滑莎

(黑土區(qū)農(nóng)業(yè)生態(tài)院重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所)，哈爾濱,150081)

趙紅盈 王從麗 王鑫鵬 李春杰

(黑龍江省森林保護(hù)研究所) (黑土區(qū)農(nóng)業(yè)生態(tài)院重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所)

舞毒蛾(Lymantriadispar(Linnaeus))屬鱗翅目(Lepidoptera)毒蛾科(Lymantriidae)毒蛾屬(Lymantria)，是一種對林業(yè)危害嚴(yán)重的世界性害蟲，其幼蟲具有分布廣，食性雜，危害重，順風(fēng)遷移等特點(diǎn)，可危害500多種植物[1-4]。雖然化學(xué)防治有較好的防治效果，但對環(huán)境和非目標(biāo)昆蟲的影響很大。我國部分舞毒蛾防控項(xiàng)目通過采取綜合防治措施也取得了較好的效果。國內(nèi)很早就試驗(yàn)或應(yīng)用一些生物防治方法，如曾用飛機(jī)噴灑舞毒蛾核型多角體病毒[5]和應(yīng)用舞毒蛾性信息素防治試驗(yàn)[6]，及Bt殺蟲劑的產(chǎn)業(yè)化和應(yīng)用[7]。遺憾的是這些研究成果未能在隨后的生產(chǎn)實(shí)踐中得到廣泛、持續(xù)地推廣應(yīng)用，其原因值得進(jìn)一步總結(jié)經(jīng)驗(yàn)和分析教訓(xùn)。對于整個林業(yè)主要害蟲的管理應(yīng)面向未來的社會發(fā)展和環(huán)境保護(hù)的需要，采取效果好且環(huán)境和生物安全的防治措施[8]。

昆蟲病原線蟲(EPN)是指體內(nèi)攜帶具有病原性的共生細(xì)菌，能引起昆蟲致病的一類寄生性線蟲，是昆蟲的重要天敵類群，對土著或鉆蛀性害蟲的治理尤為有效。具有廣譜、高效、對人畜和環(huán)境安全等優(yōu)點(diǎn)，是一種應(yīng)用前景非常廣闊的新型生物殺蟲劑。目前關(guān)于昆蟲病原線蟲用于小木蠹蛾(Holcocerusinsularis)[9]、荔枝擬木蠹蛾(Arbeladea)[10]、楊木蠹蛾(Cossuscossus)[11]、櫻桃實(shí)蜂(Hoplocampdanfengensis)[12]、光肩星天牛(Anoplophoraglabripennis)[13-14]、桃紅頸天牛(Aromiabungii)[15]、松褐天牛(Monochamusalternatus)[16]、梨小食心蟲(Grapholithamolesta)[17]和木麻黃毒蛾(Lymantriaxylina)[18]等難于用化學(xué)農(nóng)藥防治的林業(yè)害蟲研究已有報(bào)道，并且有些昆蟲病原線蟲已經(jīng)應(yīng)用到園林蛀干害蟲的生物防治當(dāng)中[19]，但尚未見昆蟲病原線蟲對舞毒蛾侵染效果的研究。為明確昆蟲病原線蟲對舞毒蛾不同齡期幼蟲的侵染能力，開展了室內(nèi)生測研究，以期為昆蟲病原線蟲對舞毒蛾的防治應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 研究方法

供試?yán)ハx病原線蟲：嗜菌異小桿線蟲(Heterorhaditisbacteriphora-NJ，Hb-NJ)和(H.bacteriophora-IGA，Hb-IGA)、小卷蛾斯氏線蟲(Steinernemacarpocapsea-All，Sc-All)、芫菁夜蛾斯氏線蟲(S.feltiae-IGA，Sf-IGA)，其中線蟲Hb-IGA和Sf-IGA從黑龍江省哈爾濱市分離獲得，線蟲Hb-NJ和Sc-All從美國引進(jìn)。4種(品系)線蟲均采用White-trap大蠟螟(Galleriamellonella)活體法繁殖[20]，收獲后潛水層法儲存于冰箱內(nèi)，8 ℃保存，30 d內(nèi)備用。大蠟螟由天津惠裕生物科技有限公司葡萄蜜蟲養(yǎng)殖場提供。

舞毒蛾幼蟲的飼養(yǎng)：3月中旬從哈爾濱市綠化地周邊的樹干、墻上、屋檐下采集舞毒蛾活卵塊，帶回實(shí)驗(yàn)室，置于直徑為6.5 cm、高度為10.5 cm的培養(yǎng)瓶內(nèi)，每瓶放1～3個卵塊，再將培養(yǎng)瓶置于25 ℃、光照16 h、相對濕度為60%的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。卵孵化后每天觀察并更換新鮮的楊樹葉片，將幼蟲的排泄物、食物殘?jiān)约八老x尸體清理干凈。待長成2齡、4齡和6齡幼蟲備用。

生物測定：用以上4種侵染期線蟲，每種線蟲設(shè)100、500、1 000條·頭-13個侵染濃度，同體積清水為對照(CK)，共13個處理。每處理3皿，每皿10頭幼蟲，采用直徑為9 cm的塑料培養(yǎng)皿，底部墊有雙層濾紙。每皿加入1 mL線蟲懸浮液，同時加一片新鮮的楊樹葉。置于黑暗培養(yǎng)箱中，24 ℃培養(yǎng)，每24 h調(diào)查幼蟲死亡情況，并計(jì)算校正死亡率。

2 結(jié)果與分析

2.1 EPN對舞毒蛾2齡幼蟲的侵染能力

用100、500、1 000條的劑量侵染2齡舞毒蛾幼蟲，結(jié)果顯示(表1)，在24 h時，侵染劑量為100條·頭-1的4種線蟲對舞毒蛾2齡幼蟲的致死率均為0，侵染劑量為500、1 000條·頭-1的Sc-All線蟲使2齡幼蟲校正死亡率均為26.7%，顯著高于其他3種線蟲(P<0.05)。在48 h時，侵染劑量為100條·頭-1的Sc-All線蟲使2齡幼蟲的校正死亡率(90%)顯著高于其他3種線蟲(26.7%～33.3%)(P<0.05)，500條·頭-1的Sc-All線蟲使2齡幼蟲的校正死亡率為100%，也顯著高于其他3種線蟲(46.7%～80.0%)，1 000條·頭-1的Sc-All線蟲使2齡幼蟲的校正死亡率為100%，與1 000條·頭-1的Hb-NJ線蟲的致死率(90%)差異不顯著(P≥0.05)，與Sf-IGA和Hb-IGA(73.3%)差異顯著(P<0.05)。在72 h時，3個侵染劑量的Sc-All線蟲對2齡幼蟲的校正死亡率均為100%，其他3種線蟲使2齡幼蟲的校正死亡率隨著侵染劑量的增加而升高(50.0%～83.3%，83.3%～93.3%，96.7%～100%)。

表1 EPN侵染劑量對舞毒蛾幼蟲的侵染效果

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同種侵染劑量的不同線蟲品種(系)數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.2 EPN對舞毒蛾4齡幼蟲的侵染能力

由表1可見，在24 h時，侵染劑量為100條·頭-1的4種線蟲對舞毒蛾4齡幼蟲的致死率均為0，侵染劑量為500、1 000條·頭-1的Sc-All線蟲使4齡幼蟲校正死亡率(16.7%和13.3%)顯著高于其他3種線蟲(P<0.05)。在48 h時，侵染劑量為100條·頭-1的Sc-All線蟲使4齡幼蟲的校正死亡率(90%)顯著高于其他3種線蟲的致死率(6.7%～26.7%)(P<0.05)，500、1 000條·頭-1的Sc-All線蟲使4齡幼蟲的校正死亡率(100%)仍顯著高于其他3種線蟲(23.3%～33.3%，36.7%～66.7%)(P<0.05)。在72 h時,3個侵染劑量的Sc-All線蟲對4齡幼蟲的校正死亡率均為100%，其他3種線蟲使4齡幼蟲的校正死亡率隨著侵染劑量的增加有升高的趨勢。Hb-IGA線蟲用100、500條·頭-1的侵染劑量對4齡幼蟲的校正死亡率(66.7%和93.3%)明顯高于對2齡幼蟲的致死率(50.0%和83.3%)，而3個劑量的Hb-NJ線蟲對4齡幼蟲的致死率(23.3%、46.7%和60.0%)明顯低于對2齡幼蟲的致死率(83.3%、93.3%和100%)(P<0.05)。

2.3 EPN對舞毒蛾6齡幼蟲的侵染能力

由表1可見，在24 h時，4種線蟲3個劑量的校正死亡率均為0。可以看出，隨著幼蟲齡期的增長，短時間內(nèi)高劑量的侵染仍然無效；48 h時，Sc-All線蟲100、500條·頭-1的劑量對6齡幼蟲的致死率(76.7%和100%)均顯著高于其他3種線蟲(P<0.05)，Sc-All和Sf-IGA線蟲用1 000條·頭-1的劑量使6齡幼蟲校正死亡率均為100%，顯著高于線蟲Hb-NJ和Hb-IGA(36.7%和30.0%)(P<0.05)，Sf-IGA線蟲的100條·頭-1的劑量48 h時的死亡率(60.0%)顯著高于對2齡(30.0%)和4齡(10.0%)的死亡率(P<0.05)。72 h時，以100條·頭-1的劑量，Sc-All和Sf-IGA線蟲對6齡幼蟲的致死率為100%和96.7%，顯著高于Hb-NJ和Hb-IGA(46.7%和36.7%)(P<0.05)；500、1 000條·頭-1的劑量，Sc-All和Sf-IGA的致死率均為100%，Hb-NJ和Hb-IGA對6齡幼蟲的致死率較100條·頭-1的明顯升高，尤其是線蟲Hb-NJ的侵染效果(90.0%和93.3%)明顯好于4齡幼蟲(46.7%和60.0%)(P<0.05)。

3 討論

4種供試線蟲的3個侵染劑量對2齡和4齡舞毒蛾幼蟲的侵染效果，從48 h時幼蟲的校正死亡率來看，Sc-All線蟲與相應(yīng)侵染劑量相比其侵染效果最好，并且500條·頭-1的侵染劑量與1 000條·頭-1的劑量效果幾乎相同。而從6齡幼蟲的校正死亡率來看，Sf-IGA線蟲用1 000條·頭-1的劑量48 h與Sc-All線蟲效果相同。這可能與線蟲的侵染方式和昆蟲行為有著直接關(guān)系。舞毒蛾2齡和4齡幼蟲體形小、爬行速度快。Sc-All線蟲屬于伏擊型侵染策略的線蟲，而Hb-IGA和Hb-NJ屬于追擊型侵染策略的線蟲，Sf-IGA屬于中間型線蟲，所以后3種線蟲對舞毒蛾2齡和4齡幼蟲的侵染效果較Sc-All差。隨著侵染劑量的增加和侵染時間的延長，72 h時，4種線蟲1 000條·頭-1劑量對舞毒蛾2齡幼蟲的致死率差異不顯著。但6齡幼蟲體形較大，中間型的Sf-IGA線蟲有更多的侵染機(jī)會，進(jìn)而侵染能力明顯增強(qiáng)。所以根據(jù)室內(nèi)生測結(jié)果，在進(jìn)行舞毒蛾2齡和4齡幼蟲防治試驗(yàn)時可選擇Sc-All線蟲，防治6齡幼蟲時可選擇Sc-All和Sf-IGA線蟲。根據(jù)舞毒蛾不同齡期的生活習(xí)性采用不同施用方法和劑量，進(jìn)一步探討實(shí)際可行的應(yīng)用技術(shù)，將為舞毒蛾的生物防治提供新途徑。

關(guān)于防治舞毒蛾國內(nèi)已采取過很多生物防治措施，如寄生蜂、病原真菌、病原細(xì)菌、病毒、植物源殺蟲劑和轉(zhuǎn)基因抗蟲品種等生物措施[1]，但未見利用昆蟲病原線蟲對舞毒蛾防治的研究報(bào)道。僅1992年報(bào)道過昆蟲病原線蟲S.feltiaeAgriotos對木麻黃毒蛾幼蟲(Lymantriaxylina)寄生效果較好并且林間防效為89.6%[18]。本研究中S.feltiae-IGA對6齡幼蟲致病效果明顯升高，與其研究結(jié)果相符，但還需要林間防治試驗(yàn)進(jìn)一步研究S.carpocapsea-All和S.feltiae-IGA的應(yīng)用效果，以期使昆蟲病原線蟲成為舞毒蛾幼蟲有效的生防制劑。

利用昆蟲病原線蟲對園林蛀干害蟲進(jìn)行生物防治成功的例子很多[19]，如對紅棕象甲(Rhyncophorusferrugineuss)生物防治[21]，斯氏線蟲(S.carpocapsae)在田間對紅棕象甲的防效相當(dāng)于內(nèi)吸殺蟲劑吡蟲啉的效果，并將線蟲制成了殼聚糖制劑[22-23]。但對林木葉面害蟲研究報(bào)道甚少，僅見昆蟲病原線蟲對鞭角華扁葉蜂(Chinolydaflagellicorni)致病能力的測定[24]，未見有防治應(yīng)用方面的研究，所以用昆蟲病原線蟲對葉面害蟲的防治技術(shù)具有一定的挑戰(zhàn)性。而昆蟲病原線蟲對一些蔬菜葉面害蟲的防治技術(shù)，如應(yīng)用昆蟲病原線蟲防治甘藍(lán)上小菜蛾(Plutellaxylostella)時加入葉面活性劑可以提高防效等[25]，為園林葉面害蟲的防治提供非常有價值的參考和借鑒。

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