李丹丹 陳丕茂 朱愛意 袁華榮 馮雪 王文杰

摘要：【目的】研究密度脅迫對(duì)黑鯛魚苗運(yùn)輸存活率及免疫酶活性的影響，篩選出適宜的運(yùn)輸密度，為黑鯛科學(xué)運(yùn)輸提供參考依據(jù)?！痉椒ā窟x取體長9.0～11.7 cm的健康黑鯛魚苗490尾，共設(shè)5個(gè)密度組（D1、D2、D3、D4和D5），每袋對(duì)應(yīng)裝入黑鯛魚苗10、15、20、25和30尾，采用塑料袋充氧密封運(yùn)輸方式，運(yùn)輸時(shí)間2 h 45 min，分別于運(yùn)輸后0、6、12、24和48 h共5個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣檢測(cè)，對(duì)比不同密度運(yùn)輸后黑鯛幼魚鰓絲Na+/K+-ATPase酶（NKA）和肝臟超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、乳酸脫氫酶（LDH）活性及總蛋白（TP）、丙二醛（MDA）含量的變化?！窘Y(jié)果】采用塑料袋充氧密封運(yùn)輸方式，各密度組的黑鯛魚苗存活率均為100%，運(yùn)輸后恢復(fù)48 h的存活率仍為100%。經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸2 h 45 min后，各密度組黑鯛魚苗鰓絲組織中的NKA活性顯著低于運(yùn)輸前水平（P<0.05，下同），肝臟組織中的SOD和CAT活性顯著高于運(yùn)輸前水平，但三者均在恢復(fù)12 h后達(dá)到峰值；肝臟組織中的MDA含量整體上呈先增后降的變化趨勢(shì)，除D1組外其他密度組的MDA含量均在恢復(fù)6 h后達(dá)到峰值，隨后緩慢下降，恢復(fù)48 h后D1、D2、D3和D4組的MDA含量基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平；肝臟組織中的TP含量顯著低于運(yùn)輸前水平，恢復(fù)48 h后其含量明顯升高，但仍低于運(yùn)輸前水平；肝臟組織中的LDH活性隨時(shí)間推移的變化趨勢(shì)各不相同，D1、D2和D3組的LDH活性整體上呈逐漸降低趨勢(shì)，D4和D5組的LDH活性則呈先增后降的變化趨勢(shì)。【結(jié)論】密度脅迫對(duì)黑鯛魚苗運(yùn)輸存活率無影響，但其免疫酶活性及代謝能力均受影響，需在運(yùn)輸后暫養(yǎng)48 h才開始或基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平。在實(shí)際生產(chǎn)中，采用塑料袋充氧密封運(yùn)輸且運(yùn)輸時(shí)間不超過3 h時(shí)，以每袋裝20～25尾9.0～11.7 cm規(guī)格的黑鯛魚苗為宜。

關(guān)鍵詞： 黑鯛；運(yùn)輸密度脅迫；存活率；免疫酶活性

中圖分類號(hào)： S965.231 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：2095-1191（2018）07-1439-08

0 引言

【研究意義】魚類屬于低等脊椎動(dòng)物，極易受外界環(huán)境影響，且在不同生長發(fā)育階段不同魚種甚至相同魚種不同個(gè)體對(duì)各種環(huán)境脅迫的抵抗能力存在明顯差異（洪磊和張秀梅，2004）。魚類種苗期是其生長的關(guān)鍵時(shí)期，此時(shí)其免疫抵抗能力較弱，更易受外界環(huán)境影響，尤其在增殖放流和養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，拉網(wǎng)、捕捉、排污和運(yùn)輸?shù)炔僮骶豢杀苊獾卦黾郁~類額外能量消耗，致使其產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)。雖然應(yīng)激反應(yīng)是一種條件反射式的保護(hù)機(jī)制，但機(jī)體持續(xù)處于應(yīng)激狀態(tài)，則會(huì)增加各類病原的敏感性甚至導(dǎo)致魚病暴發(fā)（王文博等，2004；翁朝紅等，2008；王麗娜等，2017）。運(yùn)輸作為魚類生產(chǎn)養(yǎng)殖和放流工作中的必需環(huán)節(jié)，集合了密度變化、操作、振動(dòng)及運(yùn)輸水體環(huán)境變化等眾多脅迫因子，會(huì)引發(fā)機(jī)體發(fā)生一系列的快速生理變化（Koolhaas et al.，2011）。因此，研究運(yùn)輸脅迫因子對(duì)魚類免疫及代謝能力的影響，對(duì)確定最適運(yùn)輸方式及評(píng)估魚苗放養(yǎng)存活率等具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】關(guān)于水產(chǎn)活體運(yùn)輸，至今已有諸多學(xué)者開展了相關(guān)研究，尤其是運(yùn)輸后魚體血清和組織中皮質(zhì)醇、血糖、乳酸及游離脂肪酸等的變化情況（Urbinati et al.，2004；洪磊和張秀梅，2005；Boerrigter et al.，2015；Honryo et al.，2018）。Barton等（2003）研究了玻璃梭鱸幼魚在捕撈、運(yùn)輸及放流過程中血漿皮質(zhì)醇和氯化物的應(yīng)激反應(yīng)；Urbinati等（2004）研究了頭石脂鯉幼魚在裝卸及不同密度運(yùn)輸后皮質(zhì)醇和血糖等生理指標(biāo)的變化情況；洪磊和張秀梅（2005）研究發(fā)現(xiàn)，停食24 h后的許氏平鮋和花鱸經(jīng)運(yùn)輸船運(yùn)輸后裝入雙層充氣塑料袋再以汽車運(yùn)輸，二者的血糖含量均呈上升趨勢(shì)；彭士明等（2011）研究表明，銀鯧幼魚在4、8和16 g/L的運(yùn)輸密度下運(yùn)輸12 h后，其血清皮質(zhì)醇、血糖和肌肉乳酸含量均顯著升高，但肝臟和肌肉組織中的糖元含量顯著降低；寇祥明等（2012）以克氏原螯蝦苗為研究對(duì)象，開展了不同鹽度條件下運(yùn)輸模擬試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在運(yùn)輸時(shí)間相同和同等鹽度條件下，NaCl組的運(yùn)輸效果優(yōu)于Na2SO4組；孫鵬等（2014）研究表明，日本黃姑魚經(jīng)箱式貨車（60 km/h）連續(xù)運(yùn)輸6 h，其肝臟中超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）活力快速升高并顯著高于運(yùn)輸前，之后逐漸下降恢復(fù)到正常水平，同時(shí)證實(shí)SOD和CAT可作為有效的生物指示劑用于脅迫狀態(tài)檢測(cè)；Tacchi等（2015）研究表明，虹鱒的皮膚及皮膚微生物在運(yùn)輸應(yīng)激期間發(fā)生了重要的生理反應(yīng)，即活體運(yùn)輸前必須檢測(cè)魚體皮膚的健康情況，運(yùn)輸過程中則需關(guān)注其體色變化情況；Honryo等（2018）研究表明，運(yùn)輸后前3 d是金槍魚魚苗運(yùn)輸脅迫恢復(fù)的關(guān)鍵時(shí)期，有必要采取適當(dāng)?shù)募夹g(shù)管理手段以減少死亡率?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】黑鯛又名黑棘鯛（Sparus inacrocephalus），俗稱海鮒、青郎、烏頰、牛屎鱲、烏翅、黑加吉、海鯽、銅盆魚等，其肉質(zhì)鮮美，營養(yǎng)豐富，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，是我國沿海地區(qū)重要的增殖放流和養(yǎng)殖品種，但至今未見運(yùn)輸脅迫對(duì)黑鯛魚苗影響的相關(guān)研究報(bào)道。【擬解決的關(guān)鍵問題】以黑鯛魚苗為研究對(duì)象，采取塑料袋密封充氧運(yùn)輸方式，對(duì)比不同密度運(yùn)輸后黑鯛幼魚鰓絲Na+/K+-ATPase酶（NKA）和肝臟SOD、CAT、LDH活性及總蛋白（TP）、丙二醛（MDA）含量的變化，篩選出適宜的運(yùn)輸密度，為黑鯛科學(xué)運(yùn)輸提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

黑鯛魚苗購自廣東大亞灣南澳養(yǎng)殖場(chǎng)，選取健康活潑的魚苗共490尾，其體長9.0～11.7 cm，平均10.9±1.0 cm，體質(zhì)量10.5～20.7 g/尾，平均18.2±3.8 g/尾。采用養(yǎng)殖生產(chǎn)和增殖放流中常用的塑料袋密封充氧運(yùn)輸方式，運(yùn)輸用透明塑料袋規(guī)格長50 cm、寬30 cm（未充氧時(shí)），每袋裝入育苗池海水4400 mL（水溫27.7 ℃，鹽度27‰，pH 8.04）。

1. 2 模擬運(yùn)輸試驗(yàn)

共設(shè)5個(gè)密度組（D1、D2、D3、D4和D5），即每袋對(duì)應(yīng)裝入黑鯛魚苗10、15、20、25和30尾，每組設(shè)3個(gè)平行。每袋充氧至飽和后立即用塑料圈封閉，試驗(yàn)過程中每30 min晃動(dòng)3下以便氧氣與海水混合。黑鯛魚苗裝袋后用別克商務(wù)車運(yùn)輸，運(yùn)輸過程中調(diào)節(jié)車內(nèi)溫度保持27.0 ℃。運(yùn)輸起點(diǎn)為大亞灣南澳養(yǎng)殖場(chǎng)，終點(diǎn)為中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所深圳試驗(yàn)基地，運(yùn)輸時(shí)間2 h 45 min，全程禁食。運(yùn)輸結(jié)束后，將各密度組魚苗分別暫養(yǎng)于可控溫暫養(yǎng)池（水溫27.0 ℃，鹽度29‰，pH 8.00）的不同網(wǎng)箱內(nèi)。

1. 3 樣品采集與檢測(cè)分析

分別在運(yùn)輸結(jié)束后的0、6、12、24和48 h共5個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣，同時(shí)從廣東大亞灣南澳養(yǎng)殖場(chǎng)育苗池隨機(jī)采集9尾黑鯛魚苗為對(duì)照。樣品魚置于碎冰上快速解剖取其鰓絲和肝臟組織，以電子天平稱重，按1∶9（g/mL）比例加入9倍的0.86%生理鹽水，液氮研磨，2500 r/min離心10 min，收集上清液，-80 ℃保存。鰓絲NKA活性及肝臟TP含量、MDA含量、SOD活性、CAT活性和LDH活性均采用南京建成生物工程研究所研發(fā)的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)分析。

1. 4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并以SPSS 19.0中的Duncans進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2. 1 密度脅迫運(yùn)輸后黑鯛魚苗的存活率

從大亞灣南澳養(yǎng)殖場(chǎng)運(yùn)輸至中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所深圳試驗(yàn)基地，運(yùn)輸時(shí)間2 h 45 min，不同密度組的黑鯛魚苗存活率均為100%，運(yùn)輸后恢復(fù)48 h的存活率仍為100%。

2. 2 密度脅迫運(yùn)輸后黑鯛魚苗鰓絲組織中的NKA活性

經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸2 h 45 min后，各密度組黑鯛魚苗鰓絲組織中的NKA活性隨時(shí)間推移呈波動(dòng)性變化，且低密度組的酶活性整體上高于高密度組。運(yùn)輸后0 h，各密度組的NKA活性均顯著低于對(duì)照組（P<0.05，下同），且低密度組的NKA活性高于高密度組；恢復(fù)12 h后各密度組的NKA活性均達(dá)到峰值，恢復(fù)24 h后各密度組的酶活性降至最低水平，但在恢復(fù)48 h后各密度組的NKA活性呈緩慢回升趨勢(shì)，其中，D1、D2和D3組基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平（圖1）。

2. 3 密度脅迫運(yùn)輸后黑鯛魚苗肝臟組織中各指標(biāo)的變化規(guī)律

2. 3. 1 SOD活性 經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，各密度組黑鯛魚苗肝臟組織中的SOD活性整體上顯著高于運(yùn)輸前水平，且密度脅迫與SOD活性呈負(fù)相關(guān)。運(yùn)輸后0 h，各密度組的SOD活性顯著高于對(duì)照組；恢復(fù)12 h后各密度組的SOD活性達(dá)到峰值，此后SOD活性緩慢降低，至恢復(fù)48 h后，D1～D4組的SOD活性仍顯著高于對(duì)照組，而D5組的SOD活性顯著低于對(duì)照組（圖2）。

2. 3. 2 CAT活性 經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，各密度組黑鯛魚苗肝臟組織中的CAT活性呈波動(dòng)性變化，且低密度組的CAT活性高于高密度組。運(yùn)輸后0 h，各密度組的CAT活性顯著高于運(yùn)輸前水平，其中，D1和D2組的CAT活性顯著高于其他密度組，D4和D5組的CAT活性相近；恢復(fù)12 h后各密度組的CAT活性達(dá)最高值，隨后緩慢下降；恢復(fù)48 h后，D1和D2組的CAT活性仍顯著高于運(yùn)輸前水平，D3和D4組的CAT活性基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平，D5組的CAT活性則顯著低于運(yùn)輸前水平（圖3）。

2. 3. 3 MDA含量 經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，各密度組黑鯛魚苗肝臟組織中的MDA含量整體上呈先增后降的變化趨勢(shì)，且MDA含量與密度呈正相關(guān)，高密度組的MDA含量波動(dòng)明顯大于低密度組。運(yùn)輸后0 h，D1和D2組的MDA含量略高于運(yùn)輸前水平，但差異不顯著（P>0.05），D5組MDA含量則顯著高于對(duì)照組；除D1組外其他密度組的MDA含量均在恢復(fù)6 h后達(dá)到峰值，隨后緩慢下降；恢復(fù)48 h后D1、D2、D3和D4組的MDA含量基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平，而D5組的MDA含量顯著高于運(yùn)輸前水平（圖4）。

2. 3. 4 TP含量 經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，各密度組黑鯛魚苗肝臟組織中的TP含量均低于對(duì)照組，且低密度組的TP含量高于高密度組。各密度組的TP含量隨時(shí)間推移呈輕微波動(dòng)性變化。運(yùn)輸后0 h，D1和D2組的TP含量相近，但顯著高于其他密度組；恢復(fù)6～24 h，各密度組的TP含量有輕微波動(dòng)，但在恢復(fù)48 h后，各密度組的TP含量均顯著升高，其中，D1組的TP含量基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平，其他密度組的TP含量仍顯著低于對(duì)照組（圖5）。

2. 3. 5 LDH活性 經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，各密度組黑鯛魚苗肝臟組織中的LDH活性隨時(shí)間推移的趨勢(shì)各不相同，D1、D2和D3組的LDH活性整體上呈逐漸降低趨勢(shì)，D4和D5組的LDH活性則呈先增后降的變化趨勢(shì)。運(yùn)輸后0 h，各密度組的LDH活性均顯著高于對(duì)照組，且低密度組的LDH活性高于高密度組；恢復(fù)12 h后，D4和D5組的LDH活性達(dá)最高值；恢復(fù)48 h后，D1和D2組的LDH活性基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平，D3、D4和D5組的LDH活性仍顯著高于對(duì)照組（圖6）。

3 討論

3. 1 密度脅迫運(yùn)輸對(duì)黑鯛魚苗鰓絲組織中NKA活性的影響

NKA鑲嵌在細(xì)胞膜類脂雙分子層中，是一種具有腺苷酸三磷酸酶活性的特異蛋白質(zhì)，其在離子平衡、能量代謝、物質(zhì)運(yùn)送、氧化磷酸化和維持細(xì)胞膜完整性等方面發(fā)揮重要作用，被認(rèn)為是評(píng)價(jià)機(jī)體對(duì)外界脅迫敏感性的重要生物酶之一（王維娜等，2004；譚樹華等，2007；蘇慧等，2012）。由于NKA在魚類鰓組織中保持較高活力，便于啟動(dòng)膜蛋白運(yùn)輸及離子通道以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境（滲透壓調(diào)節(jié)和離子平衡），因此鰓組織是魚類最主要的NKA活力器官（Evans et al.，2005；Yang et al.，2009）。已有研究表明，環(huán)境突變引起的滲透壓改變，能促使機(jī)體新陳代謝變化，NKA被激活，直至滲透壓趨于平衡（He et al.，2009）。例如，史氏鱘和條石鯛為適應(yīng)外界環(huán)境的變化，其鰓組織NKA活性調(diào)節(jié)分為3個(gè)階段，即應(yīng)激反應(yīng)階段、主動(dòng)調(diào)節(jié)階段和適應(yīng)階段（趙峰等，2006；孫鵬等，2014）。本研究結(jié)果表明，經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，各密度組黑鯛魚苗鰓組織中的NKA活性顯著降低，但恢復(fù)12 h后各密度組的NKA活性均達(dá)峰值，恢復(fù)24 h后各密度組的酶活性又降至最低水平，與趙峰等（2006）的研究結(jié)論相同?；謴?fù)前期鰓組織中NKA活性降低，可能是處于應(yīng)激反應(yīng)階段，密度脅迫運(yùn)輸后的黑鯛魚苗呼吸頻率變慢致使細(xì)胞膜的通透性受抑制而阻止過多離子滲透，呈被動(dòng)式滲透壓調(diào)整（Rodríguez et al.，2002）；而后隨著機(jī)體的恢復(fù)，NKA活性不斷提高，離子外排機(jī)制激活，黑鯛開始主動(dòng)調(diào)節(jié)滲透壓；恢復(fù)48 h后，D1、D2和D3組NKA活性基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平，說明機(jī)體調(diào)節(jié)基本維持了魚體內(nèi)外的滲透平衡。

3. 2 密度脅迫運(yùn)輸對(duì)黑鯛魚苗肝臟組織中SOD和CAT活性的影響

研究SOD和CAT的動(dòng)態(tài)變化可推測(cè)出機(jī)體體內(nèi)自由基的代謝及組織的氧化損傷程度，對(duì)判斷機(jī)體免疫防御能力具有重要意義（洪美玲等，2007）。SOD和CAT作為生物體內(nèi)的主要抗氧化酶，SOD將機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的活性氧自由基（ROS）分解成H2O2，CAT則將H2O2還原成氧分子和水，從而維持細(xì)胞或機(jī)體的正常生理活動(dòng)（Parihar et al.，1997）。本研究結(jié)果表明，經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，各密度組黑鯛魚苗肝臟組織中的SOD和CAT活性均高于運(yùn)輸前水平，是由于運(yùn)輸密度脅迫造成黑鯛魚苗體內(nèi)ROS過量產(chǎn)生，進(jìn)而誘發(fā)抗氧化酶活性增強(qiáng)（李效宇等，2003）；恢復(fù)12 h后SOD和CAT活性達(dá)到峰值，與謝明媚等（2015）對(duì)銀鯧幼魚脅迫處理后的研究結(jié)果相似；而后逐漸降低，恢復(fù)48 h后，D1和D2組的SOD和CAT活性仍顯著高于運(yùn)輸前水平，D5組的SOD和CAT活性則顯著低于運(yùn)輸前水平。說明低密度組黑鯛魚苗能通過機(jī)體產(chǎn)生的SOD和CAT及時(shí)清除脅迫產(chǎn)生的自由基，從而維持正常的生理代謝；但高密度組由于受密度脅迫運(yùn)輸?shù)挠绊戄^大，其機(jī)體內(nèi)積累大量自由基而造成機(jī)體損傷，致使其抗氧化能力下降（陳成勛等，2011）。

3. 3 密度脅迫運(yùn)輸對(duì)黑鯛魚苗肝臟組織中MDA含量的影響

MDA不僅是反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化程度的指標(biāo)，還能表征細(xì)胞膜的受損程度（陳海剛等，2009）。本研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)塑料袋充氧密封運(yùn)輸后，D1和D2組黑鯛魚苗肝臟組織中的MDA含量與對(duì)照組接近，隨著恢復(fù)時(shí)間的推移，其變化程度較緩且在恢復(fù)48 h后基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平，與謝明媚等（2015）研究報(bào)道的急性溫度脅迫處理后銀鯧幼魚的變化規(guī)律相似。說明D1和D2組黑鯛魚苗受密度脅迫運(yùn)輸產(chǎn)生的自由基能夠被體內(nèi)的SOD和CAT及時(shí)清除，有效維持抗氧化系統(tǒng)的平衡。除D1組外其他密度組的MDA含量均在恢復(fù)6 h后達(dá)峰值，隨后逐步下降；恢復(fù)48 h后，D3組的MDA含量基本與運(yùn)輸前水平一致，而D5組的MDA含量顯著高于運(yùn)輸前水平。說明黑鯛魚苗受密度脅迫影響較大時(shí)，機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的過量自由基打破了原有的氧化平衡，進(jìn)而引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)（馮連華，2012）。

3. 4 密度脅迫運(yùn)輸對(duì)黑鯛魚苗肝臟組織中TP含量的影響

魚類的主要能量來源有糖類、脂肪和蛋白質(zhì)，當(dāng)魚類面臨環(huán)境脅迫時(shí)，體內(nèi)能量代謝發(fā)生的主要變化包括：血糖和血液乳酸含量增高，肝糖原加速消耗，游離脂肪酸含量發(fā)生變化，蛋白質(zhì)分解加快（周玉等，2001；馮廣朋等，2010）。由于應(yīng)激狀態(tài)下魚類需要更多地動(dòng)用自身儲(chǔ)存的能量，當(dāng)機(jī)體體內(nèi)的糖類和脂肪含量較低時(shí)，蛋白質(zhì)通過一系列生化分解后進(jìn)入血液為各組織器官供能（錢云霞等，2002）。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，密度脅迫運(yùn)輸后黑鯛魚苗肝臟組織中的TP含量顯著低于運(yùn)輸前水平，且低密度組的TP含量高于高密度組。錢云霞等（2002）研究表明，饑餓脅迫下的鱸魚體內(nèi)TP含量隨饑餓時(shí)間延長而下降；賽娜和宋凱（2011）研究表明，溫度偏高或偏低均會(huì)使中華鱘魚體內(nèi)TP含量下降，運(yùn)輸脅迫后牙鲆TP含量也呈降低趨勢(shì)。說明密度脅迫運(yùn)輸會(huì)促使黑鯛魚苗處于應(yīng)激狀態(tài)，且對(duì)其免疫機(jī)能造成一定影響?；謴?fù)48 h后，除D1組的TP含量基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平外，其他密度組的TP含量仍顯著低于運(yùn)輸前水平，尤其是D5組的黑鯛魚苗可能因密度脅迫影響較大，致使其能量分解代謝加快，而導(dǎo)致TP含量一直保持在較低水平。

3. 5 密度脅迫運(yùn)輸對(duì)黑鯛魚苗肝臟組織中LDH活性的影響

LDH是糖酵解途徑與TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶，不僅與細(xì)胞代謝關(guān)系密切，還可通過催化丙酮酸和乳酸直接轉(zhuǎn)化產(chǎn)生能量（Valarmathi and Azariah，2003；Abdelmohsen，2012）。LDH活性從根本上取決于細(xì)胞內(nèi)氧分壓的高低，氧分壓降低時(shí)，LDH合成加快且活力增強(qiáng)，因此可作為一種衡量無氧代謝水平的指標(biāo)（趙偉民等，2011）。當(dāng)機(jī)體組織器官發(fā)生病變時(shí)，其自身的LDH也會(huì)發(fā)生變化，即LDH在評(píng)價(jià)魚類健康方面具有重要意義（毛瑞鑫等，2009）。經(jīng)鉛暴露脅迫處理后中華鱘幼魚體內(nèi)的LDH活性升高且隨脅迫的增加而增強(qiáng)（章龍珍等，2010）。本研究結(jié)果表明，經(jīng)密度脅迫運(yùn)輸后，D1、D2和D3組黑鯛魚苗肝臟組織中的LDH活性在恢復(fù)期整體上呈逐漸降低趨勢(shì)，恢復(fù)48 h后，D1和D2組的LDH活性基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平。運(yùn)輸后各密度組的LDH活性升高表明密度脅迫運(yùn)輸增加了魚體的游動(dòng)，以此調(diào)節(jié)適應(yīng)環(huán)境變化和維持生命代謝比例的增加，脅迫處理期間無氧呼吸增加（李佳凱等，2015）。LDH從肝胰臟攜帶膽固醇輸送到周圍血管，其活性增強(qiáng)時(shí)可造成過多的膽固醇存積在血管壁上，引起動(dòng)脈粥樣硬化，即過高的LDH不利于健康（李彥明等，2008）。由此推測(cè)，D4和D5組黑鯛魚苗肝臟組織受損較嚴(yán)重。

4 結(jié)論

密度脅迫對(duì)黑鯛魚苗運(yùn)輸存活率無明顯影響，但其免疫酶活性及代謝能力均受影響，需在運(yùn)輸后暫養(yǎng)48 h才開始或基本恢復(fù)到運(yùn)輸前水平。在實(shí)際生產(chǎn)中，采用塑料袋充氧密封運(yùn)輸且運(yùn)輸時(shí)間不超過3 h時(shí)，以每袋裝20～25尾9.0～11.7 cm的黑鯛魚苗為宜。

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（責(zé)任編輯 蘭宗寶）