焦鑫 何思春 王利君 魏中華

自身免疫性疾?。ˋID）是由機(jī)體免疫效應(yīng)細(xì)胞或分子針對(duì)自身組織或細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答所引發(fā)的炎癥性疾病，患者以自身組織病理改變、器官功能障礙為主要臨床表現(xiàn)[1]。臨床診斷AID的重要標(biāo)準(zhǔn)即為檢出疾病特異性或自身有關(guān)性抗體，抗核抗體(antinuclear antibody, ANA)和抗核抗體譜（ANAs）檢測(cè)是用來篩查免疫性疾病的特殊檢查[2]。本文分析ANA和ANAs診斷AID的價(jià)值，利用ANA和ANAs特點(diǎn)做出早期診斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究已征得我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均知情同意并簽署知情同意書。將2015年1月至2017年10月187例AID患者及同期75名健康體檢者作為患者組、對(duì)照組，AID患者均參照相關(guān)國(guó)際學(xué)會(huì)診療指南明確診斷[3]，對(duì)照組均經(jīng)全面體格檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查及影像學(xué)檢查明確身體狀態(tài)良好?；颊呓M年齡5～81歲，平均（44.09±11.38）歲，男72例，女115例，AID類型：系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）75例，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）65例，干燥綜合征（SS）14例，特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）5例，混合性結(jié)締組織病（MCTD）19例，系統(tǒng)性硬化?。≒SS）9例。對(duì)照組年齡8～75歲，平均（46.21±10.95）歲，男31例，女44例。

表1 不同類型AID患者ANAs檢測(cè)結(jié)果（n/%）

1.2 檢測(cè)方法

抽取兩組受試者入組次日晨起空腹肘靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，以3500 r/min離心10 min，分離血清，使用間接免疫熒光法（IIF）檢測(cè)ANA，試劑盒購(gòu)自四川生物科技有限公司提供的賽盟免疫試劑，每次試驗(yàn)均設(shè)置陰性對(duì)照，嚴(yán)格按照試劑盒使用說明書開展各項(xiàng)操作，使用熒光顯微鏡觀察結(jié)果，以細(xì)胞或組織內(nèi)可見特異性熒光為陽性標(biāo)準(zhǔn)[4]，檢測(cè)按照1：100、1：320、1：1000、1：3200共4種滴度進(jìn)行分析，抗體滴度≥1：100視為陽性。使用線性免疫分析法（LIA）檢測(cè)ANAs，試劑盒購(gòu)自德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司，嚴(yán)格按照試劑盒使用說明書開展各項(xiàng)操作并判定結(jié)果，熒光顯微鏡下細(xì)胞或組織內(nèi)可見特異性熒光視為陽性[5]，可檢測(cè)12種不同抗體。

1.3 分析方法

比較患者組、對(duì)照組ANA、ANAs陽性率，分析患者組ANA核型及ANAs檢測(cè)結(jié)果，并對(duì)比ANA滴度與ANAs陽性率的關(guān)系，總結(jié)兩種指標(biāo)對(duì)AID的診斷價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0進(jìn)行分析，ANA陽性率、ANAs陽性率等計(jì)數(shù)資料以（n/%）表示，并采用χ2檢驗(yàn)，年齡以（x±s）表示，并采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

患者組ANA、ANAs陽性率分別為61.50%（115/187）、75.40%（141/187），對(duì)照組ANA、ANAs均為陰性，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。ANAs診斷準(zhǔn)確率高于ANA，ANA漏檢72例患者中25例ANAs陽性。

115例ANA陽性患者核型模式為熒光模式顆粒型占43.48%（50/115），細(xì)胞質(zhì)型占20.00%（23/115），著絲點(diǎn)型占13.91%（16/115），均質(zhì)型占8.70%（10/115），核周型占1.74%（2/115），其余12.17%（14/115）可見≥2種核型。

141例ANAs陽性患者中，單個(gè)抗體陽性占31.91%（45/141），其余68.08%（96/141）可見≥2種抗體陽性，見表1。

3 討論

在臨床診斷中，AID具有復(fù)雜性、多樣性等特征，且與多種感染性疾病、系統(tǒng)性疾病的特征具有相似性，故易漏診、誤診[6-7]。

ANA是一種存在多項(xiàng)細(xì)胞核組成成分的自身抗體組織，是以真核細(xì)胞和成分為靶抗原的一系列自身抗體的總稱，研究顯示，ANA在多種不同類型AID中可表現(xiàn)為不同程度的陽性率，且AID臨床癥狀發(fā)生前約10 d血清ANA即可產(chǎn)生陽性變化[8-9]。因此，ANA在SLE、PSS、SS、MCTD、RA等多種疾病中均有著較高的陽性率，能夠?yàn)榕R床診治提供一定參考[10]。本研究187例AID患者ANA陽性率為61.50%，患者ANA熒光模式以顆粒型、細(xì)胞質(zhì)型為主，亦可見著絲點(diǎn)型、均質(zhì)型等其他類型，說明ANA具有成分復(fù)雜的特點(diǎn)[11]。多篇文獻(xiàn)報(bào)道，隨著ANA滴度的增加，ANA陽性率亦呈上升趨勢(shì)， ANA滴度與AID患者疾病活動(dòng)度亦有著明顯相關(guān)性[12-13]。盡管ANA在AID篩查中有一定靈敏度，但單純根據(jù)ANA核型、滴度難以判斷AID類型，故較低的特異性使得ANA僅可作為AID的臨床初篩方法[14-15]。臨床中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)ANA陰性但ANAs并不為陰性樣本，本組患者中25例ANA漏診病例ANAs呈陽性。

近年來，LIA技術(shù)的成熟，使一次性檢測(cè)多種AID相關(guān)特異性自身抗體成為了可能。LIA自動(dòng)化操作、結(jié)果判讀方便且膜條結(jié)果可長(zhǎng)期保存[16]。在本次研究中， ANAs在器官特異性、種屬特異性方面較ANA有著更為明顯的優(yōu)勢(shì)，如SLE患者抗Sm陽性率為37.33%，而其他類型AID患者均為檢出抗Sm，說明抗Sm能夠作為SLE的特異性指標(biāo)，與過往報(bào)道一致[17]；同時(shí)，MCTD患者抗nRNP陽性檢出率為63.16%，且抗nRNP被認(rèn)為可指導(dǎo)結(jié)締組織病與非結(jié)締組織病的鑒別[18]，進(jìn)一步印證了ANAs在不同類型AID鑒別診斷中的理想?yún)⒖純r(jià)值。

綜上所述，ANA在AID的篩查中有著一定靈敏度，而ANAs能夠?yàn)锳ID類型的判斷提供一定參考，因ANAs抗體譜不完整，不能以ANAs代替ANA，應(yīng)在ANA初篩基礎(chǔ)上進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)。