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人參縮心飲對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄致大鼠心肌肥厚的影響

2018-08-22 09:36:26治丁銘高子任
關(guān)鍵詞:前壁室間隔膠原

治丁銘,高子任

(1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院,長(zhǎng)春 130117;2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院,北京 100091)

心力衰竭是各種心血管疾病發(fā)展的終末階段,由 于心臟長(zhǎng)時(shí)間處于重負(fù)荷下,使其心肌細(xì)胞大部分損害,心肌收縮功能嚴(yán)重減退,最后導(dǎo)致心功能不全[1-4]。本實(shí)驗(yàn)采用結(jié)扎腹主動(dòng)脈方法建立壓力負(fù)荷性心肌肥厚模型[5],觀察大鼠的血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)、左室前壁及室間隔厚度、左心室膠原含量及心肌間質(zhì)膠原容積的變化,從而探討人參縮心飲對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄致大鼠心肌肥厚的影響。旨在為臨床研制出防治心力衰竭的有效藥物提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 動(dòng)物 :120只Wistar大鼠,雌雄各半,鼠齡約8個(gè)月,體質(zhì)量180~200 g,由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。藥物 :人參縮心飲(人參15 g,川芎15 g,丹參25 g,白術(shù)20 g,遠(yuǎn)志15 g,香加皮5 g,水紅子20 g,葶藶子30 g,白茅根30 g,甘草15 g),卡托普利片。試劑 :乙醇,氯化鈉注射液,水合氯醛,肝素鈉注射液。儀器 :多道生理記錄儀(RM-6000),生物顯微鏡,制冰機(jī)(SIM-F140),電子分析天平(ALC-10.4),電熱恒溫水溫箱(DR-HW-1)。

1.2 方法

1.2.1 分組 將Wistar大鼠120只按體質(zhì)量及性別隨機(jī)分為6組,即對(duì)照組、模型組、卡托普利組、人參縮心飲低、中、高劑量組,每組20只,雌雄各半。

1.2.2 給藥方法 對(duì)照組給予蒸餾水,模型組給予生理鹽水,卡托普利組給予5%卡托普利片,人參縮心飲低、中、高劑量組分別給予5%、10%、20% 人參縮心飲。

1.2.3 模型建立 Wistar大鼠腹腔注射麻醉(水合氯醛300 mg/kg),打開(kāi)腹腔并找到腎動(dòng)脈分支,鈍性分離腹主動(dòng)脈,將6號(hào)注射針頭(去尖,直徑0.6 mm)與腹主動(dòng)脈平行后用5號(hào)醫(yī)用絲線結(jié)扎,抽出針頭,飼養(yǎng)6周,建立壓力負(fù)荷性心肌肥厚模型。對(duì)照組僅分離腹主動(dòng)脈但不結(jié)扎。手術(shù)后第6周起,各組大鼠按上述實(shí)驗(yàn)分組給予不同藥物,連續(xù)給藥2周。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 選用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,統(tǒng)計(jì)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間比較進(jìn)行t檢驗(yàn),多組間均數(shù)比較采用χ2分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠心率、收縮壓、舒張壓及平均動(dòng)脈壓變化比較 見(jiàn)表1。

1.2.4 血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的測(cè)定 將大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉(300 mg/kg),待大鼠麻醉后,仰臥固定,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈插入直徑已充滿肝素的心導(dǎo)管,換能器連接RM-6000型多道生理記錄儀,穩(wěn)定后記錄左頸總收縮壓、舒張壓及平均動(dòng)脈壓,然后繼續(xù)緩慢推進(jìn),當(dāng)波型提示心導(dǎo)管已經(jīng)進(jìn)入左心室時(shí)停止推進(jìn),記錄心率、左室收縮峰壓、左室舒張末壓、室內(nèi)壓最大上升速率及室內(nèi)壓最大下降速率。

1.2.5 左室前壁及室間隔厚度測(cè)定 各組大鼠分別取心肌組織,加入福爾馬林固定,石蠟包埋、切片。鏡下觀察左心室形態(tài)后,通過(guò)專業(yè)圖像分析軟件測(cè)量心室前壁厚度及室間隔厚度。

1.2.6 左心室膠原含量測(cè)定 各組大鼠分別稱取左心室組織,制備2%組織勻漿,以測(cè)定組織勻漿中總蛋白含量,以總蛋白含量(mg)/組織(mg)表示;各組大鼠分別稱取左心室組織,制備10%大鼠心肌組織勻漿,用于測(cè)定心肌組織勻漿中羥脯氨酸含量,分別以μg/mg蛋白和μg/mg組織表示。

1.2.7 心肌間質(zhì)膠原容積分?jǐn)?shù)測(cè)定 各組大鼠取左心室赤道面組織,福爾馬林液中固定,然后石蠟包埋切片,切片厚度4 μm,進(jìn)行天狼星紅染色。在偏光顯微鏡下,選擇切片中血管以外的區(qū)域觀察膠原著色,通過(guò)Image-ProPlus 1.4圖像分析軟件測(cè)定心肌間質(zhì)膠原面積,以單位測(cè)量面積中的膠原所占百分比表示間質(zhì)膠原容積分?jǐn)?shù)。

表1 各組大鼠心率、收縮壓、舒張壓及平均動(dòng)脈壓變化比較(x± s ,n = 20)

2.2 各組大鼠左室收縮峰壓、左室舒張末壓、室內(nèi)壓最大上升速率、室內(nèi)壓最大下降速率變化比較 見(jiàn)表2。

2.3 各組大鼠左心室膠原含量變化比較 見(jiàn)表3。

表2 各組大鼠左室收縮峰壓、左室舒張末壓、室內(nèi)壓最大上升速率、室內(nèi)壓最大下降速率變化比較(x± s,n = 20)

表3 各組大鼠左心室膠原含量變化比較(x± s ,n = 20)

2.4 各組大鼠左室前壁及室間隔厚度變化比較 見(jiàn)表4。

表4 各組大鼠左室前壁及室間隔厚度變化比較(x± s,n = 20) mm

2.5 各組大鼠心肌間質(zhì)膠原容積分?jǐn)?shù)變化比較 見(jiàn)表5。

表5 各組大鼠心肌間質(zhì)膠原容積分?jǐn)?shù)變化比較(x ± s,n = 20) 分

3 小結(jié)

人參縮心飲共10味藥,人參大補(bǔ)元?dú)猓芯让摲鑫V?,?duì)心力衰竭、心源性休克都有較好的療效,故為方中君藥;川芎、丹參共為臣藥,共奏活血行氣之功,加強(qiáng)活血化瘀之力;香加皮、葶藶子、水紅子、白茅根、白術(shù),上5味藥均有利水消腫之功,對(duì)于治療心衰所致的水腫氣喘有較好的療效,炙遠(yuǎn)志有寧心安神之功,上6味共為佐藥;炙甘草能補(bǔ)心氣,治療心氣虛之癥,又能調(diào)和藥性,調(diào)和脾胃,在方中為使藥。本方寒溫共用,補(bǔ)中有瀉,主要治療氣虛血瘀所致的心力衰竭,及其并發(fā)的水腫、喘咳等癥,臨床收到良好療效[6-8]。心肌肥厚是心臟適應(yīng)血流動(dòng)力學(xué)負(fù)荷的改變而發(fā)生的增生,血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)是機(jī)體的重要功能表現(xiàn)之一[9]。在本實(shí)驗(yàn)中,給予人參縮心飲藥物治療后,中、高劑量組大鼠收縮壓、舒張壓、平均動(dòng)脈壓、左室收縮峰壓及室內(nèi)壓最大上升速率、室內(nèi)壓最大下降速率水平顯著升高,而心率及左室舒張末壓水平顯著降低。心肌肥厚的基本變化不僅是心肌細(xì)胞的肥大和增生,也有非心肌細(xì)胞如膠原細(xì)胞及蛋白質(zhì)等的生成、增殖與增生,伴有心室形態(tài)與結(jié)構(gòu)的改變和心肌機(jī)械功能的減退等[10-13]。藥物干預(yù)治療可通過(guò)降低了大鼠心室臟器系數(shù),進(jìn)而減少大鼠左室前壁及室間隔厚度,從而改善心肌肥大癥狀[14]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),中、高劑量人參縮心飲可明顯改善大鼠左室前壁及室間隔厚度。壓力超負(fù)荷左室重構(gòu)早期舒張功能的降低主要與心肌膠原增生和膠原類型比值的改變密切相關(guān)[12]。本研究結(jié)果表明,中、高劑量人參縮心飲可以有效減少大鼠左心室膠原含量和心肌間質(zhì)膠原容積分?jǐn)?shù)。

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