程金生，黃靖瑜，萬維宏，陳楚茹，黎嘉珠，郭淑儀

(韶關(guān)學(xué)院英東食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東韶關(guān) 512005)

金櫻子(RosalaevigataMichx)屬薔薇科薔薇屬植物，又名糖缽、刺梨、糖罐子、野石榴、白玉帶、下山虎、刺藤棘、刺螂子樹、螳螂子樹等，在歷代醫(yī)書及本草如《蜀本草》《雷公炮炙論》《開寶本草》《夢(mèng)溪筆談》《本草綱目》《植物名實(shí)圖考長編》等均有記載，其果實(shí)、花、葉和根均入藥，用藥最多部位為果實(shí)，味酸、甘，性平， 用于治療腎虛尿頻、帶下、脾虛泄瀉等癥[1]。金櫻子廣泛分布于我國廣東、廣西、湖南、江西、福建、浙江等南方諸省，民間利用已有上千年，也是原國家衛(wèi)生部公布的88種藥食同源資源之一[2-5]，符合現(xiàn)代健康理念，具有重要的開發(fā)價(jià)值。

金櫻子種核為金櫻子果實(shí)空腔內(nèi)若干棕色粒狀物，形狀類壓扁的腎形。國內(nèi)外針對(duì)金櫻子的相關(guān)研究主要圍繞金櫻子去核果肉、根或葉等部位[6-8]，而對(duì)位于空腔內(nèi)的種核相關(guān)研究較少，尤其是對(duì)金櫻子種核的微觀結(jié)構(gòu)研究目前鮮見報(bào)道。筆者通過掃描電鏡(scanning electron microscope，SEM)觀察了金櫻子種核微觀結(jié)構(gòu)，并通過GC-MS分析了金櫻子種核中脂溶性活性成分[9]，為金櫻子種核綜合利用提供借鑒。

1 材料與方法

1.1試驗(yàn)試劑所用試劑除特殊說明外，均為分析純，購自阿拉丁上海有限公司；試驗(yàn)用水為蒸餾水。金櫻子為廣東省韶關(guān)市曲江區(qū)大塘鎮(zhèn)附近山區(qū)采集。

1.2金櫻子微觀結(jié)構(gòu)的表征在日立臺(tái)式電鏡TM3030上進(jìn)行的，放大倍率：×15～60 000；設(shè)定觀察條件：5 kV/15 kV/EDX；觀察模式：標(biāo)準(zhǔn)模式、減電荷模式；檢測(cè)器：高靈敏度半導(dǎo)體四分割BSE探測(cè)器；電子槍：預(yù)對(duì)中燈絲。

1.3色譜條件GC-MS選用美國Agilent6890-5973型氣相色譜聯(lián)用儀，通過分析不同組分保留時(shí)間和質(zhì)譜碎片，得到金櫻子種核中脂溶性活性物質(zhì)含量信息。色譜柱為HP-5MS石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；程序升溫：從室溫25 ℃以10 ℃/min 升溫至85 ℃，再以10 ℃/min 升溫至180 ℃，最后以5 ℃/min 升溫至250 ℃(保持5 min)；進(jìn)樣口和檢測(cè)器(FID)溫度均為250 ℃；分流比：30∶1；柱流量1 mL/min，載氣為高純氮?dú)?；質(zhì)譜條件為：高純氦氣，EI離子源，電離電壓70 eV；離子源溫度250 ℃，傳輸線溫度250 ℃；掃描范圍40～500 amu；柱流量1.0 mL/min；質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)庫：Nist譜圖庫。

1.4金櫻子種核萃取工藝采摘秋季新鮮的金櫻子，采用電子秤稱重；按照《中華人民共和國藥典》(2015年版)[10]要求進(jìn)行優(yōu)選，除去質(zhì)量較差金櫻子；優(yōu)選出的金櫻子必須符合無霉變、無異味、無雜質(zhì)；將優(yōu)選出的金櫻子洗凈后，真空干燥，用多功能粉碎機(jī)粉碎：先將切片機(jī)的刀調(diào)到最大限度,將金櫻子送入,將切制后的金櫻子篩去絨毛,再倒入清水中淘洗沉種核,撈出，40 ℃下恒溫烘干48 h。將烘干的金櫻子種核利用潔凈布袋強(qiáng)力搗碎，隨后再在中藥細(xì)粉機(jī)上進(jìn)一步粉碎，制成金櫻子種核干粉，用40目篩子過篩，得篩選后的金櫻子種核干粉。取粉碎后的金櫻子種核粉末75 g；加入無水甲醇300 mL，利用索氏提取器回流提取5～6 h，過濾得提取液A；過濾后的殘?jiān)尤?00 mL無水甲醇，在40～60 ℃下于超聲波功率為80 W的超聲波儀中超聲時(shí)間2 h，得提取液B;合并提取液A和B，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇溶劑，得到黏稠的金櫻子種核萃取物，隨后將該萃取物在40 ℃下真空干燥12 h得最終萃取物。

2 結(jié)果與分析

2.1金櫻子種核微觀結(jié)構(gòu)研究應(yīng)用高分辨日立臺(tái)式電鏡對(duì)簡單分離出的金櫻子種核(圖1)進(jìn)行微觀結(jié)構(gòu)觀察，結(jié)果見圖2。從圖2可以看出，金櫻子種核呈壓扁腎形(圖2a)，每枚種核約4.0 mm×2.5 mm。種核表面無光澤，有一系列細(xì)小縱向褶皺(圖2b中內(nèi)嵌圖)。種核表面密布長度不同的細(xì)長茸毛，每枚種核分布有茸毛約數(shù)十枚(圖2b)，茸毛長度1.0～1.5 mm(圖2c)。進(jìn)一步放大圖顯示，金櫻子茸毛易折斷，末端尖細(xì)。與種核母體相連部分粗壯，直徑約50 μm，且越向外伸展直徑越小(圖2d)。上述微觀形貌特征可用于金櫻子種核鑒別。

注：中間棕色粒狀物即為金櫻子種核Note:The middle brown granule is the seed nucleus of Rosa laevigata Michx圖1 金櫻子果實(shí)Fig.1 Fruit of Rosa laevigata Michx

注：a.完整種核；b.種核局部；c.種核表面茸毛；d.種核茸毛放大圖Note:a.Complete seed nucleus; b.Local seed nucleus; c.Seed nucleus surface hair; d.Magnified view of the seed nucleus hair圖2 金櫻子種核掃描電鏡Fig.2 SEM image of seed nucleus of Rosa laevigata Michx

2.2金櫻子種核活性物質(zhì)GC-MS分析按照“1.4”方法所述工藝制備金櫻子種核萃取物，選用美國Agilent6890-5973型氣相色譜聯(lián)用儀，應(yīng)用HP-5MS石英毛細(xì)管色譜柱，通過分析不同組分保留時(shí)間和質(zhì)譜碎片，得到金櫻子種核中脂溶性活性物質(zhì)含量信息。按“1.3”色譜條件下得到的金櫻子種核GC-MS分析總離子流圖(圖3)，共計(jì)32個(gè)成分被積分得到。應(yīng)用美國Nist質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫的質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算機(jī)檢索比對(duì)，并進(jìn)行人工圖譜解析，19個(gè)主要成分得到鑒定，其中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高的有亞油酸(25.23%)、油酸(11.67%)、α-亞麻酸(10.51%)、8,10-二甲氧基十八烷酸(8.76%)、棕櫚酸(7.91%)、10,15-二甲氧基花生酸(5.49%)、三十一烷(2.14%)等，未鑒定成分中無含量較高成分，鑒定結(jié)果見表1。

圖3 GC-MS檢測(cè)金櫻子果核中脂溶性活性成分總離子圖Fig.3 Total ion chromatogram of GC-MS analysis of liposoluble components in seed nucleus of Rosa laevigata Michx

Table1GC-MSanalysisofliposolublecomponentsinseednucleusofRosalaevigataMichx

序號(hào)No.保留時(shí)間Retention timemin化合物名稱Compound name相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)Relative mass fraction%16.93己醛 0.71210.17(Z)-2-庚烯醛0.46313.611-辛醇0.29415.71 十二烷0.51518.32十六烷0.63622.84肉豆蔻醛0.32729.38棕櫚酸7.91830.56亞油酸25.23930.74α-亞麻酸10.51 1031.82油酸11.671131.97硬脂酸2.911232.298,11-二甲氧基十八烷酸1.241334.818,10-二甲氧基十八烷酸8.761435.62花生酸1.121536.9310,15-二甲氧基花生酸5.491640.20二十烷酸0.321745.22二十七烷0.871848.35(Z)-9,17-十八二烯酸1.891954.55三十一烷2.14合計(jì) 82.98

金櫻子種核中，不飽和脂肪酸如亞油酸、α-亞麻酸等不飽和脂肪酸含量豐富，顯示該種核有很高的營養(yǎng)價(jià)值。但值得注意的，金櫻子種核中也存在(Z)-2-庚烯醛、己醛、肉豆蔻醛等一些有毒醛類物質(zhì)，在開發(fā)利用金櫻子種核時(shí)有必要進(jìn)行適當(dāng)前處理，除去有毒性醛類物質(zhì)。

3 結(jié)論

該研究通過臺(tái)式掃描電鏡觀察了金櫻子種核微觀結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)金櫻子種核呈壓扁腎形，每枚種核約4.0 mm×2.5 mm，種核表面無光澤，有細(xì)小縱向褶皺。種核邊緣密布長度不同的細(xì)長茸毛，茸毛長度1.0～1.5 mm。GC-MS分析顯示，金櫻子種核中含有19種主要活性成分，其中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高的有亞油酸(25.23%)、油酸(11.67%)、α-亞麻酸(10.51%)、8,10-二甲氧基十八烷酸(8.76%)、棕櫚酸(7.91%)、10,15-二甲氧基花生酸(5.49%)等。研究結(jié)果表明，金櫻子種核中，亞油酸、α-亞麻酸等不飽和脂肪酸豐富，僅人體不能合成的亞油酸含量就高達(dá)25.23%，顯示金櫻子種核有較高的營養(yǎng)價(jià)值，有望應(yīng)用于化妝品、醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域。該研究相關(guān)數(shù)據(jù)有望為金櫻子種核顯微鑒別及綜合利用提供一定借鑒。