宋游 周祥 宋燦燦 徐凡丁

(海南大學(xué)，?？冢?70228)

天然橡膠是重要的工業(yè)原料，是由橡膠樹(shù)中取出的膠乳經(jīng)過(guò)塑煉、混煉、壓延等工序生產(chǎn)加工而成的。中國(guó)是種植橡膠樹(shù)面積較大的國(guó)家。在我國(guó)海南省、廣東省、廣西壯族自治區(qū)以及福建省、云南省都有植膠區(qū)。隨著植膠面積的擴(kuò)大，橡膠樹(shù)病蟲(chóng)害的發(fā)生也日趨增多。尤其干旱高溫的氣候環(huán)境有利于介殼蟲(chóng)的繁殖和擴(kuò)散，橡副珠蠟蚧(ParasaissetianigraNietner)是近年來(lái)大面積爆發(fā)的介殼蟲(chóng)。橡副珠蠟蚧又名烏黑副盔蚧、橡膠盔蚧，屬同翅目(Hemiptera)蚧總科(Coccoider)蠟蚧科(Coccidae)副珠蠟蚧屬(ParasaissetiaTakahashi)[1]。蠟蚧分泌的蠟質(zhì)可占蟲(chóng)體質(zhì)量的58%～98%，在蟲(chóng)體表面形成固定形狀的厚蚧殼，既可以抵御外界不良因素的侵襲，使蚧蟲(chóng)具有很強(qiáng)的生存優(yōu)勢(shì)，又可以阻止殺蟲(chóng)劑的滲入，使人工防治難以奏效。蠟泌物種含有化學(xué)信息素在20世紀(jì)70年代就引起了人們的注意。曾推測(cè)跳小蜂寄生軟蚧類和蚜小蜂多寄生盾蚧類的這種固定的天敵和蚧蟲(chóng)之間的聯(lián)系，與蠟泌物所含化學(xué)成分有關(guān)[2]。但至今沒(méi)有有關(guān)橡副珠蠟蚧分泌物對(duì)螞蟻或寄生蜂有引誘作用的研究報(bào)道。在前人田間調(diào)查過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，黑褐舉腹蟻(Crematogasterrogenhoferi)是橡副珠蠟蚧的捕食性天敵，能有效控制橡膠林中橡副珠蠟蚧的種群數(shù)量[3]，黑頭酸臭蟻[Tapinomamelanocephalum(Fabricius)]是橡副珠蠟蚧的共生優(yōu)勢(shì)種，有黑頭酸臭蟻的橡膠樹(shù)上橡副珠蠟蚧的種群數(shù)量大[4]，副珠蠟蚧闊柄跳小蜂(MetaphycusparasaissetiaeZhang-and Huang)對(duì)產(chǎn)卵前期的橡副珠蠟蚧成蟲(chóng)控制效果好[5]。文中使用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)技術(shù)對(duì)橡副珠蠟蚧分泌物成分進(jìn)行研究，再對(duì)檢測(cè)到的組分一一進(jìn)行分析、篩選。再使用“Y”型嗅覺(jué)儀和觸角電位儀測(cè)試出橡副珠蠟蚧分泌物中對(duì)黑褐舉腹蟻、黑頭酸臭蟻和副珠蠟蚧闊柄跳小蜂有引誘作用的有效成分。希望能為揭示橡副珠蠟蚧與兩種螞蟻和副珠蠟蚧闊柄跳小蜂之間信息物質(zhì)和開(kāi)發(fā)新的防治技術(shù)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試蟲(chóng)和試劑

橡副珠蠟蚧由海南大學(xué)熱帶農(nóng)林學(xué)院養(yǎng)蟲(chóng)室提供(經(jīng)野外收集、接種、繁殖)。黑頭酸臭蟻和黑褐舉腹蟻定點(diǎn)采自海南省儋州市海南大學(xué)儋州校區(qū)農(nóng)科基地南側(cè)橡膠林；副珠蠟階闊柄跳小蜂本學(xué)院養(yǎng)蟲(chóng)室提供。

石油醚、正己烷、乙醇、苯這4種試劑用于處理GC/MS檢測(cè)樣本，進(jìn)行溶劑篩選。在橡副珠蠟蚧分泌物組分中選取5種化合物,買到化合物純品進(jìn)行引誘作用試驗(yàn)。試驗(yàn)所用標(biāo)準(zhǔn)化合物的名稱及其純度、來(lái)源見(jiàn)表1。

表1 5種標(biāo)準(zhǔn)化合物的名稱、純度及來(lái)源

1.2溶劑篩選

將養(yǎng)蟲(chóng)室中南瓜上飼養(yǎng)的橡副珠蠟蚧雌成蟲(chóng)用鑷子和解剖針取下800頭，用蒸餾水沖洗，分別浸泡在石油醚、苯、乙醇、正己烷溶液中靜置，取上層清液。使用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC/MS)檢測(cè)其成分。

1.3 橡副珠蠟蚧分泌物的提取及鑒定

提取方法參照謝映平等[6]，但有所改進(jìn)。取200頭橡副珠蠟蚧雌成蟲(chóng)，用蒸餾水沖洗。直接浸泡在正己烷溶液中，超聲波振動(dòng)10 min后靜置，取上清液過(guò)微孔濾膜。在氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC/MS)上進(jìn)樣檢測(cè),重復(fù)5次。

1.4 “Y”型嗅覺(jué)儀測(cè)定

“Y”型嗅覺(jué)儀測(cè)定參照祈偉隆等[7]，但有所改進(jìn)。試驗(yàn)使用“Y”型管的基部長(zhǎng)25 cm，內(nèi)徑2.5 cm，兩臂長(zhǎng)15 cm，內(nèi)徑1.5 cm。兩臂分別連接收集瓶、味源瓶、氣體流量計(jì)、洗氣瓶、裝有變色硅膠的干燥塔和空氣泵。

試驗(yàn)時(shí)一側(cè)味源瓶中放入1 μL藥品，另一側(cè)味源瓶放入1 μL蒸餾水作為對(duì)照。將待測(cè)昆蟲(chóng)單獨(dú)從“Y”型管基部放入,待蟲(chóng)爬入“Y”型管時(shí)計(jì)時(shí)5 min,分別記錄進(jìn)入“Y”型管兩臂的蟲(chóng)數(shù)量和每頭蟲(chóng)從釋放到達(dá)目的味管臂所需時(shí)間,在“Y”型管基部停留5 min仍不活動(dòng)的昆蟲(chóng)記錄為不反應(yīng)。每個(gè)處理重復(fù)50次,然后用洗滌劑清洗裝置、烘干,以降低不同處理間殘留氣味的影響,每測(cè)10頭蟲(chóng)時(shí)調(diào)換一下Y管兩臂的方向,以消除誤差。

1.5 數(shù)據(jù)分析

所獲取數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，差異顯著性采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 分泌物的化學(xué)成分

橡副珠蠟蚧分泌物化學(xué)成分的分析：從橡副珠蠟蚧雌成蟲(chóng)分泌物樣本的色譜圖(圖1)可知，分泌物進(jìn)樣后保留時(shí)間集中在11.43～45.28 min 。經(jīng)過(guò)在譜庫(kù)中檢索，得知其包含了44個(gè)組分(表2)，飽和烴23種、醇類2種、酯類6種、酚類2種、芳香烴1種、醛類3種、酸類2種、雜環(huán)化合物3種、醚類2種。

*表示出峰時(shí)間

表2 橡副珠蠟蚧雌成蟲(chóng)分泌物GC/MS檢測(cè)的化學(xué)組分

續(xù)(表2)

2.2 2種螞蟻和1種寄生蜂對(duì)6種合成揮發(fā)物的嗅覺(jué)反應(yīng)

用“Y”型嗅覺(jué)儀測(cè)試黑褐舉腹蟻、黑頭酸臭蟻和副珠蠟蚧闊柄跳小蜂對(duì)5種合成揮發(fā)物的嗅覺(jué)反應(yīng)(表3)，結(jié)果表明，2,4-二叔丁基酚對(duì)黑褐舉腹蟻的引誘作用顯著高于對(duì)照；二十八烷醇對(duì)黑褐舉腹蟻的引誘作用極顯著高于對(duì)照；棕櫚酸乙酯對(duì)黑頭酸臭蟻的引誘作用顯著高于對(duì)照；棕櫚酸乙酯對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的引誘作用顯著高于對(duì)照；二十八烷醇對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的引誘作用極顯著高于對(duì)照。說(shuō)明二十八烷醇和2,4-二叔丁基酚對(duì)黑褐舉腹蟻都有引誘作用，但二十八烷醇對(duì)黑褐舉腹蟻的引誘作用高于2,4-二叔丁基酚對(duì)黑褐舉腹蟻的引誘作用。棕櫚酸乙酯對(duì)黑頭酸臭蟻有引誘作用。棕櫚酸乙酯和二十八烷醇對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂都有引誘作用，但二十八烷醇對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的引誘作用高于棕櫚酸乙酯對(duì)副珠蠟蚧闊柄跳小蜂的引誘作用。

表3 2種螞蟻和1種寄生蜂對(duì)5種揮發(fā)物的嗅覺(jué)反應(yīng)

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差；*表示差異顯著(P<0.05)；** 表示差異極顯著(P<0.01)。

3 結(jié)束語(yǔ)

試驗(yàn)中所選的5種化合物是根據(jù)橡副珠蠟蚧成蟲(chóng)分泌物GC/MS檢測(cè)出的化學(xué)成分含量最多的5種化合物[8]。

本研究結(jié)果表明，5種化合物中有3種化合物對(duì)黑褐舉腹蟻、黑頭酸臭蟻和副珠蠟蚧闊柄跳小蜂具有一定的引誘作用。但對(duì)于不同劑量藥品的引誘力以及幾種藥劑混合物的引誘力還需進(jìn)一步驗(yàn)證。

將橡副珠蠟蚧分泌物揮發(fā)成分用于生產(chǎn)上引誘天敵和趨避共生優(yōu)勢(shì)種不僅能減少橡副珠蠟蚧的蟲(chóng)口數(shù)量，提高橡膠的產(chǎn)量與質(zhì)量，而且可以減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，減少對(duì)其他生物的傷害，減輕對(duì)自然環(huán)境的污染。具有廣闊的市場(chǎng)前景。

參 考 文 獻(xiàn)

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