盒定義與改進指南”[3]，將商品化試劑盒定義為對一種分析方法的主要或關鍵組成進行商品化包裝并可供銷售的檢測體系，以確定一種或多種食物基體中目標分析物的存在或含量。

2015年新修訂的《食品安全法》[4]第八十八條規(guī)定，“采用國家規(guī)定的快速檢測方法對食用農產品進行抽查檢測，被抽查人對檢測結果有異議的，可以自收到檢測結果時起4小時內申請復檢，復檢不得采用快速檢測方法”。第一百一十二條規(guī)定，“縣級以上人民政府食品藥品監(jiān)督管理部門在食品安全監(jiān)督管理工作中可以采用國家規(guī)定的快速檢測方法對食品進行抽查檢測，對抽查檢測結果表明可能不符合食品安全標準的食品，應當依照本法第八十七條的規(guī)定進行檢驗。抽查檢測結果確定有關食品不符合食品安全標準的，可以作為行政處罰的依據(jù)”?！掇r產品質量安全法》[5]第三十六條中也規(guī)定，“在農產品質量安全監(jiān)督抽查中可采用快速檢測方法進行抽查檢測。”以上兩部法律確立了快檢方法作為法定監(jiān)督檢查手段的地位。

快檢在加強食品安全日常監(jiān)管工作中發(fā)揮著重要作用，政府部門可經常舉行快檢抽查活動，促使餐飲業(yè)積極主動地增強和規(guī)范自身管理。同樣，快檢抽查能對市場上流通快、保質期短的食品進行有效篩查，使食品安全監(jiān)管和風險預警的關口前移[6]。作為一類高通量的初篩手段，將陽性樣品送實驗室驗證可達到擴大檢驗覆蓋面的同時減少實驗室檢驗工作量的目的，既節(jié)省了檢驗成本，又提高了工作效率。

快檢對食品中的高危項目進行快速檢查，特別適用于重大活動期間的食品安全保障工作[7]。利用快檢對突發(fā)公共衛(wèi)生事件中的危害物質進行快速篩查確認，可為患者贏得搶救時間，為事故調查指明方向。

快檢試劑（盒）在某些領域發(fā)揮著重要作用，因此，在重大商機的誘使下，越來越多的機構/企業(yè)投身于快檢產品的研究與生產—其中不乏一些低端小企業(yè)，因此導致該行業(yè)研發(fā)水平、產品質量參差不齊。當前，市場上大多數(shù)快檢產品的準確率約70%，假陽性率和假陰性率偏高，給用戶帶來快檢不準的印象，嚴重制約著快檢行業(yè)的發(fā)展[8]。

現(xiàn)如今，市場急需能滿足相關質量要求的快檢產品。國家各監(jiān)管相關部門積極響應社會需求，發(fā)布了食品快檢產品評價的相關標準或規(guī)范，以評價機制促使市場的優(yōu)勝劣汰，提高產品質量，保證行業(yè)良性發(fā)展，使快檢在食品安全監(jiān)管中真正發(fā)揮到有效作用。本文綜合分析了國內外快檢產品的管理和評價認定情況，為促進我國食品快檢試劑評價制度的發(fā)展提供參考。

表1 官方注冊（備案）制度對比表

2 食品快檢試劑評價制度

目前，國際上已開展了快檢產品的認證工作，但各國的評價制度不盡相同，大體可歸納為兩大類：第一類是采取官方注冊（備案）制度，如美國、加拿大、中國等；第二類則依靠有影響力的機構/組織進行評價驗證，如美國的AOAC、法國的AFNOR、北歐的NordVal、荷蘭的MicroVal等。

2.1 官方注冊（備案）制度

美國、加拿大、中國等國家對快檢試劑的管理模式均為官方注冊（備案），但各國的注冊制度要求各不相同。美國食品藥品監(jiān)督管理局對快速檢測試劑盒進行了分類管理，管理對象以治療診斷快檢產品為主，用于食品安全檢測等的快檢產品較少[9]。加拿大衛(wèi)生部對用于醫(yī)療、工業(yè)生產、科研目的快檢試劑有管理要求，生產企業(yè)必須向衛(wèi)生部申請產品注冊號[10]—該注冊號不涉及公共安全或危害等內容，僅表明該試劑盒用于以上國家允許的研究目的；該注冊形式不對快檢產品的技術性能進行任何評價，只是為了便于管理。在我國，農業(yè)部率先針對獸藥殘留檢測的酶聯(lián)免疫試劑盒實行了備案審查的管理模式[11]。企業(yè)需要為獸藥殘留快檢試劑盒注冊，申請注冊號，官方再指定實驗室對試劑盒性能指標進行驗證。政府職能部門充分依據(jù)法律法規(guī)，在職責范圍內對快檢試劑進行管理，促使企業(yè)不斷提高快檢產品質量，保障快檢市場良好發(fā)展。

2.2 機構/組織評價驗證

2003年，國際標準化組織ISO（International Standardizaiton Organization）發(fā)布的《食品和飼料中微生物檢測可替代方法驗證規(guī)范》（ISO 16140:2003）[12]是較早針對快檢方法評價的標準。其評價內容主要包括兩方面：與參考方法對比的研究和聯(lián)合實驗室的研究，并提出了評價的通用原則和技術協(xié)議，為各組織/機構進行快檢產品的評價認證提供了參考依據(jù)。定性方法評價參數(shù)（相對準確度、相對特異性、相對靈敏度、檢測限、包容性和排他性）和定量方法評價參數(shù)[線性、相對準確度、檢測限、定量限、相對靈敏度、特異性（包容性和排他性）、重復性、重現(xiàn)性]設置多、指標全面、具有廣泛的借鑒意義。

國際上，AOAC是制定分析檢測方法最具權威性的組織之一，其在1989年頒布了檢測試劑盒的指南（AOAC Research Institute Test Kit Defnitions and Modifcations Guideline）[3]，為快檢產品評價提供了參考。1992年，AOAC建立了快檢產品性能測試方法程序（Performance Tested Methods Program，PTM）[13]，對評價參數(shù)有著明確規(guī)定，定性評價指標包括包容性和排他性、檢出概率、重復性、重現(xiàn)性，定量評價指標包括特異性、重復性、重現(xiàn)性。AOAC下屬的研究所（Research Institute，RI）負責實施PTM[14]，由此開始了對食品快檢方法/產品的評價。“AOAC RI PTM的政策和程序”規(guī)定，通過PTM驗證的快檢方法及其附帶的快檢產品將自動獲得AOAC RI標志，并在其官方網站上公告相應快檢方法的信息，例如快檢企業(yè)名稱、產品名稱、待測物、適用基質等，在AOAC期刊上公開試劑盒的方法和評估報告。目前，獲得AOAC RI標志的快檢試劑盒的檢測對象主要有毒素、抗菌素、微生物、非法添加物、食物過敏原五大類。

AOAC的評價主要突出快檢方法的重復性和重現(xiàn)性，強調不同時期檢測結果的前后對比，注重試劑盒的實際效果。AOAC在微生物檢測試劑盒的指南中[15]首次提出了檢出概率指標，檢出概率-水平曲線圖可反映出靈敏度、特異性、假陽性和假陰性等性能指標，可使評價過程更加簡潔高效。

法國的AFNOR作為歐洲最權威的第三方認證組織之一，在ISO 16140:2003標準的基礎上進行補充修改，發(fā)布了《食品微生物可替代方法驗證》[16]。該規(guī)范的定性評價指標包括相對準確度、相對特異性、相對靈敏度、檢測限、包容性和排他性、實用性，定量評價指標包括線性、相對準確度、檢測限、定量限、相對靈敏度、包容性和排他性、重復性、重現(xiàn)性、實用性。與AOAC相比，AFNOR同樣對重復性和重現(xiàn)性有明確要求，同時還增加了方法實用性指標，如操作時間、操作人員資質、培訓時間等?？鞕z試劑的最大特點就是方便快捷，實用性指標考察有利于更好地評價出符合該特點的快檢產品。

北歐的NordVal也是在ISO 16140:2003標準的基礎上進行修改，發(fā)布了《微生物檢測可替代方法驗證規(guī)范》[17]。此規(guī)范的定性評價指標包括相對準確度、相對特異性、相對靈敏度、檢測限、包容性和排他性、與參考方法一致性，定量評價指標包括線性、重復性、重現(xiàn)性、方法可靠性、方法不確定度。該規(guī)范首次在定性評價指標中引入了與參考方法一致性指標，以參考方法來驗證定性檢測的準確性。在定量評價指標中引入可靠性評價以代替檢測限、定量限、靈敏度等指標的評價，精減了評價參數(shù)，使評價過程更加簡單，同時增加了方法不確定度指標。其增加的兩項評價指標突出了快檢產品要滿足具體的應用需求。

隨著我國社會的發(fā)展，快檢產品在食品及農產品安全領域被廣泛使用。為了對市場上的快檢方法及產品進行規(guī)范化管理，有關部門先后出臺了快檢方法評價標準。2005年，農業(yè)部發(fā)布了《獸藥殘留試劑（盒）備案參考評判標準》[11]。2011年，國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布了《商品化食品檢測試劑盒評價方法》[18]—國內首個針對快檢試劑盒的評價標準，其定性評價指標包括靈敏度、特異性、假陰性率/假陽性率、耐變性、與現(xiàn)有方法一致性分析；定量評價指標包括線性和范圍、檢測限、定量限、正確度、特異性、精密度、耐變性、與參考檢測方法的比較；定性檢測的評價報告僅出具陰性與陽性的判斷結果，不報送具體檢測數(shù)值，定量檢測的評價報告需報送檢測限以上的檢測數(shù)值。2017年，國家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布了《食品快速檢測方法評價技術規(guī)范》[19]，將其適用范圍規(guī)定為食品（含食農產品）中農獸藥殘留、非法添加、真菌毒素、食品添加劑、污染物質等定性快速檢測方法及相關的技術評價，評價指標包括靈敏度、特異性、假陰性率和假陽性率、與參比方法一致性分析。該規(guī)范對評價方法、評價步驟、評價結果及報告出具等作了基本要求，尤其是對盲樣的制備（基質的選擇、批內均勻性檢測、樣品穩(wěn)定性檢查）、試驗測試要求（平行測定、質控樣品、濃度水平、樣品數(shù)量等）進行了詳細的規(guī)定。

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3 總結與展望

國際上的快檢產品評價體系已經發(fā)展得比較完善，且已很好地應用于快檢方法/產品的評價認證中。國內快檢產品評價體系剛剛起步，有待進一步發(fā)展、成熟。當前國內市場上快檢產品的質量參差不齊，而且充斥著相當多的不合格產品，這嚴重損害了食品快檢在公眾心目中的形象。因此，評價標準需要不斷重視快檢產品的性能指標，加強性能符合性檢測，使高質量的產品在實際應用中實實在在地發(fā)揮作用。隨著社會的發(fā)展，人們越來越重視食品、藥品以及其它用品的安全性，這也使市場需求越來越大，并更加多樣化。評價標準也需要與時俱進、更富科學性，評價驗證方法需要更加突顯出實際使用目的。例如，AOAC的評價主要突出快檢方法的重復性和重現(xiàn)性，便于不同時期檢測結果的對比，同時提出了檢出概率的概念，使評價過程更加簡潔高效。法國AFNOR增加了方法實用性考察，有利于評價出更實用的快檢產品。北歐NordVal則引入了可靠性評價以代替檢測限、定量限、靈敏度等性能指標的評價，精減了評價參數(shù)。我國質監(jiān)總局增加了耐變性評價指標，與上述重復性和重現(xiàn)性指標相似，強調快檢產品前后檢測結果的一致性。

國內外快檢方法/產品評價認證法規(guī)的共同目的是保障產品質量和檢測結果，使快檢產品能發(fā)揮切實有效的作用，促進快檢市場的良好健康發(fā)展。