張 朋，劉雯迪，劉施言，劉曉潼，桑茂誠，劉 璐，林海月，桑仲娜

（天津醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)系，天津300070）

碘是人體必需的微量元素之一，是甲狀腺激素的重要組成部分。碘缺乏或碘過量都會(huì)導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)一系列的障礙，由碘攝入不足所導(dǎo)致的一系列疾病稱為碘缺乏?。╥odine deficiency disorders，IDD），主要表現(xiàn)為甲狀腺腫、甲狀腺功能低下、腦發(fā)育滯后和智力下降等[1]；而長期碘過量攝入可導(dǎo)致碘過多?。╥odine excessive disorders，IED），主要表現(xiàn)為碘致甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)和自身免疫性甲狀腺疾病等[2]。有很多指標(biāo)可以用來評(píng)價(jià)人群的碘營養(yǎng)水平，如尿碘、促甲狀腺激素（TSH）、甲狀腺激素（T3、T4）、甲狀腺球蛋白（Tg）、甲腫率等[3-4]。唾液腺作為和甲狀腺、乳腺相似的碘富集的組織，也可以反映機(jī)體對(duì)碘的濃集能力。唾液樣本的采集具有操作方便快捷的優(yōu)勢(shì)，且不會(huì)對(duì)機(jī)體造成損傷。與尿液的取樣相比較，過程相對(duì)簡單，且不受時(shí)間的限制。張京鈴等[5]研究顯示，唾液碘和尿碘具有一定的相關(guān)性，并且尿碘波動(dòng)幅度較唾液碘的波動(dòng)幅度大。有研究顯示唾液的采集方式也會(huì)影響唾液中元素的最終的測(cè)定結(jié)果[6]。因此本研究通過兩個(gè)階段的調(diào)查，分別采集了刺激性唾液（stimulating saliva，SS）和靜息性唾液（resting saliva，RS），以及冬夏兩季的靜息性唾液，旨在通過比較不同采樣方式的唾液碘以及冬夏兩季的唾液碘，來探討唾液碘的穩(wěn)定性，以便尋找一個(gè)穩(wěn)定、簡便的指標(biāo)來評(píng)價(jià)機(jī)體的碘營養(yǎng)水平。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 本研究共召集185名志愿者，男85名，女100名，年齡18～22歲。納入標(biāo)準(zhǔn)為：身體健康，無甲狀腺疾病；在天津?qū)W習(xí)生活2年以上；每日高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)量低于1h，屬輕體力勞動(dòng)者；近1年未做過X線CT檢查，未服用含碘藥物或含碘補(bǔ)充劑。1.2 研究方法

1.2.1 樣本的采集 本研究分為兩個(gè)階段對(duì)唾液樣本進(jìn)行采集。第一階段，2015年11月初分別向82名志愿者采集了刺激性唾液和靜息性唾液各5 mL，共164份樣本；第二階段，在2015年12月初和2016年6月初分別向185名志愿者采集了冬季和夏季的唾液各5 mL，共370份樣本。

本研究未對(duì)每人的食鹽攝入量進(jìn)行精細(xì)計(jì)算，而參考了天津市居民的食鹽平均攝入量。由于天津是食用加碘鹽地區(qū)，據(jù)天津市疾病預(yù)防控制中心的調(diào)查得知[7]，天津地區(qū)每人每日平均攝入含碘鹽為11.45 g左右。

1.2.1.1 刺激性唾液的采集：志愿者在咀嚼無碘和檸檬酸的口香糖后，將無菌海綿置于口腔中（1～3min），待海綿吸收足夠的唾液（約5 mL）后取出放置在塑料瓶中，蓋好瓶蓋，嚴(yán)密封口以防蒸發(fā)，4℃冷藏保存待測(cè)定。

1.2.1.2 靜息性唾液的采集：志愿者口腔清潔后將唾液直接吐在收集唾液的塑料瓶中（約5 mL），蓋好瓶蓋，嚴(yán)密封口以防蒸發(fā)，4℃冷藏保存待測(cè)定。

1.2.2 24 h膳食記錄調(diào)查在第二階段采完冬季和夏季的靜息性唾液樣本后，分別對(duì)185名志愿者進(jìn)行為期3 d每天24 h膳食記錄調(diào)查。問卷填寫完畢后收回，如經(jīng)檢查審閱發(fā)現(xiàn)不合格者，聯(lián)系相應(yīng)志愿者進(jìn)行補(bǔ)充，保證問卷的準(zhǔn)確性。

1.3 唾液碘的測(cè)定 使用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）方法測(cè)定唾液中的唾液碘含量。以張京玲等的研究中的唾液碘的正常范圍70～150 μg/L為基準(zhǔn)，低于 70 μg/L 為碘缺乏狀態(tài)；70～150 μg/L 為碘適宜狀態(tài)；高于150 μg/L為碘過量狀態(tài)。

1.4 質(zhì)量控制 在調(diào)查開展之前，集中對(duì)所有采樣人員統(tǒng)一培訓(xùn)，指導(dǎo)采樣方法以及相應(yīng)的注意事項(xiàng)，務(wù)必通知到每一個(gè)志愿者，以獲得良好的依從性，最后進(jìn)行唾液樣本的采集。唾液樣本統(tǒng)一在中午12：00至1：30進(jìn)行收取，避免因采樣時(shí)間的差異而影響唾液碘的測(cè)定結(jié)果。最后采用雙錄入方式進(jìn)行數(shù)據(jù)的錄入和核對(duì)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入和核對(duì)。使用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件包建立數(shù)據(jù)庫，根據(jù)樣本量和數(shù)據(jù)分布特征采用合適的檢驗(yàn)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對(duì)于非正態(tài)資料，使用中位數(shù)、四分位數(shù)間距對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行描述性分析，使用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行差異性檢驗(yàn)，使用Spearman秩相關(guān)進(jìn)行相關(guān)性分析；對(duì)于正態(tài)資料，采用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行描述性分析，采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行比較；對(duì)于不同分組的分布采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較。顯著性水平α均為0.05。

2 結(jié)果

2.1 基本資料 志愿者的基本信息見表1，包括年齡、身高、體質(zhì)量、體質(zhì)指數(shù)（BMI）。第一階段，刺激性唾液和靜息性唾液各采集82份，共164份；第二階段，冬夏兩季節(jié)靜息性唾液各采集185份，共370份。

表1 志愿者的基本信息Tab 1 Basic information of volunteers

2.2 不同采樣方式對(duì)唾液碘濃度的影響 對(duì)刺激性唾液和靜息性唾液中的碘含量進(jìn)行測(cè)定。差異性分析結(jié)果顯示，不同采樣方式無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=0.03，P=0.97）；相關(guān)性分析結(jié)果顯示，刺激性唾液和靜息性唾液中的碘含量高度相關(guān)（r=0.99，P=0.00），見表2。

表2 被調(diào)查者刺激性與靜息性唾液碘含量Tab 2 Theiodineconcentrationofstimulatingsalivaandrestingsaliva

2.3 不同季節(jié)的唾液碘含量 對(duì)冬夏兩季唾液碘含量進(jìn)行差異性和相關(guān)性分析。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得知，兩個(gè)季節(jié)志愿者唾液碘含量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Z=1.84，P＞0.05）。同時(shí)，冬季和夏季唾液碘含量的秩相關(guān)分析結(jié)果顯示二者呈正相關(guān)（r=0.68，P＜0.05），見表3。

表3 冬夏兩季唾液碘的比較Tab 3 The comparison of resting salivary iodine concentrations betweenwinterandsummer

對(duì)冬夏兩季唾液碘濃度的分布進(jìn)行分析。本研究兩季唾液碘濃度的分布見圖1。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得知，冬夏兩季的唾液碘濃度的分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=2.54，P＞0.05）。

圖1 冬夏兩季唾液碘水平的分布Fig 1 The distribution of salivary iodine level between winter and summer

2.4 不同性別對(duì)唾液碘含量的影響 不同性別唾液碘濃度分別為：冬季[男：98.09（88.18～121.47）μg/L，女：101.03（69.68～140.16）μg/L]，夏季 [男：108.73（91.69～149.31）μg/L，女：110.29（85.13～160.08）μg/L]，見圖2。對(duì)不同性別的唾液碘含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的結(jié)果顯示，不同性別之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（冬季：Z=0.55，P＞0.05；夏季：Z=0.14，P＞0.05）。

圖2 男女唾液碘的含量Fig 2 The salivary iodine concontrations

2.5 不同季節(jié)的膳食碘攝入量 通過3 d每天24 h膳食記錄調(diào)查問卷并采樣前3日食物得到志愿者膳食碘攝入量。本研究采用11.45 g碘鹽中的碘含量得出志愿者從碘鹽中攝入碘的含量約為343.5 μg/d，去除烹調(diào)過程中碘的損失大約為30%，由此得出志愿者每日從碘鹽中攝入碘含量240.45 μg/d。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析可知，冬季和夏季的碘攝入量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見表4。

表4 冬夏兩季志愿者膳食碘攝入量Tab 4 Dietary iodine intake in subjects during winter and summer

2.6 不同季節(jié)膳食碘攝入量與唾液碘濃度的相關(guān)性 分別對(duì)冬夏兩季的膳食碘攝入量和唾液碘濃度做相關(guān)性分析。冬季碘攝入量和唾液碘濃度不存在相關(guān)性（r=0.03，P=0.87）；夏季碘攝入量和唾液碘濃度不存在相關(guān)性（r=0.06，P=0.78）。

3 討論

碘作為人體必需的微量元素，對(duì)生長發(fā)育和機(jī)體正常代謝有著十分重要的作用，因此能夠準(zhǔn)確迅速地了解機(jī)體的碘營養(yǎng)狀態(tài)具有重要的意義。當(dāng)前在流行病調(diào)查中，主要使用尿碘來反映人群的碘營養(yǎng)水平，而唾液作為常見的體液，其中也含有碘和大量與血液相似的生物活性物質(zhì)[8]。有研究顯示[9]，餐前唾液葡萄糖濃度可以代替血糖濃度，開展無創(chuàng)快速檢測(cè)，且比較穩(wěn)定。目前對(duì)于唾液碘的研究較少，唾液碘并未作為廣泛使用的碘營養(yǎng)評(píng)價(jià)的指標(biāo)應(yīng)用在碘營養(yǎng)調(diào)查之中。張京玲等通過對(duì)唾液碘和尿碘的研究[5]，發(fā)現(xiàn)唾液碘和尿碘也具有一定的相關(guān)性，并報(bào)道18～22歲健康成人的唾液碘濃度范圍為70～150 μg/L。而本研究通過對(duì)不同采樣方式唾液碘的比較，以及研究不同季節(jié)不同性別唾液碘的差異性，來對(duì)唾液碘是否可以作為一個(gè)反映碘營養(yǎng)水平的穩(wěn)定指標(biāo)做相關(guān)的探討。

不同采樣方式得到的唾液碘含量有可能不同。有研究顯示[6]，咀嚼口香糖能夠增加唾液的流率和pH，同時(shí)也能增加鈣離子和磷離子。亦有研究證明不同程度的檸檬酸刺激，能增加唾液流率和唾液淀粉酶（salivary alpha-amylase，sAA）活性，并且健康人兩者與檸檬酸刺激的面積和濃度呈正相關(guān)[10]。而對(duì)于不同采樣方式對(duì)唾液碘濃度的影響，尚未有研究報(bào)道。為探究兩種不同采樣方式對(duì)唾液中碘含量測(cè)定的影響，本研究在第一階段收集同一批人的刺激性唾液和靜息性唾液，經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析可知，兩種采樣方式對(duì)唾液碘的測(cè)定結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。因此，相對(duì)于其他生物標(biāo)志物，不同采樣方式得到的唾液碘水平是相同的。而在確定采樣方式對(duì)唾液碘結(jié)果測(cè)定無影響后，本研究在第二階段便使用收集相對(duì)簡單的靜息性唾液來進(jìn)一步分析不同季節(jié)唾液碘含量的差異性。

通過3 d每天24 h膳食記錄調(diào)查，可知本研究人群在冬季和夏季的膳食碘每日平均攝入量分別為 364.39 μg/d 和 391.85 μg/d，而中國居民碘的推薦攝入量和最高耐受攝入量分別為120 μg/d和600 μg/d[11]。本研究被調(diào)查人群為在校大學(xué)生，大多都在校食堂就餐，經(jīng)調(diào)查飯菜中亦含有富含碘的食物，因此整體處于攝入碘足量的水平，但未超過可耐受最高攝入值。冬季和夏季的唾液碘中位數(shù)分別為 99.98 μg/L 和 108.73 μg/L，以張京玲等報(bào)道的唾液碘正常值范圍70～150 μg/L為標(biāo)準(zhǔn)，被調(diào)查人群處于碘適宜的狀態(tài)，這與膳食調(diào)查的結(jié)果是一致的。而通過進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析可知，冬季與夏季的膳食碘攝入量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，即冬夏兩季膳食碘攝入量基本一致，這與學(xué)校食堂冬夏兩季飯菜的種類基本不變的情況是符合的。而通過分析膳食攝入碘和唾液碘之間的相關(guān)性可知，兩季膳食攝入碘和唾液碘之間均無相關(guān)性。分析其原因，可能是因?yàn)楸狙芯坎⑽磳?duì)膳食中食鹽的攝入量進(jìn)行精確測(cè)量，而是采取天津市碘鹽平均攝入量來計(jì)算碘的攝入情況，因此導(dǎo)致調(diào)查結(jié)果與實(shí)際攝入情況產(chǎn)生一定的誤差。

季節(jié)因素能夠影響碘的代謝。尿碘在不同季節(jié)和不同時(shí)段的測(cè)定波動(dòng)幅度較大，不僅受季節(jié)溫度的影響，還受食物、飲水、生活習(xí)慣和排汗量等因素的影響[12]。然而本研究結(jié)果顯示冬夏兩季節(jié)唾液碘濃度之間并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，即在碘攝入水平相同的情況下，季節(jié)的變化對(duì)唾液中的碘含量無顯著的影響。這說明在反映機(jī)體碘水平上，唾液要比尿液穩(wěn)定。并且本研究通過對(duì)不同性別的唾液碘水平分析得知，不同性別唾液碘含量的差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與上述結(jié)論也是一致的。這說明唾液樣本具有良好的穩(wěn)定性，不受溫度和性別的影響。

相比于尿樣本的收集，唾液樣本還具有方便采集且不受采樣時(shí)間限制的優(yōu)勢(shì)，并且操作方法容易被掌握，更適合于大樣本的采樣。而隨著分子生物學(xué)技術(shù)、基因組學(xué)等各項(xiàng)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于唾液的檢測(cè)中[13]，唾液生物標(biāo)志物的檢測(cè)也將被極大地推動(dòng)。因此，本研究認(rèn)為唾液樣本具有良好的穩(wěn)定性，可以作為一個(gè)穩(wěn)定、簡便的指標(biāo)來評(píng)價(jià)機(jī)體的碘營養(yǎng)水平，但若大范圍推廣使用唾液碘來作為反映碘營養(yǎng)水平的指標(biāo)，還需要通過更為廣泛以及不同年齡的人群和規(guī)范正常值范圍來進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

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