張嫻靜，李林春，葉江雷，蘇 峰，徐慶生，林旭吟，黃鐘海

(1.廈門海洋職業(yè)技術(shù)學(xué)院，福建 廈門 361102；2.福建省種植業(yè)技術(shù)推廣總站，福建 福州 350003；3.大閩食品(漳州)有限公司，福建 漳州 363007)

近幾十年來，國內(nèi)外通過茶學(xué)、人體醫(yī)學(xué)、營養(yǎng)、環(huán)境等跨學(xué)科的研究，已深入了解茶葉各有關(guān)成分對人體的保健功能等實質(zhì)性問題。茶葉含有茶多酚、咖啡堿、茶氨酸、茶多糖等功能性成分，其中茶多酚具有較強的抗氧化能力與抑菌作用[1]；茶多糖具有降血糖和免疫活性[2]；咖啡堿可促進血液循環(huán)；茶皂甙具有抗菌活性；茶氨酸可保護神經(jīng)、調(diào)節(jié)情緒[3]等。

福建省是茶葉生產(chǎn)大省，茶產(chǎn)業(yè)已經(jīng)成為福建省農(nóng)業(yè)的支柱性產(chǎn)業(yè)，所產(chǎn)茶類含綠、白、紅、烏四大茶類及再加工茉莉花茶，擁有豐富的茶類資源與強大的茶產(chǎn)量優(yōu)勢。而飼料資源匱乏是制約我國養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要因素之一，充分利用當(dāng)?shù)禺a(chǎn)業(yè)資源優(yōu)勢開發(fā)新的飼料，是當(dāng)前我國飼料科技工作者的重要任務(wù)。由此，將茶資源(茶功能性成分、葉、籽、渣等)作為綠色飼料添加劑科學(xué)應(yīng)用于現(xiàn)代農(nóng)業(yè)養(yǎng)殖業(yè)中[4]，使其成為一種天然的肉品改良劑和提高肉品安全性成為可能。本試驗以羅非魚為研究對象，通過在飼料中添加不同水平的大葉種紅茶茶粉，考察其對羅非魚生長、肌肉品質(zhì)及抗氧化能力的影響，為茶葉添加劑的合理使用和養(yǎng)殖魚類肌肉品質(zhì)的改善提供理論依據(jù)。該研究對延長茶產(chǎn)業(yè)鏈，實現(xiàn)茶資源的全價利用、跨界開發(fā)有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗用魚

試驗用羅非魚初始體重75.23±0.42 g，體質(zhì)健康，規(guī)格一致，魚種來源校企合作單位廈門魚之家特種魚養(yǎng)殖場。

1.2 試驗飼料

試驗用茶為大閩食品(漳州)有限公司大葉種噴干紅茶粉(茶多酚含量35%、咖啡堿含量8.3%、水分4.5%)，試驗基礎(chǔ)飼料為廈門嘉康飼料有限公司鰻魚粉狀飼料，基礎(chǔ)飼料配方組成及主要營養(yǎng)指標(biāo)見表1。試驗以鰻魚成魚飼料為基礎(chǔ)飼料，在此基礎(chǔ)上分別添加0(對照組)、1%和2%的大葉種噴干紅茶粉，配制成試驗飼料1、2、3。各飼料采取逐級稀釋法混合均勻，投喂前添加1.2倍的水，攪拌均勻，制成團狀后投喂。

表1 基礎(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗在校企合作單位廈門魚之家特種魚養(yǎng)殖場進行，設(shè)計3組試驗，每組隨機投放試驗用魚33尾，組別標(biāo)記為A、B、C組，分別投喂試驗飼料1、2、3。試驗開始前用基礎(chǔ)飼料馴養(yǎng)羅非魚14 d，以適應(yīng)環(huán)境和試驗飼料。試驗開始后，每日16∶30分別投喂試驗飼料1次，投飼率為魚體重3%左右，各組保持基本一致投飼量水平，并根據(jù)生長、攝食情況調(diào)整。試驗養(yǎng)殖池為水泥池(4 m×2 m×1.1 m)，養(yǎng)殖池24 h不間斷充氣增氧，養(yǎng)殖期間水溫25～31℃，pH 7.5±0.3，溶解氧5.5～8.7 mg·L-1。養(yǎng)殖時間為180 d。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長指標(biāo)與形體指標(biāo) 養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，魚體饑餓24 h，稱每池魚總重，計算增重率、成活率；每池隨機取6尾羅非魚，測量其體高、體長、體重，解剖后稱內(nèi)臟重，計算肥滿度、內(nèi)臟比、體長體高比。

增重率(%)=[末重(g)-初重(g)]/初重(g)×100

成活率(%)=成活尾數(shù)/總尾數(shù)×100

內(nèi)臟比(%)=內(nèi)臟重(g)/體重(g)×100

體長體高比=體長(cm)/體高(cm)

1.4.2 肌肉成分和物理性能指標(biāo) 養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，各池隨機取6尾魚，取背鰭下方側(cè)線以上的背部肌肉，測定肌肉成分(水分、粗蛋白、粗脂肪含量與冷凍肉滲出損失)。

水分測定：105℃恒重法(GB 6435-86)

粗蛋白測定：凱氏定氮法(GB T6432-94)

粗脂肪測定：索氏抽提法(GB T6433-94)

冷凍肉滲出損失的測定：取15 g左右新鮮肌肉-20℃冷凍24 h后，取出于10℃左右環(huán)境下解凍，在解凍后4 h，分別用吸水紙拭擦凈表面滲出液，稱量魚肉重量，計算冷凍肉滲出損失：

冷凍肉滲出損失(%)=[解凍前肉重(g)-解凍后肉重(g)]/解凍前肉重(g)×100

離心機(TGL-16A)、紫外分光光度計(UV-2800A)、酶標(biāo)儀（Fluoroskan Ascent，Thermo Electron Corp Finland）、凍干機（FD-1PF）。

1.4.3 抗氧化能力指標(biāo) 養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，每池隨機取6尾魚，取背鰭下方側(cè)線以上的背部肌肉，測定肌肉的SOD(超氧化物歧化酶)、T-AOC(總抗氧化能力)、VE(維生素E)、MDA(丙二醛)。上述指標(biāo)均用南京建成生物技術(shù)研究所產(chǎn)試劑盒進行測定。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)以(平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，采用SPSS18.0進行單因子方差分析、LSD多重比較對數(shù)據(jù)進行處理和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅茶粉對羅非魚生長性能的影響

經(jīng)過180 d養(yǎng)殖，各組羅非魚生長性能，由表2可見。飼料中分別添加1%、2%紅茶粉對羅非魚的增重率、內(nèi)臟比、體高體長比、肥滿度均無顯著差異(P>0.05)。其中添加紅茶粉可增加魚的體重、降低內(nèi)臟比與體長體高比；而添加1%紅茶粉可提高羅非魚的肥滿度，當(dāng)添加比例達(dá)2%則降低了魚的肥滿度。

表2 紅茶粉對羅非魚生長性能及形體指標(biāo)的影響

注：同行數(shù)字后的小寫字母不同，表示二者之間有顯著性差異(P< 0.05)。下同。

2.2 紅茶粉對羅非魚肌肉成分和物理性能指標(biāo)的影響

從表3可見，飼料中分別添加1%、2%紅茶粉對羅非魚肌肉水分、粗蛋白含量和冷凍肉滲出損失無顯著影響(P> 0.05)。其中添加紅茶粉可增加羅非魚的粗蛋白含量，降低魚冷凍肉滲出損失。而添加紅茶粉顯著降低羅非魚肌肉粗脂肪含量(P> 0.05)，添加比例為1%、2%時，魚肌肉粗脂肪含量分別降低7.16%、10.74%。

表3 紅茶粉對羅非魚肌肉成分和物理性能指標(biāo)的影響

注：粗蛋白、粗脂肪表示為肌肉干物質(zhì)中的含量。

2.3 紅茶粉對羅非魚肌肉VE、MDA與抗氧化指標(biāo)的影響

從表4、5分別可見飼料中添加紅茶粉對羅非魚肌肉VE、MDA含量及抗氧化指標(biāo)SOD、T-AOC活性的影響。其中，添加紅茶粉可顯著增加羅非魚肌肉VE含量(P< 0.05)，添加比例為1%、2%時，VE含量分別增加18.26%、69.43%。添加紅茶粉可顯著降低魚肌肉中的MDA含量(P< 0.05)，添加比例為1%、2%時，MDA含量分別降低5.91%、7.96%。添加1%紅茶粉對魚肌肉中SOD、T-AOC活性的影響有所增加但無顯著差異；當(dāng)添加比例達(dá)2%時可顯著增或是魚肌肉中的SOD、T-AOC活性(P< 0.05)，增量分別為3.36%、52.96%。

表4 紅茶粉對羅非魚肌肉VE、MDA含量的影響

表5 紅茶粉對羅非魚肌肉抗氧化指標(biāo)的影響

3 結(jié)論與討論

3.1 紅茶粉對羅非魚生長、肌肉品質(zhì)的影響

試驗得出，在基礎(chǔ)飼料中添加紅茶粉可增加魚的體重、降低內(nèi)臟比，當(dāng)添加量為1%紅茶粉可提高羅非魚的肥滿度，當(dāng)添加比例達(dá)2%則降低了魚的肥滿度。而添加紅茶粉可增加羅非魚肌肉的粗蛋白含量，顯著降低粗脂肪含量，降低魚冷凍肉滲出損失。李金龍[5]研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加茶多酚可提高了青魚的特定生長率和肥滿度，但過高濃度茶多酚對青魚的生長表現(xiàn)出一定的抑制作用；魚體粗脂肪的含量隨茶多酚的添加量呈先下降后上升。龍萌[6]等研究發(fā)現(xiàn)茶多酚能提高團頭魴幼魚的增重率、特定生長率以及肌肉中粗蛋白含量。這與本試驗結(jié)果基本一致。

3.2 紅茶粉對羅非魚肌肉VE、MDA與抗氧化指標(biāo)的影響

VE作為抗氧化劑，具有保護含磷脂的生物膜免受脂質(zhì)過氧化損傷的作用，對于魚類的生長、發(fā)育和繁殖具有不可替代的重要作用[7]。過氧化產(chǎn)物MDA等對膜的流動性、交叉聯(lián)結(jié)、結(jié)構(gòu)功能等都會帶來不利影響，導(dǎo)致膜的孔隙擴大，通透性增加，細(xì)胞脆性增加，從而使細(xì)胞內(nèi)水分易于滲出，表現(xiàn)出肌肉滴水損失和烹飪損失增加的肉質(zhì)特征。SOD是機體清除自由基的關(guān)鍵酶類，而MDA作為脂類物質(zhì)氧化應(yīng)激的最終產(chǎn)物，可以衡量機體內(nèi)活性氧的水平和氧化應(yīng)激的程度[8]。機體抗氧化防御體系通過各組分間相互反應(yīng)可清除體內(nèi)自由基，阻斷其中的過氧化的途徑到實現(xiàn)抗氧化的目的。

本試驗得出，添加1%、2%紅茶粉可顯著增加羅非魚肌肉VE含量、SOD、T-AOC活性，顯著降低魚肌肉中的MDA含量，降低羅非魚冷凍肉滲出損失。郭芳[9]研究表明綠茶粉添加增量使肉雞肌肉pH值逐漸增加、滴水損失逐漸降低、MDA含量有所降低、VE的沉積量有所增加。李金龍[5]研究發(fā)現(xiàn)茶多酚能提高青魚血清中SOD活力，降低丙二醛(MDA)的含量。李明元等[10]研究表明茶多酚能提高豬肉的維生素E、肌苷酸(IMP)的含量。龍萌[6]、李華[11]研究表明，SOD活性越高、MDA含量越低的肌肉，其系水力越高、肉色越鮮艷，并且肉質(zhì)越細(xì)嫩。相關(guān)研究認(rèn)為動物機體防御體系中抗氧化能力越強，動物自身的抗逆性能越強，其貨架保存期越長[12-13]。由此根據(jù)本試驗結(jié)果，添加紅茶粉可有效防止羅非魚肌肉的脂類氧化，達(dá)到改善肌肉品質(zhì)，增長貨架期的作用。

此外，根據(jù)孫浪[14]關(guān)于茶氨酸可提高草魚免疫力、李金洪[15]關(guān)于茶皂素可提高肉雞免疫力、抗體水平等相關(guān)研究可知，添加茶葉將對魚飼養(yǎng)過程中的疾病防治起積極作用，這可作為本試驗后期延續(xù)研究的重點，則可推斷茶作為添加劑在魚飼料或魚類養(yǎng)殖中的應(yīng)用將有更闊的前景。

基礎(chǔ)飼料中添加紅茶粉可維持羅非魚的正常生長，可增加魚的體重、降低內(nèi)臟比與體長體高比(P>0.05)；1%紅茶粉可提高魚的肥滿度，比例達(dá)2%則降低了魚的肥滿度。1%、2%紅茶粉顯著降低魚肌肉的粗脂肪(P<0.05)，增加魚肌肉的粗蛋白含量、降低魚冷凍肉滲出損失(P>0.05)；1%、2%紅茶粉顯著增加羅非魚肌肉VE含量、顯著降低MDA含量(P<0.05)；1%紅茶粉可增加魚肌肉中的SOD、T-AOC活性(P>0.05)，比例達(dá)2%則可顯著增加魚肌肉中的SOD、T-AOC活性(P<0.05)。綜合羅非魚的生長性能、肌肉品質(zhì)和抗氧化能力指標(biāo)，紅茶粉的推薦添加量為2%。