程紅

摘 要：本文采用高校液相測定了阿奇霉素滴眼液中苯扎氯銨和阿奇霉素的含量，固定相為：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相色譜柱，以乙腈-磷酸鹽緩沖液（取0.05 mol·L-1磷酸氫二鉀溶液，用磷酸調節(jié)pH至8.2）（60∶40）為流動相，檢測波長為210nm；阿奇霉素在0.8～4.0mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關系；苯扎氯銨在4.0～6.0mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關系。阿奇霉素和苯扎氯銨的平均回收率分別為99.5%、99.4%，RSD為0.83%（n=6）、0.73%（n=6）；此方法簡便、準確、重現(xiàn)性好，可用于阿奇霉素滴眼液中阿奇霉素和苯扎氯銨的含量測定。

關鍵詞：阿奇霉素滴眼液；阿奇霉素；苯扎氯銨

阿奇霉素是在紅霉素結構上修飾后得到的一種廣譜抗生素。苯扎氯銨（Benzalkonium chloride）化學名稱為氯化二甲基芐基烴銨，白色蠟狀固體或黃色膠狀體。苯扎氯銨重要的陽離子季銨鹽表面活性劑，屬非氧化性殺菌劑，具有廣譜、高效的殺菌滅藻能力，廣泛用于皮膚和手術器械的消毒，也廣泛用于殺菌、消毒、防腐、去垢、增溶等方面。阿奇霉素滴眼液適用于治療由棒狀桿菌、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、緩癥鏈球菌組、肺炎鏈球菌的敏感株所引起的細菌性結膜炎。本文采用高校液相測定了阿奇霉素滴眼液中苯扎氯銨和阿奇霉素的含量。

1儀器與試藥

LC-100高效液相色譜系統(tǒng)（西安禾普生物科技有限公司）；ZYYLFS-5000L/D驗室廢水處理、醫(yī)療實驗室廢水處理（四川卓越水處理設備有限公司）；PH-660高精度實驗室酸度計（上海禾工科學儀器有限公司）；HWP-5實驗室蒸餾水器（鄭州澤銘科技有限公司）；上海721G可見光分光光度計（上海圣科儀器設備有限公司）；HAD-KQ-300GVDV三頻恒溫數(shù)控超聲波清洗器（北京恒奧德儀器儀表有限公司）；PH-660高精度實驗室酸度計（上海禾工科學儀器有限公司）。阿奇霉素和苯扎氯銨對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。磷酸二氫鈉（武漢強松精細化學品有限公司）、磷酸（武漢強松精細化學品有限公司）、磷酸二氫銨（武漢強松精細化學品有限公司）、甲酸（武漢強松精細化學品有限公司）、乙腈（武漢強松精細化學品有限公司）、三乙胺（天津市順隆達科技有限公司）、甲醇（武漢強松精細化學品有限公司）。

2含量測定

2.1色譜條件：確定色譜條件如下[1-5]。Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相色譜柱；以乙腈-磷酸鹽緩沖液（取0.05 mol·L-1磷酸氫二鉀溶液，用磷酸調節(jié)pH至8.2）（60∶40）為流動相，檢測波長為210nm；流速0.8mL·min-1。

2.2供試品溶液的制備

取阿奇霉素滴眼，精密量取，置10毫升容量瓶內(nèi)，用流動相定容，搖勻，濾過，即得。

2.3對照品溶液的制備

分別精密稱取苯扎氯銨和阿奇霉素對照品20mg、50mg，置10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4標準曲線的制備

制備濃度為0.8毫克每毫升、1.2毫克每毫升、1.6毫克每毫升、2.0毫克每毫升、2.4毫克每毫升、2.8毫克每毫升、3.2毫克每毫升、3.6毫克每毫升、4.0毫克每毫升的阿奇霉素對照品溶液，制備濃度為4.0毫克每毫升、4.4毫克每毫升、4.8毫克每毫升、5.2毫克每毫升、5.6毫克每毫升、6.0毫克每毫升的苯扎氯銨對照品溶液。分別按阿奇霉素、苯扎氯銨的測定參數(shù)繼續(xù)測定。以吸光度為橫坐標，濃度為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。試驗表明，阿奇霉素在0.8～4.0毫克每毫升范圍內(nèi)呈良好的線性關系；苯扎氯銨在4.0～6.0毫克每毫升范圍內(nèi)呈良好的線性關系。

2.5精密度試驗

取阿奇霉素和苯扎氯銨對照品溶液，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD分別為0.82%和0.83%。結果表明，本實驗精密度良好。

2.6重現(xiàn)性試驗

分別稱取同批阿奇霉素滴眼液樣品6份，測定含量并計算樣品的RSD值，RSD值為0.89%，0.79%，結果表明，此含量測定方法的重現(xiàn)性良好。

2.7穩(wěn)定性試驗

取樣品溶液，分別在0，2，4小時進樣測定，供試品阿奇霉素和苯扎氯銨峰面積的RSD分別為0.80%和0.72%。結果表明阿奇霉素和苯扎氯銨至少在4小時內(nèi)穩(wěn)定。

2.8回收率試驗

采用加樣回收試驗，取已知含量的同一批供試品各6份，分精密添加一定量的阿奇霉素和苯扎氯銨對照品，測定含量，計算回收率。6次測定的平均回收率分別為99.5%和99.4%，RSD分別為0.83%和0.73%。

2.9樣品含量測定

依照上述含量測定方法，三批樣品的阿奇霉素和苯扎氯銨的含量分別為100.1%、99.8%、101.1%；100.3%、100.8%、101.1%。

3討論

分別考察0.01mol·L-1磷酸二氫鉀溶液（用氫氧化鈉調節(jié)p H值至6.1）-乙腈（55∶45）；乙腈一水一冰醋酸（15：85：0.1）；乙腈-0.1%甲酸溶液（13∶87）；乙腈-0.05%磷酸二氫鈉-三乙胺-磷酸（50：50：0.01：0.01），甲醇-乙腈-0.1%磷酸（75∶10∶15），乙腈-磷酸鹽緩沖液（取0.05 mol·L-1磷酸氫二鉀溶液，用磷酸調節(jié)pH至8.2）（60∶40），甲醇-0.08%磷酸溶液（25：75），甲醇-0.1%磷酸（70∶30），乙腈-磷酸鹽緩沖液（取0.05 mol·L-1磷酸氫二鉀溶液，用磷酸調節(jié)pH至8.2）70∶30），水-甲醇-磷酸（10：90：0.01）為流動相，結果以乙腈-磷酸鹽緩沖液（取0.05 mol·L-1磷酸氫二鉀溶液，用磷酸調節(jié)pH至8.2）（60∶40）為流動相，供試品各峰分離效果最好。

參考文獻：

[1]洪博，郭允，李明銘，李丹，曲龍妹，張月秋，趙春杰.阿奇霉素干混懸劑的人體藥動學及生物等效性研究[J].中國藥房. 2009（08）

[2]姜建國，張西茹，楊梁，吳如金.高效液相色譜法分離測定阿奇霉素及其相關物質[J].中國現(xiàn)代應用藥學.2003（05）

[3]劉葆林.微生物法和高效液相色譜法測定注射用阿奇霉素含量的比較[J].安徽醫(yī)科大學學報.2000（05）

[4]劉紅梅，李欣，方光娟.反相高效液相色譜法測定乳糖酸阿齊霉素注射劑的含量[J].哈爾濱醫(yī)科大學學報.2000（03）

[5]潘強，張寧蘇，易大為，王巍，趙曉東.復方阿奇霉素葡萄糖注射液中阿奇霉素的HPLC測定[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志.2005（02）